地龍降壓膠囊對自發性高血壓大鼠凝血相關的血小板miRNAs的影響

王碧瑩 李應東 劉永琦,2 張小平,2* 岳曉華 李長天 謝曉蓉 孫少伯

1.甘肅中醫藥大學，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅中醫藥大學敦煌醫學與轉化省部共建教育部重點實驗室，甘肅 蘭州 730000

地龍是傳統中藥，具有通經活絡的功效，常用于治療經脈不暢等病癥。現代研究發現地龍具有抗凝血、改善血液循環等作用[1]。臨床運用地龍降壓膠囊治療高血壓有一定的療效，但其降壓機制尚不明確。研究表明老年性高血壓和妊娠性高血壓與血小板活化有一定的聯系，此類高血壓患者普遍處于高凝狀態，血壓升高時易引起血管內皮損傷，促使內皮細胞釋放活性物質，引起血小板聚集，導致血小板血栓形成[2]。研究通過地龍降壓膠囊對幾種凝血相關的血小板miRNAs的影響，探討其降壓機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 自發性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，8周齡，SPF級，雄性，實驗期間給予標準飼料，自由飲食飲水。

1.1.2 儀器 QuantStudio 6實時熒光定量PCR儀(ABI)；Nano-100微量分光光度計(杭州奧盛儀器有限公司)；熒光定量PCR管(EXTRAGENE)；EDC-810 PCR儀(東勝創新生物科技有限公司)；JY300水平電泳儀(北京君意東方電泳設備有限公司)；JY02S紫外分析儀(北京君意東方電泳設備有限公司)。

1.1.3 藥物與試劑 地龍降壓膠囊(批號：151026，甘肅中醫藥大學附屬醫院院內制劑)；Trizol(批號：15596-026，Ambion)；HiScript Reverse Transcriptase(批號：R101-01/02，VAZYME)；5×HiScript Buffer(批號：R101-01/02，VAZYME)；ddH2O(批號：C1D230A，genecopoeia)；Ribonuclease Inhibitor(批號：LOT#J11202，Tr-ansGen)；dNTP Mixture(批號：LOT#M1123，TIANGEN)；50×ROX Reference Dye 2(批號：Cat.#D01011A，VAZYME)；SYBR Green Master Mix(批號：Cat.#D01010A，VAZYME)。

1.2 方法

1.2.1 分組及給藥 參考文獻[3]將SHR大鼠適應性喂養1周后測血壓，按照收縮壓值隨機分為5組，每組8只：①正常對照組：等體積蒸餾水灌胃；②肝素陽性對照組：肝素500 IU/kg尾靜脈注射，每日1次；……