板藍根多糖促進NKG2D配體表達增強NK細胞對食管癌細胞的殺傷作用及機制研究

梁宗英 侯繼申 孫光蕊 趙寶山 辛國華 (承德醫學院附屬醫院胸外科，承德 067000)

食管癌是常見的消化系統異質性惡性腫瘤，確診時多為晚期[1]。我國食管癌的發病和死亡例數均約占世界的50%[2]。手術和放化療是食管癌的主要治療方式，晚期患者主要采用放療等方式治療[3]，中藥聯合治療對提高患者生存質量具有較好的效果[4]。研究中藥抑制和控制癌癥的機制對食管癌的靶向治療具有重要指導意義。

自然殺傷細胞(natural killer cell，NK cell)是機體重要的免疫細胞，與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關，在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生。研究表明，板藍根多糖(radix isatidis polysaccharides,RIP)能夠刺激淋巴細胞轉化，增強NK細胞的殺傷活性，對荷瘤小鼠具有抗腫瘤作用[5]。NKG2D(natural-killer group 2,member D) 特異的配體分子主要包括 MICA/B 和 ULBPs 兩類，是 NKG2D 發揮殺傷活性的主要配體。NKG2D通過與腫瘤細胞表面相應配體MHCⅠ類相關蛋白A/B(MICA/B)或UL16結合蛋白(ULBP)的結合激活NK細胞[6,7]。上調腫瘤細胞表面NKG2D配體表達可增強NK細胞對其殺傷敏感性[8]。苦參堿可增強NK細胞對白血病K562細胞的體外殺傷活性，其機制可能與NK細胞受體及配體表達調節作用有關[9]。但RIP是否可以通過調控食管癌細胞表面NKG2D配體的表達增強NK細胞對食管癌細胞的殺傷作用目前還尚未可知。本研究以食管癌細胞株Eca-109和NK細胞系NK-92為研究對象，以RIP處理Eca-109和NK-92的方法來檢測RIP在NK-92殺傷食管癌細胞Eca-109過程中的作用，并探尋其潛在作用機制。

1 材料與方法

1.1材料 食管癌細胞株Eca-109和NK細胞系NK-92(ATCC)；RPMI1640培養基、MEM-EBSS培養基和胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、胰蛋白酶Trypsin(Gibco公司)；……