貴州中醫藥大學,貴州 貴陽 550025
類風濕關節炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一種以關節滑膜炎及自身抗體分泌為特點的慢性自身免疫性疾病[1],其病因及發病機制比較復雜。研究認為,炎癥、滑膜增生及骨破壞為RA主要的病理特征,治療時可從抑制炎癥反應、抑制滑膜細胞增殖、抑制軟骨損傷和骨侵蝕幾方面入手[2-3]。滑膜成纖維細胞(Fibroblast-Likessynoviocytes,FLS)在RA發病中起關鍵作用,在病理狀態下FLS表現為異常增殖及凋亡不足,能分泌高水平促炎細胞因子,如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-17,還能分泌化學趨化因子、基質蛋白降解酶等[4]。
苦皮藤CelastrusangulatusMaxim.為衛矛科南蛇藤屬苦皮藤的干燥根,具有祛風除濕、活血通經、解毒殺蟲的功效,可治療風濕痹痛、骨折傷痛、瘡瘍潰爛等病[5-6]。苦皮藤中化學成分豐富,含有倍半萜類、三萜類、二萜類、黃酮類、生物堿類、揮發油等成分[7]。苦皮藤具有殺蟲、殺菌、抗癌等活性,其中殺蟲活性研究較為深入,已有成熟的殺蟲制劑[8]。但關于苦皮藤抗風濕作用的研究在國內外尚無具體報道。根據文獻記載[9],苦皮藤配伍藤蘿根、白金條泡酒服用可治療風濕、勞傷、關節疼痛。由此,為驗證苦皮藤的抗風濕作用,尋找其有效成分及其作用機制,可對苦皮藤進行深入研究。實驗以TNF-α誘導的人類風濕性關節炎成纖維滑膜細胞模型,研究苦皮藤不同提取部位的抗風濕作用,為篩選苦皮藤抗風濕有效部位及研究其作用機制提供科學依據。
1.1 細胞株HFLS-RA類風濕關節炎成纖維樣滑膜細胞(貨號:JNO-02001),購自廣州吉妮歐生物科技有限公司。
1.2 藥物制備 稱取8 mg藥物,充分溶于1mL DMSO中,制成8 mg/mL的母液,用0.22 μm的微孔濾膜過濾,4℃條件下保存。……