周亮 陳穎 姚忱 鄭曉新 李乃軍
摘 要:食物中存在的金黃葡萄球菌對人們的生命有一定的危害。食物被金黃葡萄球菌污染容易引起食物中毒。因此,檢測食物中是否存在金黃葡萄球菌非常重要,本文將針對金黃葡萄球菌的快速檢測方法進行分析,從而保證食品安全。
關鍵詞:金黃葡萄球菌;檢測方法;食品安全
Abstract:The presence of staphylococcus in food is harmful to peoples lives. When food is produced with Staphylococcus Aureus, it is easy to cause food poisoning. It is very important to detect the presence of Staphylococcus Aureus in food, this article we will be for the rapid detection of Staphylococcus Aureus analysis, so as to ensure food safety.
Key words:Staphylococcus aureus; Detection method; Food safety
隨著時代的發展,人們的生活節奏也逐漸增快,大多數人為了提高生活效率和工作效率,會選擇便捷、快捷的用餐方式,例如:外賣餐飲、外賣生鮮食物等。在此情況下,食品安全問題成為了人們關注的焦點。食物在生產過程中很容易被微生物污染,引發食品安全事件。我國微生物性食物中毒人數占總食物中毒人數的30%以上。其中,微生物性食物中毒中的1/4是由金黃葡萄球菌引起的。因此檢測金黃葡萄球菌尤為重要。
1 金黃葡萄球菌簡介
1.1 金黃葡萄球菌的特點
金黃色葡萄球菌簡稱金葡菌,在產品生產過程中是最常見的病菌之一。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界,很容易污染食物,導致人體患病。在我國,因金黃色葡萄球菌引發的食物中毒事件頻頻發生。其主要原因是金黃色葡萄球菌可以依附在肉類、蛋類、豆類以及乳類等食品上,導致食品腐爛變質,進而引發食物中毒。
1.2 金黃葡萄球菌的致病性
金黃葡萄球菌容易導致食物中毒的根本原因是,金黃葡萄球菌可以產生多種因素,細菌性毒素就高達14種。金黃葡萄球菌還會損壞人體細胞,導致血液中的纖維蛋白沉淀,導致人們出現食物中毒癥狀,甚至會引起細菌感染、化膿感染,導致肺炎、心包炎等多種疾病。
1.3 金黃葡萄球菌的耐藥性
近幾年,細菌感染導致的疾病越來越多,對抗菌藥物的運用也越來越廣泛。相關研究人員對金黃色葡萄球菌頭孢唑林、環丙沙星、紅霉素、青霉素、左氧氟沙星、四環素與阿莫西林等的耐藥性進行統計分析,得出以下結論,金黃色葡萄球菌對于抗菌藥物的耐藥性比較高,因此檢測食物中是否含有金黃葡萄球菌非常有必要[1]。
2 金黃葡萄球菌檢測方法
由于金黃葡萄球菌傳染快、吸附性強、感染力度大,為了保證人們的生命安全,對金黃葡萄球菌進行檢測時可運用以下幾種方法。
2.1 傳統檢測方法
傳統檢測方法主要分為定性檢測和定量檢測兩種。定性檢測方法是在無菌條件下,將需要檢測的樣品在一定溫度下培養一段時間后,將樣品接種到血平板上,觀察培養菌落特征,并通過實驗鑒定菌落。定量檢測方法是將3種不同濃度的病菌接種到樣品上,通過檢測試劑盒,對金黃色葡萄球菌進行檢查得出結果。傳統檢測方法操作時間過長,操作細節繁瑣,很難快速檢測出是否存在金黃葡萄球菌。
2.2 以免疫學原理為基礎的快速檢測方法
2.2.1 乳膠凝集檢測法
乳膠凝集法是用乳膠顆粒標記抗體,金黃葡萄球菌中的抗原與抗體結合后,會產生肉眼可直觀觀察到的凝集反應,據此對金黃色葡萄球菌進行檢測。乳膠凝集法有著結果直觀可見,操作細節簡單,靈活度高等優點。
2.2.2 酶聯免疫吸附檢測法
應用酶聯免疫吸附法檢測黃金葡萄球菌具有檢測速度快、檢測準確度高等特點。酶聯免疫吸附法主要是將酶分子與抗體(或抗原)分子聯合形成-酶標記分子。當它與待測物中相應的抗原(或抗體)反應時會形成酶抗原-抗體復合物,加入酶底物后,復合物中的酶會水解底物,使無色的底物溶液生成有色的反應產物。根據顏色的深淺,即可測出溶液中抗原(或抗體)的量。
2.2.3 免疫磁性微球法
免疫磁性微球法又稱免疫磁珠法。主要是利用表面結合有單克隆抗體的磁性微球的特異性吸附目標致病菌,免疫磁性微球法與其他檢測方法相結合,可實現快速檢測[2]。
2.2.4 免疫層析檢測法
免疫層析法主要是利用毛細作用,將特異性抗體固定于硝酸纖維素膜的某一區帶,當該干燥的硝酸纖維素一端浸入樣品(尿液或血清)后,由于毛細管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當移動至固定有抗體的區域時,樣品中相應的抗原即與該抗體發生特異性結合,若用免疫膠體金或免疫酶染色可使該區域顯示一定的顏色,從而實現特異性檢測。免疫層析法檢測速度快,檢測結果準確度高。
2.3 以分子生物學原理為基礎的快速檢測方法
2.3.1 聚合酶鏈反應檢測法
聚合酶鏈反應法具有靈敏度高、特異性強、操作便捷且檢驗結果準確等優點。聚合酶鏈反應法主要是根據金葡萄球菌的特異性基因進行檢測。一般可在24 h內得出檢查結果。
2.3.2 實時熒光定量PCR檢測法
實時熒光定量PCR檢測法,檢測結果合格率高達100%,且具有操作簡單、得出結果快速高效、高通量和高敏感性等特點。實時熒光定量PCR檢測法主要是通過在PCR反應體系中加入熒光染料,對樣本進行定量分析[3]。
2.3.3 環介導等溫擴增檢測法
環介導等溫擴增檢測法,是一種新型檢測方法,具有靈敏度高、操作便捷且得出結果快速等優點。且環介導等溫擴增檢測與國標方法結果一致。也是目前常用的金黃葡萄球菌檢測方法之一[4]。
2.3.4 基因芯片檢測法
基因芯片技術檢測法是一種多學科技術相結合而產生的高新技術檢測方法。且具有操作簡單、結果快速、準確度高和重復性好等特點。并且檢測結果與傳統方法檢測結果一致,且靈敏度比實時熒光定量PCR檢測法高。
2.4 生物傳感器法
生物傳感器檢測方法主要是通過將生物成長過程中產生的各種信號,如:物理信號、化學信號、光信號和熱信號等,轉化成為相應的電信號,通過檢測電信號,獲取目標檢測信息的方法。用免疫生物傳感器檢測金黃葡萄球菌的檢測結果非常準確,且時間快、操作簡單。
3 結語
金黃葡萄球菌作為最常見的微生物致病細菌,經常會引起細菌性食物中毒。為了有效避免食物中毒給人們帶來的危害,對金黃葡萄球菌進行快速檢測有著非常重要的作用。將傳統檢測方法與新型檢測方法相融合,可得到快速、準確的檢測結果,避免因金黃葡萄球菌而引起食品安全問題。相關食品安全檢測部門要不斷對檢測方法和檢測手段進行更新,避免金黃葡萄球菌給人們帶來危害,為人民提供更加便捷、可靠的快速檢測方法,實現食品安全。
參考文獻:
[1]吳 帆.寧夏地區牛源金黃色葡萄球菌生物被膜相關基因檢測及耐藥性研究[D].銀川:寧夏大學,2017.
[2]黃煥宜,肖樹榮,謝淑賢,等.應用免疫磁性微球快速鑒定金黃色葡萄球菌[J].中國國境衛生檢疫雜志,2019(2):81-83.
[3]宮 強.鼠傷寒沙門氏菌ompc基因PCR檢測方法的研究[J].2015,36(16):40-43.
[4]郭建平,萬佳佳,陸兆新,等.基于可視化環介導等溫擴增技術快速檢測金黃色葡萄球菌[J].食品科學,2019,40(20):325-331.