云南省部分縣/市新生兒G6PD缺乏癥篩查結(jié)果及陽(yáng)性臨界值分析

王 瓊，齊志業(yè)，趙小龍，張彩營(yíng)，段 江，梁 琨

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院新生兒遺傳代謝病篩查中心，云南昆明 650032)

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏癥是一種X-連鎖不完全顯性遺傳的紅細(xì)胞酶缺陷病，由于紅細(xì)胞膜的G6PD缺陷，使得維持紅細(xì)胞膜穩(wěn)定性的還原型谷胱甘肽生成減少而不能抵抗氧化損傷，最終導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞并溶血的一種遺傳病，在全球分布廣泛[1-2]。因?yàn)槟承┱T因(如進(jìn)食蠶豆、氧化性藥物、感染等)使紅細(xì)胞大量破壞，臨床表現(xiàn)為急性溶血性貧血和由此導(dǎo)致的高膽紅素血癥，嚴(yán)重者可致膽紅素腦病，造成不可逆的腦損傷和智力發(fā)育落后[3-4]。G6PD缺乏癥在我國(guó)華南、西南地區(qū)也是一種高發(fā)遺傳病[5-9]，而目前針對(duì)G6PD缺乏癥沒有任何有效的治療措施，只能預(yù)防和對(duì)癥處理，所以，開展新生兒G6PD缺乏癥篩查能對(duì)患兒進(jìn)行最有效的早診斷、早干預(yù)，避免不良后果的發(fā)生[10]。現(xiàn)將昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院新生兒遺傳代謝病篩查中心2013-2018年的G6PD缺乏癥篩查結(jié)果進(jìn)行總結(jié)分析，并對(duì)目前實(shí)驗(yàn)室篩查陽(yáng)性臨界值進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1一般資料 研究對(duì)象為2013年1月至2018年12月在云南省大理州、楚雄州、保山市、騰沖市、德宏州、臨滄州部分縣/市及昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院出生的新生兒，經(jīng)過監(jiān)護(hù)人知情同意選擇做G6PD缺乏癥篩查檢測(cè)，共計(jì)155 880例，其中男性81 390例，女性74 490例。

1.2標(biāo)本采集 新生兒出生3 d后，最遲20 d內(nèi)，按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序采集足跟血，制成濾紙干血片，4 ℃密封保存，并在5個(gè)工作日內(nèi)冷鏈遞送至昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院新生兒遺傳代謝病篩查中心進(jìn)行檢測(cè)。

1.3實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 標(biāo)本到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后5個(gè)工作日內(nèi)完成檢測(cè)，采用熒光分析法進(jìn)行G6PD酶活性檢測(cè)，按照試劑說明書進(jìn)行操作，試劑為芬蘭Wallic公司的PE新生兒G6PD檢測(cè)試劑盒，實(shí)驗(yàn)儀器為VICTOR2-1420型時(shí)間分辨熒光免疫分析儀、DELFIA自動(dòng)振動(dòng)器。按照說明書推薦暫定陽(yáng)性臨界值為2.20 U/gHb。

1.4疾病的確診 G6PD酶活性初篩值≤2.20 U/gHb視為篩查陽(yáng)性，召回抽取靜脈血，用G6PD/6PGD定量比值法進(jìn)行確診，試劑為廣州米基醫(yī)療器械有限公司改良硝基四氮唑藍(lán)G6PD/6PGD定量比值法試劑盒，實(shí)驗(yàn)儀器為奧林巴斯AU2700全自動(dòng)生化分析儀，參考范圍為1.0～2.3，<1.0者判斷為G6PD缺乏癥。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 篩查數(shù)據(jù)采用SPSS23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。篩查陽(yáng)性臨界值采用受試者工作特征曲線(ROC曲線)進(jìn)行確認(rèn)。

2 結(jié) 果

2.1篩查數(shù)據(jù)分析 2013-2018年，本篩查中心共篩查155 880例標(biāo)本，其中男性81 390例，女性74 490例，篩查率為16.74%，篩查率較低，各年度篩查情況見表1。確診患兒1 187例，其中男性1 063例，女性124例，發(fā)病率分別為1.31%和0.16%，男性、女性發(fā)病率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=349.71，P<0.001)，見表2。男性的初篩陽(yáng)性率(2.19%)、篩查陽(yáng)性率(1.67%)都明細(xì)高于女性(0.95%、0.18%)；2013、2014年陽(yáng)性預(yù)測(cè)值未達(dá)到80.00%，說明當(dāng)時(shí)存在很多假陽(yáng)性，提高標(biāo)本質(zhì)量后陽(yáng)性預(yù)測(cè)值呈逐年升高趨勢(shì)，最高的是2017年，達(dá)到了97.68%，所以總體陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為85.02%；2015-2018年初篩陽(yáng)性召回率均大于90.00%，總體初篩陽(yáng)性召回率為89.68%。155 880例標(biāo)本的G6PD水平測(cè)定結(jié)果制成頻數(shù)表，結(jié)果呈正態(tài)分布，見表3。對(duì)155 880例標(biāo)本G6PD水平測(cè)定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，男性和女性的1.0%百分位數(shù)值分別為1.20 U/gHb，2.10 U/gHb，各項(xiàng)指標(biāo)見表4。

2.2G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性臨界值的確立 對(duì)所有男性和女性G6PD檢測(cè)水平分別進(jìn)行ROC曲線的繪制，以ROC曲線下面積(AUC)所對(duì)應(yīng)的G6PD水平為臨界值，見圖1。男性和女性AUC 分別為0.963和0.989，其所對(duì)應(yīng)的男性和女性G6PD水平的臨界值分別為2.25、2.45 U/gHb。如果采用新確定的臨界值，將新增加男性篩查陽(yáng)性12例，女性篩查陽(yáng)性206例。

表1 云南省部分縣/市新生兒G6PD缺乏癥篩查情況表

表2 云南省部分縣/市新生兒G6PD缺乏癥篩查陽(yáng)性召回、確診情況

表3 男性和女性G6PD水平分布

表4 男性與女性G6PD水平統(tǒng)計(jì)指標(biāo)(U/gHb)

注：A表示男性；B表示女性。

圖1 男性、女性G6PD缺乏癥篩查ROC曲線

3 討 論

G6PD缺乏癥患者主要分布于東南亞、非洲、中東和地中海沿岸，全世界約4億人口受累，男性多于女性[11]，在我國(guó)的發(fā)病率呈南高北低的趨勢(shì)，只可預(yù)防并對(duì)癥處理，不能根治，這是目前對(duì)該疾病的認(rèn)識(shí)[10]，因此，將G6PD缺乏癥列入新生兒疾病篩查，預(yù)防G6PD缺乏癥導(dǎo)致的新生兒高膽紅素腦病及嚴(yán)重溶血性貧血等并發(fā)癥，尤其是在高發(fā)地區(qū)顯得尤為重要。

2013-2018年，本篩查中心共篩查155 880例標(biāo)本，篩查率較低，只有16.74%，原因是本篩查中心轄區(qū)范圍內(nèi)的大多數(shù)單位缺乏足夠的基層工作人力對(duì)大眾進(jìn)行健康教育宣傳，老百姓對(duì)此疾病的認(rèn)識(shí)不到位，同時(shí)地處云南的偏遠(yuǎn)地區(qū)，初篩陽(yáng)性患兒召回確診困難，雖然通過努力初篩陽(yáng)性召回率能達(dá)到89.68%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值也在逐年提高，但大家工作積極性不高。云南本屬G6PD缺乏癥的高發(fā)區(qū)，姚莉琴等[6]研究報(bào)道，其發(fā)病率高達(dá)9.7%，樣本僅來源于云南省的西雙版納州、玉溪新平縣、德宏州，地域相對(duì)集中。本研究G6PD缺乏癥總發(fā)病率為0.76%(1 187/155 880)，男性、女性發(fā)病率分別為1.31%、0.16%，樣本來源于云南省的大理州、楚雄州、保山市、騰沖市、德宏州、臨滄州、昆明市7個(gè)州/市的部分縣/市標(biāo)本，與文獻(xiàn)報(bào)道不同，考慮是由于地域上的差別導(dǎo)致發(fā)病率不同；同時(shí)，篩查率低，意味著還有很多患兒未檢出。希望在后續(xù)的工作中能改進(jìn)工作的方式方法，加大宣傳力度，進(jìn)一步提高篩查率，檢出更多的患兒，再行計(jì)算是否會(huì)有發(fā)病率的變化。另外男性、女性發(fā)病率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=349.71，P<0.001)，充分證實(shí)G6PD缺乏癥這種X-連鎖遺傳病的特點(diǎn)，男性多于女性。

篩查不等于確診，篩查實(shí)驗(yàn)室要根據(jù)自身情況確定適合實(shí)驗(yàn)室的陽(yáng)性臨界值，盡量避免假陽(yáng)性和漏篩情況的發(fā)生。如果單純用1.0%百分位數(shù)值來確定陽(yáng)性臨界值，男性1.20 U/gHb，女性2.10 U/gHb，會(huì)漏診10例患兒(男性6例，女性4例)，而ROC曲線能把檢測(cè)值的靈敏度和特異度平衡在一個(gè)最佳點(diǎn)，即陽(yáng)性臨界值[12-13]。通過對(duì)6年的篩查數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，利用ROC曲線得出本篩查中心實(shí)驗(yàn)室的G6PD缺乏癥男性、女性篩查陽(yáng)性臨界值分別為2.25 U/gHb和2.45 U/gHb，之前一直采用的陽(yáng)性臨界值是試劑說明書推薦的2.20 U/gHb，在以后的工作中將分別采用最新統(tǒng)計(jì)的男性、女性陽(yáng)性臨界值進(jìn)行判斷。由于篩查率較低，希望通過努力提高篩查率，能有更多的陽(yáng)性數(shù)據(jù)參與統(tǒng)計(jì)，以期得到更加切合實(shí)際的數(shù)值。

4 結(jié) 論

該中心的G6PD缺乏癥篩查率較低，后續(xù)要加強(qiáng)宣傳進(jìn)一步提高篩查率。確定適宜的篩查陽(yáng)性臨界值能夠最大限度地避免假陽(yáng)性結(jié)果和漏篩情況的發(fā)生。