獻血者血液篩查中ALT與HBV、HCV的相關性分析

（曲靖市中心血站，云南 曲靖 655000）

丙氨酸氨基轉移酶（ALT）主要存在于人體的肝細胞內，是肝臟損傷的重要指標之一，也是我國采供血機構對獻血者血液篩查的一項指標。ALT是我站乃至全國采供血機構血液報廢的主要原因[1]，所以我們對2015年～2017年獻血者血液中ALT、HBsAg、HBV-DNA、HCVAb、HCV-RNA檢測結果進行回顧性分析，探討獻血者血液篩查中ALT與HBV、HCV的相關性及ALT篩查在血液安全中存在的意義。

1 對象與方法

1.1 對象：來源于本站2015年1月至2017年12月無償獻血者的116414份血液樣本，獻血者體檢均符合《獻血者健康體檢要求》。留取的檢驗血樣均符合《血站技術操作規程》。

1.2 儀器和設備：日立7020全自動生化分析儀，FAME24/20（瑞士HAM-ILTON公司），TECAN EVO CLINCIAL 150-8（長沙泰肯生物科技有限公司），Chitas BSS1200全自動核酸純化儀（上海浩源生物科技有限公司），ABI7500實時熒光定量PCR系統（美國ABI公司）。

1.3 試劑：ALT試劑（日本和光，四川邁克），HBsAg試劑（北京萬泰，珠海麗珠），HBV-DNA（上海浩源），HCV-Ab（北京萬泰，珠海麗珠），HCV-RNA（上海浩源）。

1.4 方法：ALT采用日本和光和四川邁克兩個廠家的試劑用全自動生化儀進行檢測，結果判定以＞50 U/L為陽性結果（即ALT異常），≤50 U/L為陰性結果（即ALT正常）。HBsAg采用北京萬泰和珠海麗珠兩個廠家的試劑用全自動酶免分析儀進行檢測，結果判定樣本OD值S/CO≥1為HBsAg陽性，樣本OD值S/CO＜1為HBsAg陰性。HCVAb采用北京萬泰和珠海麗珠兩個廠家的試劑用全自動酶免分析儀進行檢測，結果判定樣本A值＜臨界值（CUTOFF）者為HCV-Ab陰性，結果判定樣本A值≥臨界值（CUTOFF）者為HCV-Ab陽性，樣本A值在0.5×（CUTOFF）-1.0×（CUTOFF）者為可疑，進行復查。HBVDNA、HCV-RNA是酶免檢測陰性、待查、ALT和TP陽性的樣本采用上海浩源的試劑用全自動核酸純化儀提取核酸，用ABI7500進行擴增，Ct值≤45為反應性，Ct值＞45為非反應性。

1.5 統計學處理：采用SPSS22.0統計學軟件對實驗數據進行統計分析。組間比較用卡方檢驗，以P＜0.05為差別有統計學意義，以P＞0.05為差別無統計學意義。

2 結果

2.1 2015年～2017年共檢測116414份獻血者樣本，ALT、HBsAg、HCV、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA檢測陽性情況見表1。

2.2 116414份異常無償獻血者中ALT陽性者3660人份，ALT合并HBsAg陽性的有11份，占全部ALT異常者0.30%；ALT合并HCV-Ab陽性的有18人份，占全部ALT異常者0.49%；ALT合并HBV-DNA陽性的有2人份，占全部ALT異常者0.05%；HBsAg合并HCV-Ab陽性的有5份，占全部ALT異常者0.14%。ALT異常合并HBsAg/HCV-Ab/HBVDNA陽性者31人份，占全部ALT異常者的0.85%，單ALT異常者3629人份，占全部ALT異常者的99.15%。HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA陽性引起ALT異常升高的結果和ALT異常升高的相關性分析見表2～表4。

表1 116414名獻血者ALT、HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA檢測結果

表2 HBsAg陽性者與HBsAg陰性者的ALT結果異常的比較

表3 HCV-Ab陽性者與HCV-Ab陰性者的ALT結果異常的比較

表4 HBV-DNA陽性者與HBV-DNA陰性者的ALT結果異常的比較

3 討論

ALT廣泛存在于多種器官中，按含量多少順序為肝臟、腎臟、心臟、骨骼肌等，機體的器官有實質性損害時，ALT均可增高。雖然ALT可以比較敏感的檢測到肝臟的早期損害，但ALT值的升高并不完全說明肝臟受到了損害，也有可能是其他器官受到損傷。ALT值的升高除了病理因素的影響；還有一些其他因素的影響比如有文獻指出：男性、年齡、體質量、睡眠、飲酒情況、近期有服藥史、激烈運動和重體力勞動，這7種非病理因素是導致獻血者ALT值升高的危險因素[2]，同時還和標本的采集、保存、標本內干擾物、檢測過程的操作、質量控制、試劑、設備等都可能影響ALT的檢測值[3]，因此有的人認為ALT不宜作為血液篩查強制性指標。

我們對2015年1月至2017年12月在本站共116414人份無償獻血者的標本進行檢測，ALT異常者3660人份，不合格率為3.14%；HBsAg陽性452份，不合格率為0.39%；HCV-Ab陽性279份，不合格率為0.24%；HBV-DNA陽性94份，不合格率為0.081%。未檢出HCV-RNA陽性標本可能原因有：①一些感染者體內的HCV-RNA呈現間段性存在；②感染者為回復期時，病毒的核酸復制停止或者復制減弱，導致血液中的病毒核酸沒有或者含量很低；③可能因為我們用的試劑靈敏度不高，以至于檢測不到；④病毒變異；⑤可能和我們操作人員操作有關等。根據表2～4所示：HBsAg與ALT比較：卡方值=0.752，P=0.386；HBV-DNA與ALT比較：卡方值=0.072，P=0.788。HBsAg和HBV-DNA陽性者中ALT的異常率和HBsAg和HBV-DNA陰性者中ALT的異常率無統計學差異（P＞0.05），即單項ALT的升高和乙型肝炎病毒的感染沒有相關性，與程玉根[4]、任本春[5]報道的結果一致。根據表3所示HCV-Ab與ALT比較：卡方值=10.048，P=0.002，HCV-Ab陽性者中ALT的異常率與HCV-Ab陰性者中ALT的異常率有統計學差異（P＜0.01），即單項ALT的升高和丙型肝炎病毒的感染有相關性，和申俊鋒[6]、李明霞[7]、朱邵汶[8]等報道的結果一致；和梁浩堅[9]、周艷[10]報道的不一致，原因可能和各地區的流行病學，及獻血前的初篩項目和試劑的不同以及工作人員的操作有關系。以上結論只能代表本地區的無償獻血者的HBsAg、HBV-DNA、HCV-Ab、HCV-RNA陽性和ALT異常的關系，不能代表其他地區。

雖然本文的結果單項ALT的升高和丙型肝炎病毒的感染有相關性，但是占ALT陽性的比率為0.49%（18/3660），占ALT陽性的比率很小，大部分的獻血者ALT異常都為非病理因素引起的，并非為HBV、HCV感染所致，同時現在ELISA技術的不斷完善，以及核酸檢測在獻血者標本篩查的應用，已經在很大程度上縮短了HBV、HCV感染的窗口期。現在本站以及全國由于ALT異常報廢的血液占主要原因，造成了很大的浪費，在目前臨床用血比較緊張的情況下，是否取消獻血前ALT的篩查還是更改ALT的閾值這還有待于相關專家和業內人士做更多的研究。我們現在能做的就有以下幾點：①加強技術人員的培訓；②做好獻血者的詢問工作；③加強獻血前的宣傳工作；④使用符合要求的廠家的試劑；⑤做好室內質控和室間質評；⑥發展更多的固定重復獻血者。總之我們應加強做好以上幾點，盡可能的降低ALT的不合格率以及提高HBV、HCV檢出率，不僅降低了因ALT異常導致的血液報廢率，保護血液資源，同時也降低了因輸血而傳播疾病的風險。