TIPE3抑制CDDP誘導(dǎo)宮頸癌SiHa細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究①

姜召玲 王 洋 楊明浩 姜 杰 (煙臺(tái)通華醫(yī)院檢驗(yàn)科，煙臺(tái) 264099)

TIPE(tumor necrosis factor alpha-induced protein 8,TNFAIP8)基因家族共有4個(gè)成員:TIPE、TIPE1、TIPE2與TIPE3，各成員間具有較高的同源性，在腫瘤及炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用[1]。已有研究表明TIPE3作為癌基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到促進(jìn)腫瘤增殖及轉(zhuǎn)移的作用[2]。但到目前為止，TIPE3在宮頸癌中的生物學(xué)功能及其在宮頸癌治療中的作用尚不清楚。

宮頸癌在女性癌癥發(fā)病率中高居第四位，是女性癌癥主要死亡原因之一，也是最常見的女性生殖道惡性腫瘤[3]，鑒于我國(guó)宮頸癌高發(fā)病率及高死亡率的特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)新型治療靶點(diǎn)刻不容緩。目前宮頸癌的治療以手術(shù)、放療及新型輔助化療為主，順鉑(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)作為臨床治療常用化療藥物在宮頸癌的化學(xué)治療中發(fā)揮關(guān)鍵作用，但其耐藥性逐年增多[4]，找到導(dǎo)致其耐藥的靶向基因?qū)閷m頸癌的化學(xué)治療提供有力手段。本研究旨在發(fā)現(xiàn)TIPE3抑制宮頸癌化療敏感性及其可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細(xì)胞株和慢病毒載體 人宮頸癌細(xì)胞系SiHa購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)，細(xì)胞培養(yǎng)條件如下：培養(yǎng)基為含10%胎牛血清(FBS)的MEM，在37℃，5%CO2氣體條件恒濕培養(yǎng)。TIPE3慢病毒及干擾載體均購(gòu)自上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司，分裝并保存于-80℃超低溫冰箱備用。

1.1.2儀器與試劑 Aria2流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)BD公司，多功能酶標(biāo)儀購(gòu)自賽默飛有限公司(Vario skan Flash,Thermo,USA)；CCK8檢測(cè)試劑盒(C0037)及Annexin V-PI凋亡檢測(cè)試劑盒(C1052)購(gòu)自上海碧云天科技有限公司；蛋白印跡使用PVDF膜購(gòu)自美國(guó)Millipore有限公司；ECL顯影液購(gòu)自Thermo fisher公司；順鉑(CDDP)購(gòu)自齊魯制藥有限公司;MDR1抗體購(gòu)自Bio-Legend公司(SIG-38730,Bio-Legend,San Diego,CA)；……