基于Wnt、Notch信號通路分析烙灸對脊髓損傷大鼠的神經修復作用

岳倩文 夏 鉑

寧夏醫科大學中醫學院，寧夏 銀川 750004

脊髓損傷(Spinal cord injury ,SCI)是一種損害患者的脊髓結構及功能，引起運動、感覺以及自主神經功能障礙或喪失的疾病。不論是采取手術治療，還是國際通用甲基強的松龍進行沖擊治療，都存在鈉潴留，水腫及尿路感染的風險[1]。烙灸利用溫熱刺激促進受損傷局部氣血運行，加速體液循環，針對急性病往往有意想不到的作用。烙灸是將烙鐵模具中加艾絨或者其他藥物作用于損傷部位，利用烙鐵作為持續溫熱刺激傳導于皮膚上，改良了督灸繼發感染率高的缺點，又給予穴位以持續溫熱的刺激，從而達到通經活絡、消瘀散結之目的。臨床上在血管性癡呆、弱少精子癥、骨與關節等多種疾病中發揮著良好療效。本研究主要采用Allen’s打擊模型造成大鼠急性脊髓損傷，較好的模擬了因外力沖擊等外傷所造成的脊髓受損狀態。通過Wnt、Notch信號通路，通過對脊髓損傷大鼠的Western Blot檢測，分析烙灸療法對脊髓損傷后大鼠的神經修復機制及是否可以促進神經干細胞增殖分化。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 選取清潔級SD大鼠60只(寧夏醫科大學實驗動物中心提供，6～8周齡，體質量220～240 g，雄性)。溫度(25±l)℃，濕度(50±10)%，光暗周期12 h/12 h，自由進食和飲水,常規環境適應性飼養 14d后進行實驗。

1.2 主要試劑及儀器 甲基強的松龍，SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液，RIPA裂解液，縫合線、咬骨鉗、一次性注射器、手術剪、組織剪等。Tanon-4200全自動化學發光圖像分析系統、低溫高速離心機(TGL—16G—A 型，上海安亭科學儀器廠)、超低溫冰箱(MDF—38E2 型，日本三洋公司)、電子恒溫水浴鍋(DZKW-4 型，北京中興偉業儀器有限公司)、凝膠成像系統(美國 Bio-rad 公司)。……