鹽炙對(duì)杜仲丸抗疲勞作用的影響研究

侯 惺 賈方真 李 娟 張 莉 趙 露 杜桂秋

（棗莊市立醫(yī)院，山東 棗莊 277100）

隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展，社會(huì)生活水平的提高，人們對(duì)健康的認(rèn)識(shí)越來(lái)越深，同時(shí)亞健康威脅了我們的生活質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織的調(diào)查顯示，其余75%以上的人都處在亞健康狀態(tài)。我們有必要對(duì)抗疲勞作用的中藥飲片進(jìn)行文獻(xiàn)研究，抗疲勞作用研究多是單味藥研究，如現(xiàn)代藥理研究杜仲[1-2]有耐缺氧、抗氧化、提高免疫力、降血脂及增加體質(zhì)量的作用，《本經(jīng)》描述杜仲“主腰脊痛，補(bǔ)中益精氣，堅(jiān)筋骨”，續(xù)斷[3]為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根。此外還有對(duì)枸杞[4-5]、紅景天[6-7]、黃精[8]、人參[9]等抗疲勞作用研究。復(fù)方藥研究很少，杜仲和續(xù)斷二者配伍，在骨傷科常做藥對(duì)使用，也獨(dú)立成方，等量配伍組成杜仲丸，始載于《校注婦人良方》卷十二。亦有抗疲勞、抗衰老、增強(qiáng)免疫作用，中醫(yī)用其補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、續(xù)折傷。鹽炙后可引藥入腎，增強(qiáng)補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨作用。故以抗疲勞作用做為藥理指標(biāo)，選擇有促成骨細(xì)胞增強(qiáng)作用的60%乙醇提取物，通過測(cè)定老齡小鼠給藥前后體質(zhì)量的變化和血清中的乳酸、尿素氮及肝糖原的含量，觀察杜仲丸的抗疲勞作用的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試劑：乳酸、尿素氮、肝糖原試劑盒購(gòu)自南京建成生物制成生物制品有限公司，乳酸批號(hào)20070423、20070520，尿素氮批號(hào)20070423，肝糖元批號(hào)20070423、20090520，其他試劑為分析純。

1.2 動(dòng)物：昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量23～27 g，由山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，批號(hào)SCXK（魯）20050015。

1.3 儀器：數(shù)顯恒溫水浴鍋，常州國(guó)華電器有限公司；FA10004電子天平，上海恒平科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；LD24-0.8型離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠生產(chǎn)；754紫外分光光度計(jì)，上海市精密儀器公司生產(chǎn)。

1.4 杜仲丸醇提取物：取杜仲飲片剪成3 mm以下碎片，續(xù)斷粉碎，過2號(hào)篩，精密稱取，各22.73 g，粉末等量混合，分置1000 mL燒瓶中，加20倍60%的乙醇浸泡1 h，回流提取2 h，提取液減壓濃縮，60 ℃干燥，得干粉。1 g干粉相當(dāng)于3.94 g生藥。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法：取70只小鼠，隨機(jī)分為7組：分別為對(duì)照組，生杜仲丸低、中、高劑量組。分別按0.023，0.045，0.091 mg/kg劑量，每天灌胃，稱重，連續(xù)14 d，對(duì)照組以等體積蒸餾水灌胃。末次灌胃30 min后，各組小鼠分別在溫度（30±1）℃深40 cm池中游泳120 min后[10-11]，取出小鼠，休息60 min，摘眼球取血，依照乳酸試劑盒及尿素氮試劑盒測(cè)定血清乳酸[12-13]及血清尿素氮含量[14-16]。摘眼球后立即處死老鼠，解剖取其肝臟，依照肝糖原試劑盒測(cè)定肝糖原含量。

2 結(jié)果

2.1 供試品對(duì)小鼠14日內(nèi)體質(zhì)量增加的影響：灌胃小鼠14 d內(nèi)，生杜仲丸低、中、高劑量組和空白組小鼠體質(zhì)量都增加，且生杜仲丸低、中、高劑量組均比空白組小鼠增長(zhǎng)速度快，提示杜仲、續(xù)斷配對(duì)，可增加對(duì)小鼠體質(zhì)量增加的影響，雄性小鼠普遍比雌性小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)快。見表1。

表1 杜仲丸醇提物對(duì)小鼠每日體質(zhì)量增量的影響（）

表1 杜仲丸醇提物對(duì)小鼠每日體質(zhì)量增量的影響（）

2.2 供試品對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響：低、中、高劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮、血清乳酸均低于空白組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，低劑量組與空白對(duì)照組及中劑量與高劑量組，組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）。低、中、高劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖原均高于空白組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，空白組與低劑量組、低劑量組與中劑量組及中劑量與高劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）。見表2。

表2 杜仲丸醇提物對(duì)小鼠體內(nèi)血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響（）

表2 杜仲丸醇提物對(duì)小鼠體內(nèi)血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響（）

3 討 論

現(xiàn)在由于工作，學(xué)習(xí)壓力日益加重，生活環(huán)境日益惡化，近年來(lái)，由于疲勞誘發(fā)突發(fā)性疾病，導(dǎo)致疾病病情加重，甚至導(dǎo)致死亡。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003 年版）“緩解體力疲勞功能檢驗(yàn)方法”項(xiàng)下結(jié)果判定的標(biāo)準(zhǔn)：負(fù)重結(jié)果陽(yáng)性，且血乳酸、血清尿素、肝糖原三項(xiàng)指標(biāo)中任兩項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性，即可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。糖元是機(jī)體運(yùn)動(dòng)時(shí)能量的重要來(lái)源，有研究表明[17-18]中等強(qiáng)度和長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)動(dòng)會(huì)使骨骼肌糖原和血糖水平減少，使大腦皮層和骨骼肌工作能力下降，是造成運(yùn)動(dòng)疲勞的直接原因。它的多少直接影響運(yùn)動(dòng)能力，提高糖元儲(chǔ)備或減少運(yùn)動(dòng)時(shí)糖元的消耗對(duì)提高速度增強(qiáng)耐力有重要意義[19-20]。糖元在體內(nèi)有肝糖原和肌糖原兩種儲(chǔ)備形式，是糖代謝的重要能源物質(zhì)。可長(zhǎng)時(shí)間維持運(yùn)動(dòng)時(shí)的血糖水平，延緩疲勞在運(yùn)動(dòng)著的肌肉中，當(dāng)能量平衡遭到破壞時(shí)，蛋白質(zhì)和含氮化合物的分解代謝加強(qiáng)并伴隨著尿素的形成增加。機(jī)體運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)性越低，這種分解代謝作用越強(qiáng)，形成的尿素也就越多[21]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知杜仲丸能有效降低血清尿素氮、血清乳酸的含量，增加肝糖原的含量，而且鹽炙后有利于降低血清尿素氮、血清乳酸的含量，增加肝糖原的含量，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)能力。證明杜仲丸有抗疲勞作用，鹽炙后有增強(qiáng)作用的趨勢(shì)。

《本草綱目》上記載杜仲“肝主筋，腎主骨，腎充則骨強(qiáng)，肝充則筋健，屆伸利用，皆屬于筋”。《別錄》上記載續(xù)斷“主崩中漏血，金瘡血內(nèi)漏，止痛，生肌肉，踠傷，惡血，腰痛，關(guān)節(jié)緩急”。在現(xiàn)代藥理研究，杜仲與續(xù)斷有增強(qiáng)免疫作用，通過對(duì)杜仲丸鹽炙前后杜仲丸的抗疲勞的研究，為“咸入腎，腎入骨理論相關(guān)性研究”提供了部分科學(xué)依據(jù)。此外，隨著人們對(duì)日常保健越來(lái)越重視。具有抗疲勞作用的中藥飲片有助于提高人體免疫作用，將隨著制劑科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)藥食同源產(chǎn)品的開發(fā)會(huì)越來(lái)越多[22-23]，此研究也為杜仲、續(xù)斷后續(xù)的抗疲勞作用產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)。