血清可溶性CXCL16在子癇前期患者中的表達變化及其臨床意義

陳 瑞

河南大學附屬鄭州頤和醫院檢驗科，鄭州 450047

子癇前期是一類妊娠性高血壓疾病，其在所有妊娠婦女中發病率約為5%～10%，是母體和胎兒死亡的主要原因之一［1］。子癇前期臨床定義為新發高血壓（收縮壓高于140 mmHg或者舒張壓高于90 mmHg）和新發蛋白尿。研究表明子癇前期的發生始于妊娠中期，早于臨床癥狀出現前［2-3］。早期診斷并預測子癇前期的嚴重程度可通過嚴格的監測和及時有效的干預可減輕或避免母親和胎兒嚴重的并發癥。因此弄清子癇前期的發病機制并發覺有效的生物標志物預測子癇前期的發生對于優生優育尤為關鍵。近期研究證實母胎免疫以及母體免疫平衡紊亂在子癇前期中扮演重要角色，趨化因子是一類參與炎癥反應的細胞因子，可調控炎癥白細胞募集過程［4］。CXCL16是趨化因子超家族新成員，其在炎癥性疾病中顯著上調，且有助于內皮細胞功能紊亂和肝臟損傷［5］。而內皮細胞功能紊亂和過度炎癥在子癇前期病因學中扮演重要作用，因此推測CXCL16 可能參與了其發生發展過程。據此本研究將探究血清可溶性CXCL16在子癇前期患者中的變化及其與疾病嚴重程度的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2017年3月—2019年3月于河南大學附屬鄭州頤和醫院婦產科就診且明確診斷為子癇前期的妊娠孕婦58例作為研究組，同期健康體檢妊娠孕婦30例為對照組。并依據疾病嚴重程度將研究組分為輕度子癇前期組（30例）和重度子癇前期組（28例）。排除合并慢性疾病史、肥胖史、吸煙史、合并感染以及自身免疫性疾病的孕婦。子癇前期診斷及分級依據第七版《婦產科學》中的標準［6］：（1）輕度子癇前期：妊娠20周后出現4 h內連續測定兩次BP≥140/90 mmHg；尿蛋白≥300 mg/24 h或隨機尿蛋白(+)；可存在上腹不適以及頭痛等臨床癥狀。（2）重度子癇前期：BP≥160/110 mmHg；尿蛋白≥2.0 g/24 h或隨機尿蛋白≥(++)；血清肌酐＞106μmol/L，血小板＜100×109/L；LDH升高；ALT或AST升高；持續性頭痛或其它腦神經或視覺障礙，持續性上腹不適。

1.2 標本采集及處理

采集所有子癇前期患者治療前、體檢孕婦體檢當日清晨空腹靜脈血6 ml于干燥管中，室溫放置20 min后，于中低速離心機中3 500 rpm 離心15 min 后，分離血清于凍存EP 管中，放入-80℃冰箱中保存，用于血清CXCL16 濃度的測定。 人CXCL16 測定 ELISA 試劑盒購自美國Cloud-Clone Corp 公司，所有測定步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。同時記錄研究對象血液生化和血液常規指標。

1.3 統計學方法

數據采用SPSS 20.0 軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（)表示，組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析；計數資料用例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，Spearman 分析指標間的相關性，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組和對照組一般資料比較

子癇前期患者和健康對照組間年齡、BMI和孕周等一般資料比較差異無統計學意義，但子癇前期患者收縮壓和舒張壓均高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 研究組和對照組一般資料情況

2.2 研究組和對照組CXCL16及血液學指標比較

與對照組相比，子癇前期患者白細胞計數(WBC)并未出現顯著變化，而PLT則顯著下降。此外，血清肝臟損傷相關酶類ALT和AST則均顯著升高，血清腎臟損傷標志物肌酐亦顯著增加。CXCL16 濃度在子癇前期患者中顯著高于健康孕婦，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

2.3 輕度子癇前期組和重度子癇前期組患者CXCL16水平間的差異

分析發現輕度子癇前期患者血清CXCL16 濃度(1.53±1.25) pg/ml 顯著低于重度子癇前期患者(2.67±1.46) pg/ml，但高于健康對照組(0.53±0.35) pg/ml，（P＜0.05）。此外，重度子癇前期患者亦顯著高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見圖1。

表2 研究組和對照組血清CXCL16和血液學指標的比較

圖1 輕度子癇前期組、重度子癇前期組和健康對照組間血清CXCL16濃度比較

2.4 子癇前期患者血清CXCL16水平與臨床指標間的關系

Spearman 相關性結果表明，子癇前期患者血清CXCL16濃度與ALT、AST和血肌酐均呈顯著正相關性，而與收縮壓、舒張壓和PLT間并無顯著相關性，見表3。

表3 子癇前期患者血清CXCL16水平與臨床指標間的相關性

2.5 CXCL16的受試者診斷曲線

受試者診斷曲線分析發現CXCL16 區分子癇前期患者和正常孕婦時曲線下面積高達0.895 1（95% CI 為0.831 8 to 0.958 5），最佳界值為0.85 pg/ml，其靈敏度為77.59%，特異度為86.67%，見圖2。

圖2 CXCL16的受試者診斷曲線

3 討論

本研究通過檢測子癇前期患者和健康孕婦血清CXCL16 濃度，分析發現CXCL16 在子癇前期孕婦中異常上調，此外血清CXCL16 的濃度還與疾病嚴重程度密切相關，即重度子癇前期患者顯著高于輕度子癇前期患者，且在輕度子癇前期患者中相較對照組已經出現了異常高水平變化。CXCL16 具有多重生物學功能，主要以膜結合或可溶性的方式分泌表達，表達CXCL16 的細胞主要有巨噬細胞、T 細胞、B 細胞、樹狀細胞、上皮細胞、纖維細胞、血小板、血管平滑肌細胞以及內皮細胞等多種細胞［7］。研究發現CXCL16 可參與調控炎癥反應、組織損傷和纖維化過程，異常上調的CXCL16 可通過刺激IFN-α和TNF-α等細胞因子參與炎癥反應［8］。而與健康孕婦Th2細胞免疫占主導地位不同的是，子癇前期孕婦則是Th1細胞免疫占據優勢，因此該類人群常對胎兒表現出過度的系統性炎癥反應［9］。有研究表明子癇前期孕婦細胞滋養層微粒體中多形核白細胞可分泌大量促炎細胞因子，并出現在母體外周血循環中，與胎盤凋亡和壞死密切相關，而內皮細胞功能紊亂正是以這種方式被誘導發生的。

既往研究已經報道了在包括炎癥性腸病和動脈粥樣硬化等多種炎癥性疾病患者中CXCL16 循環水平顯著高于健康對照組［10］。因此本研究中發現的子癇前期患者中異常高水平CXCL16 可能與在其病因學機理中扮演重要作用的系統性炎癥存在關聯。子癇前期患者存在廣泛的血管痙攣現象，而這與血流灌注不足相關。既往已證實CXCL16/ROCK1信號通路可加速腎臟組織中缺血性損傷，基于此表明CXCL16 可能有助于子癇前期中組織低氧損傷加?。?1］。此外，Marques 等［5］還發現上調的CXCL16 會造成內皮損傷，而本研究中發現的異常高水平CXCL16 可能亦會對子癇前期病因學中重要機理之一的內皮細胞功能障礙發揮促進作用。進一步分析發現CXCL16 與ALT 和AST 存在顯著正相關關系，先前研究證實CXCL16 在肝臟內皮細胞中表達且在肝炎細胞損傷中發揮一定的作用［12］，提示其可能在子癇前期患者肝臟損傷中也發揮一定的效應。在動物實驗中發現激活的CXCL16通路可增加腎小管間質損傷，而CXCL16與血肌酐間的正相關性提示其可能參與了子癇前期腎損傷過程［13］。Lekva等［14］也發現血清CXCL16在子癇前期孕婦中異常上調，但該研究并未分析不同嚴重程度子癇前期孕婦間的差異。另ROC曲線發現了0.85pg/ml的最佳診斷界值，敏感性和特異度均較高。在20% 左右的HELLP 綜合征或子癇患者中并未出現蛋白尿或高血壓，在這些病例中血清CXCL16則有希望作為子癇前期診斷的生物標志物。

綜上所述，本研究初步發現子癇前期患者存在異常高表達的CXCL16，并與疾病嚴重程度以及肝臟或腎臟損傷存在關聯，且診斷性能較好，或有希望成為潛在生物標志物。