腫瘤標志物AFP和PIVKA-Ⅱ對肝癌的診斷價值

胡仁智 申 波* 周 穎 郭廣波 曾 莉 孫 偉

（1 重慶市中醫院檢驗科，重慶 400021；2 重慶市中醫院病案統計室，重慶 400021）

肝癌是癌癥導致死亡的第3大常見病因，防治肝癌的關鍵在于早診斷、早治療。雖然影像診斷技術不斷發展，但仍有一定局限性，癌癥早期不易發現，血清腫瘤標志物檢測依然不可或缺[1]。甲胎蛋白（AFP）是目前最常用的肝癌標志物，研究發現，血清AFP為陰性的肝癌患者的比例正呈現不斷上升的趨勢[2]，所以單純依靠AFP極易導致漏診。PIVKA-Ⅱ是一種異常凝血酶原，研究發現良、惡性肝臟疾病患者血清PIVKA-Ⅱ水平差別顯著。本課題將收集肝癌患者、肝硬化患者、其他肝臟疾病患者血清，檢測AFP及PIVKA-Ⅱ濃度，探討腫瘤標志物PIVKA-Ⅱ和AFP對肝癌的診斷價值，提高對肝癌的早期診斷。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：本次實驗收集了164例來我院檢查的樣本，并將其分為四組。其中第一組為我院收治的經病理確診為肝癌的61例，其中男性50例，女性11例，年齡30～80歲，即為肝癌組。第二組為同期住院（已排除肝癌）的肝硬化30例，其中男性27例，女性3例，年齡27～74歲，即為肝硬化組。第三組為同期住院（已排除肝癌、肝硬化）的其他肝臟疾病33例，病因包括乙型肝炎、戊型肝炎、脂肪肝、肝功能不全、肝囊腫、藥物性肝炎等，其中男性19例，女性14例，年齡21～81歲，即為其他肝病組。第四組為健康體檢者40例，其中男性24例，女性26例，年齡32～80歲，即為對照組。三組一般臨床資料的差異均無統計學意義（P＞0.05），可以進行比較。

1.2 檢測方法：AFP檢測使用西門子Centaur XP化學發光免疫分析儀，試劑為西門子配套試劑。PIVKA-Ⅱ檢測使用雅培I4000化學發光免疫分析儀，試劑為雅培配套試劑。

1.3 統計學方法：采用SPSS17.0統計軟件進行分析。AFP和PIVKA-Ⅱ結果呈偏態分布，采用中位數（范圍）表示，組間比采用秩和檢驗。分別繪制AFP和PIVKA-Ⅱ的ROC曲線，計算敏感性、特異性及肝癌的最佳診斷值，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 4組AFP和PIVKA-Ⅱ水平的比較：肝癌組的AFP和PIVKA-Ⅱ濃度明顯高于肝硬化組、其他肝病組及正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01），見表1。

表1 4組AFP和PIVKA-Ⅱ水平的比較

2.2 ROC曲線分析

2.2.1 AFP檢測的ROC曲線分析：以肝癌組和其他3組（肝硬化組、其他肝病組、正常對照組）為對照，繪制AFP的ROC曲線。根據約登指數最大為最佳臨界值，其曲線下面積為0.891時，敏感度為91.8%，特異度為71.8%，故采用23.3 ng/mL作為診斷肝癌的最佳臨界值。見圖1。

圖1 AFP檢測的ROC曲線

2.2.2 PIVKA-Ⅱ檢測的ROC曲線分析：以肝癌組和其他3組（肝硬化組、其他肝病組、正常對照組）為對照，繪制PIVKA-Ⅱ的ROC曲線。根據約登指數最大為最佳臨界值，其曲線下面積為0.894時，敏感度為78.7%，特異度為94.2%，故采用60.48 mAU/mL作為診斷肝癌的最佳臨界值。見圖2。

圖2 PIVKA-Ⅱ檢測的ROC曲線

2.3 AFP和PIVKA-Ⅱ單項診斷和聯合診斷肝癌的價值：AFP和PIVKA-Ⅱ單項診斷和聯合檢測的敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值結果見表2。單獨檢測診斷肝癌時，AFP檢測的敏感度高于PIVKA-Ⅱ，為91.8%，而PIVKA-Ⅱ檢測的特異度高于AFP，為94.17%。AFP和PIVKA-Ⅱ聯合檢測時，當AFP和PIVKA-Ⅱ二者同時陽性時，特異度可提高到97.09%；當AFP和PIVKA-Ⅱ二者任一陽性時敏感度可提高到95.08%。

表2 AFP和PIVKA-Ⅱ單獨和聯合檢測對肝癌診斷價值評價（%）

3 討論

肝癌是世界第5位最常見癌癥，其病因和發病機制尚未確定，在世界總肝癌患者中中國人占了約1/2，病死率已高達52%[3-4]。肝癌起病隱匿，一般早期癥狀不明顯，臨床上難以發現，發現時多處于中晚期，疾病進展迅速，治療困難，預后很差[5]。因此能夠早發現、早診斷、早治療對原發性肝癌的治療效果和預后具有重要的意義[6]。

AFP是一種糖蛋白，正常情況下，AFP主要來自胚胎的肝細胞，胎兒出生后約兩周AFP從血液中消失，因此正常人血清中的AFP含量不到20 μg/L。當肝細胞發生癌變時，機體恢復了產生AFP的功能，并且隨著病情惡化它在血清中的含量也會急劇增加。過去一直認為AFP具有確立診斷、早期診斷、鑒別診斷的作用，是診斷肝癌的特異性腫瘤標志物。大量的臨床卻發現，部分肝硬化患者會長期出現AFP達到上千，但多年都沒有肝癌的跡象；同時發現有些晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍正常，檢測值不超過10 μg/L[7]。還有臨床發現在生殖細胞腫瘤出現時，AFP陽性率為50%[8]。所以僅僅憑借甲胎蛋白偏高的指標來診斷或排除一種疾病是不可靠的。

PIVKA-Ⅱ為維生素K缺乏或者拮抗誘導蛋白2（PIVKA-Ⅱ），是一種異常凝血酶原，正常情況下，凝血酶原前體在分泌進入血漿前在肝臟內由γ谷氨酰羧化酶催化進行翻譯后羧化（加一個羧基）。因為凝血酶原羧基化步驟對維生素K高度依賴，維生素K缺乏是產生異常凝血酶原的主要原因。研究顯示檢測血清PIVKA-Ⅱ可以提高肝癌的早期篩查和診斷[9]。

本研究結果顯示，肝癌組中的AFP和PIVKA-Ⅱ水平明顯高于肝硬化組、其他肝病組及正常對照組，這說明單獨檢測AFP和PIVKA-Ⅱ能為肝癌的診斷提供依據。本實驗顯示AFP診斷肝癌的ROC曲線下面積為0.891，以23.3 ng/mL為最佳臨界值時敏感度為91.80%，特異度為71.81%；顯示PIVKA-Ⅱ診斷肝癌的ROC曲線下面積為0.894，以260.48 mAU/mL為最佳臨界值時敏感度為78.69%，特異度為94.17%，這與既往文獻報道的數值想接近[10]。二者結果相比較，單獨檢測AFP時敏感度較高，而單獨檢測PIVKA-Ⅱ時特異度較高。

本研究將AFP和PIVKA-Ⅱ進行聯合診斷分析，當AFP和PIVKA-Ⅱ二者同時陽性時，特異度可提高到97.09%；當AFP和PIVKA-Ⅱ二者任一陽性時敏感度可提高到95.08%。提示在具體的臨床工作中，選擇敏感度高的AFP和PIVKA-Ⅱ并聯檢測方案，可以進行人群的篩查，盡可能的降低漏檢；選擇特異性高的AFP和PIVKA-Ⅱ串聯檢測方案，可以進行肝癌的確診，所以可以結合臨床的診斷目的選擇不同的聯合檢測方案。綜上所述，聯合檢測AFP和PIVKA-Ⅱ能提高肝癌的診斷敏感性，避免臨床漏診肝癌的發生。這種聯合檢測的優勢在一些臨床試驗中初步得到證實[11]，但在臨床中大規模推廣應用仍有待進一步研究和驗證。本研究較粗淺，肝癌分組不夠細，病例數也不夠多，以后的研究將進一步擴大研究樣本量，并對PIVKA-Ⅱ用于肝癌療效和預后的判斷方面需要進一步的研究和驗證。