羌活細(xì)辛湯煎煮工藝優(yōu)化

周雅亮，羅偉良，吳 利

（廣東省佛山市中醫(yī)院，廣東 佛山 528000）

羌活細(xì)辛湯是我院治療寒邪傷營、惡寒肢厥、齒連腦痛、身如被杖的常用方，組方有細(xì)辛、羌活、桂枝、生姜等。方中細(xì)辛祛風(fēng)散寒、開竅止痛，其揮發(fā)油對(duì)正常及異常的體溫升高均有降低作用，且有鎮(zhèn)痛作用；羌活祛風(fēng)散寒、除濕止痛，其揮發(fā)油能明顯降低體溫，具有顯著的解熱作用，能明顯延長熱刺激痛閾值，鎮(zhèn)痛作用顯著。兩者的主要成分多為揮發(fā)油[1]。本試驗(yàn)中分別以細(xì)辛和羌活揮發(fā)油的含量為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法，考察細(xì)辛和羌活揮發(fā)油在不同煎煮條件下的溶出率，優(yōu)化羌活細(xì)辛湯中細(xì)辛和羌活的煎煮工藝。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

KDM 型調(diào)溫電熱套（山東省郅城永興儀器廠）；YP15001 型電子天平（常州市衡正電子儀器有限公司，精度為0.1 g）；5 mL 型揮發(fā)油測(cè)定儀（上海玻璃儀器廠）。

1.2 試藥

細(xì)辛（批號(hào)為180701）、羌活（批號(hào)為180701）、桂枝（批號(hào)為180901）、生姜（批號(hào)為180901）均購自至信藥業(yè)有限公司，并經(jīng)我院梁曉燕副主任藥師鑒定為正品，均符合2015年版《中國藥典（一部）》項(xiàng)下相關(guān)規(guī)定。

2 方法與結(jié)果

2.1 細(xì)辛揮發(fā)油含量測(cè)定

浸泡羌活細(xì)辛湯的成分（除去羌活）30 min，并煮至水開后再煎煮20 min，按2015年版《中國藥典（一部）》附錄揮發(fā)油的測(cè)定方法乙法測(cè)定L9（34）正交試驗(yàn)項(xiàng)下細(xì)辛揮發(fā)油（密度大于1）[2]。分別吸取各條件下制備的羌活細(xì)辛湯供試品溶液各10 mL，取水約300 mL 與玻璃珠數(shù)粒，置燒瓶中，連接揮發(fā)油測(cè)定器。自測(cè)定器上端加水至充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止，再用移液管加入二甲苯1 mL，然后連接回流冷凝管。將燒瓶內(nèi)容物加熱至沸，并繼續(xù)蒸餾，速度以保持冷凝管的中部呈冷卻狀態(tài)為度。30 min 后，停止加熱，放置15 min 以上，讀取二甲苯的容積。然后依照甲法，取供試品溶液適量，依法測(cè)定，自油層量減去二甲苯量即為揮發(fā)油量，計(jì)算供試品中細(xì)辛揮發(fā)油的含量（%）。

2.2 羌活揮發(fā)油含量測(cè)定

浸泡羌活細(xì)辛湯的成分（除去細(xì)辛）30 min，并煮至水開后再煎煮20 min，按2015年版《中國藥典（一部）》附錄揮發(fā)油的測(cè)定方法甲法測(cè)定L9（34）正交試驗(yàn)項(xiàng)下羌活揮發(fā)油（密度小于1），分別吸取各條件下制備的羌活細(xì)辛湯供試品溶液各10 mL，置燒瓶中，加水300 ～500 mL（或適量）與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后，連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水至充滿揮發(fā)油測(cè)定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止。置電熱套中或其他適宜方法緩緩加熱至沸，并保持微沸5 h，至測(cè)定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測(cè)定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0 線上面5 mm 處為止。放置1 h 以上，再開啟活塞，使油層下降至其上端恰與刻度0 線平齊，讀取揮發(fā)油量，并計(jì)算供試品中羌活揮發(fā)油的含量（%）。

2.3 正交試驗(yàn)與結(jié)果

采用L9（34）正交試驗(yàn)，以細(xì)辛或羌活揮發(fā)油的溶出率為考察指標(biāo)，以浸泡時(shí)間（因素A）、煎煮時(shí)間（因素B）、煎煮溫度（因素C）、煎煮壓力（因素D）的各3 個(gè)水平，按設(shè)計(jì)項(xiàng)下條件煎煮羌活細(xì)辛湯（除去羌活或細(xì)辛），并定容至250 mL，標(biāo)明批次。因素水平設(shè)計(jì)見表1。分別吸取各試驗(yàn)條件下制備的羌活細(xì)辛湯供試品溶液各10 mL，分別測(cè)定并計(jì)算其揮發(fā)油的溶出率。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果，結(jié)果見表2 至表3。可見，細(xì)辛揮發(fā)油顯著影響因素為煎煮時(shí)間和浸泡時(shí)間，其余因素影響不明顯，故羌活細(xì)辛湯中細(xì)辛的最佳煎煮工藝為A2B2C1D2。羌活揮發(fā)油顯著影響因素為浸泡時(shí)間和煎煮時(shí)間，其余因素影響不明顯，羌活的最佳煎煮工藝為A3B2C1D1。可見，羌活細(xì)辛湯的最佳煎煮條件為，在正常大氣壓下，細(xì)辛和羌活分別浸泡25 min 和30 min，然后在100 ℃沸水中加入羌活，煎煮10 min，最后加入細(xì)辛再煎煮10 min。

表1 揮發(fā)油L9（34）正交試驗(yàn)因素水平表

表2 煎煮工藝優(yōu)選正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 煎煮工藝優(yōu)選方差分析結(jié)果

2.4 最佳工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

按最佳煎煮工藝煎煮5 份羌活細(xì)辛湯（去除羌活），并測(cè)定和計(jì)算各湯液細(xì)辛揮發(fā)油的溶出率；按最佳煎煮工藝煎煮5 份羌活細(xì)辛湯（去除細(xì)辛），并測(cè)定和計(jì)算各湯液羌活揮發(fā)油的溶出率，證實(shí)了最佳煎煮工藝為最優(yōu)工藝。詳見表4。

表4 最佳工藝驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果（%，n ＝5）

3 討論

3.1 煎煮條件篩選

藥材的浸泡和煎煮時(shí)間對(duì)羌活細(xì)辛湯的質(zhì)量影響最大[3]。羌活和細(xì)辛均屬根莖類藥物，質(zhì)地相較于一般的芳香性藥物要致密，水分須通過更多時(shí)間才能完成浸透過程[4]，相應(yīng)藥物有效成分的溶出所需時(shí)間也相對(duì)較多。若細(xì)辛和羌活浸泡時(shí)間較少，水分不易進(jìn)入[5]，煎煮時(shí)由于藥材所含蛋白質(zhì)變性、淀粉糊化等[6]，進(jìn)一步影響藥物有效成分的溶出，所得湯劑的質(zhì)量就變差。浸泡時(shí)間過長也不利于湯劑的質(zhì)量提升[7]，單純的增加浸泡時(shí)間不但對(duì)湯劑的質(zhì)量影響甚微，且由于湯劑中的其他成分也會(huì)因?yàn)榭諝庋趸⒓?xì)菌侵?jǐn)_等造成湯劑變質(zhì)。盲目地增加浸泡時(shí)間只會(huì)在水分完成浸泡過程后增加雜質(zhì)的溶出。

煎煮時(shí)間對(duì)于芳香性藥物的煎煮影響較大[8]，芳香性藥物的有效成分大多為揮發(fā)油，適宜的煎煮時(shí)間能將藥材中的揮發(fā)油煎煮出來[9]。過短的煎煮時(shí)間雖能提取出揮發(fā)油，減少揮發(fā)油的揮發(fā)，但會(huì)殘留大量揮發(fā)油等有效成分在藥材中造成藥物浪費(fèi)[10]。過長的煎煮時(shí)間則會(huì)導(dǎo)致?lián)]發(fā)油受熱時(shí)間過長，或分解掉造成浪費(fèi)，有的會(huì)直接揮發(fā)在空氣中，減少湯劑中的含量，同樣導(dǎo)致湯劑質(zhì)量下降。

本試驗(yàn)中選取浸泡時(shí)間、煎煮時(shí)間、煎煮溫度、煎煮壓力為主要考察因素就是因?yàn)榭紤]到細(xì)辛和羌活的質(zhì)地要比薄荷、荊芥穗等花葉類藥物要致密，水分不易滲透，會(huì)對(duì)揮發(fā)油的浸出起到重要影響，故浸泡時(shí)間的選擇比一般花草類藥物要長，以20 ～30 min 為宜；煎煮時(shí)間的長短是決定揮發(fā)油含量的決定性因素，揮發(fā)油具有揮發(fā)性，煎煮時(shí)間過長，無論對(duì)細(xì)辛或羌活揮發(fā)油含量都有致命的降低作用，故煎煮時(shí)間選擇20 ～30 min 為宜。同時(shí)，由于細(xì)辛比較纖細(xì)，相對(duì)于羌活的受熱面積更大，更有利于揮發(fā)油的煎出，故細(xì)辛的煎煮時(shí)間選擇范圍相對(duì)較少，以10 ～20 min 為宜。煎煮溫度影響較低的因素是由于細(xì)辛和羌活是后下藥物，都在100 ℃沸水煎煮，該溫度早已超出揮發(fā)油揮發(fā)的溫度，故對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響相對(duì)較小。考慮到經(jīng)濟(jì)因素，僅選取在正常大氣壓下100 ℃沸水中煎煮藥液。

3.2 用水量、煎煮次數(shù)選擇

煎煮用水量也是影響湯劑質(zhì)量的重要因素，過多的溶液需增加煎煮時(shí)間去濃縮，但湯劑中的揮發(fā)油卻會(huì)在濃縮時(shí)大量揮發(fā)，從而降低湯劑療效。

在羌活細(xì)辛湯的質(zhì)量影響因素上，煎煮次數(shù)也是一個(gè)不容忽視的原因[11]。一般湯劑煎煮2 ～3 次，1 次煎煮大概可煎出有效成分的60%，2 次煎煮可煎出有效成分的30%[12]，3 次煎煮就煎出10%，而試驗(yàn)中所取湯液只是經(jīng)過1 次煎煮，有效成分的煎出不夠充分，后續(xù)研究需注意。

3.3 藥物品種、產(chǎn)地及藥材用量選擇

影響湯劑質(zhì)量的還有藥物的品種[13]，細(xì)辛的品種眾多，有華細(xì)辛、北細(xì)辛、漢城細(xì)辛，品種不同，所含成分也不同，其中以北細(xì)辛為最佳。羌活的種類比細(xì)辛更多，羌活的來源分為羌活和寬葉羌活，入藥分根和根莖，有蠶羌、竹節(jié)羌、條羌、大頭羌等不同品種，其中又以蠶羌為最優(yōu)，條羌和竹節(jié)羌次之，大頭羌最差[14]。產(chǎn)地也是影響湯劑質(zhì)量的重要因素，羌活主產(chǎn)于四川、云南、甘肅、青海等地區(qū)，西南地區(qū)產(chǎn)的為川羌，西北地區(qū)產(chǎn)的為西羌，川羌活和西羌的藥效也有差異。

“細(xì)辛不過錢”的說法也影響羌活細(xì)辛湯的質(zhì)量[15]，在原組方中細(xì)辛的用量為9 g，但由于受到“細(xì)辛不過錢”說法的影響，后來改細(xì)辛用量為3 g。細(xì)辛用量為原組方的1／3，很難發(fā)揮細(xì)辛祛風(fēng)散寒、開竅止痛的作用[16]，更為提高羌活細(xì)辛湯的療效造成了困難，變相地對(duì)羌活細(xì)辛湯質(zhì)量的提升提出了更高的要求。

3.4 不足

本試驗(yàn)中雖對(duì)羌活細(xì)辛湯中羌活和細(xì)辛的煎煮作出了優(yōu)化，但羌活細(xì)辛湯中其他藥物的煎煮則未涉及，后續(xù)研究應(yīng)對(duì)桂枝和生姜等藥物的煎煮作出優(yōu)化，以進(jìn)一步提高羌活細(xì)辛湯的質(zhì)量。