738例新型冠狀病毒肺炎病例密切接觸者核酸篩查結果分析

王 晟，劉興態，秦 軍，李樹璽

(三峽大學第三臨床醫學院·國藥葛洲壩中心醫院檢驗科，湖北 宜昌 443002)

新型冠狀病毒肺炎(簡稱新冠肺炎)是2019年12月在武漢首先發現的一種新傳染病[1]，經實驗室基因檢測和病毒分離確定為新型冠狀病毒[2](severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)[3]感染所致。主要經呼吸道飛沫傳播和接觸傳播，人群普遍易感[4]，全球已有100多個國家和地區發現確診病例。目前認為，新冠肺炎傳染源主要是新冠肺炎患者，且隱性感染者(即無癥狀感染者)也可能成為傳染源[5]。為了解新冠肺炎病例密切接觸者感染情況，同時避免疫情進一步擴散，特對本地區738例醫學觀察人員進行了血常規和鼻咽拭子的新型冠狀病毒核酸檢測(簡稱核酸檢測)，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源 選取2020年2月11—23日某定點隔離酒店內738例新冠肺炎病例密切接觸且無明顯臨床癥狀的醫學觀察人員，以新冠肺炎病例家庭成員為主，其中男性376例，女性362例。年齡為7個月～91歲。

1.2 儀器與試劑 核酸檢測使用中山大學達安基因的Smart32型核酸提取儀和配套的擴增試劑，以及杭州安杰思醫學科技股份有限公司的AFD4800型實時熒光定量分析儀；血常規檢測使用希森美康XN-1000型全自動血液分析儀及原廠試劑、校準品和質控品。

1.3 方法

1.3.1 采樣方法 醫學觀察人員均為單間隔離，于酒店獨立房間內采集觀察人員血常規及鼻咽拭子標本。鼻咽拭子采樣時，采樣人員一手輕扶被采集人員的頭部，一手執拭子，拭子貼鼻孔進入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過猛，以免發生外傷出血。待拭子頂端到達鼻咽腔后壁時，輕輕旋轉一周(如遇反射性咳嗽，應停留片刻)，然后緩緩取出拭子，將拭子頭浸入裝有2 mL裂解液(與核酸提取試劑盒中裂解液相同)的標本采集管或含RNA酶抑制劑的細胞保存液中，插入拭子后在靠近頂端處折斷無菌拭子桿，旋緊管蓋并用封口膜封閉[6-7]。

1.3.2 檢測方法 鼻咽拭子標本進行核酸檢測，嚴格依照儀器、試劑說明書要求進行；血常規使用自動進樣模式進行檢測。

1.3.3 核酸檢測結果判讀 (1)當ORF1ab和N基因同時呈陽性時，或者若僅ORF1ab或N基因其中之一的檢測結果呈陽性時，需重新提取原標本的核酸進行復查，復查后ORF1ab或N基因仍顯示為陽性時[8]，則可判定為陽性。(2)當出現以下兩種情況時為“可疑”：①2個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間或其中1個位點判讀為陽性，另1個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間(具體請參考試劑盒說明書)；②2個位點中的1個位點為陰性，另1個位點的Ct值位于陽性Ct值和陰性Ct值之間。對于“可疑”陽性結果，建議重新對標本進行核酸提取，并與該標本前一次提取的核酸同時擴增檢測，結合兩次檢測，2個位點可判斷為“陽性”則可報告“陽性”，否則應報告“可疑”[7]。(3)當兩個位點擴增結果無反應，可報告“陰性”，并對結果進行解釋，此情況可能是病毒載量低于陽性限，應結合臨床分析[7]。

1.3.4 復檢要求 核酸檢測結果可疑者需隔日重新采樣復測。

1.3.5 分析方法 對所有血常規和核酸檢測結果進行統計分析，計算無癥狀感染者比例及血常規結果符合新冠肺炎發病早期特點占比。

2 結果

2.1 核酸檢測結果 738例新冠肺炎病例密切接觸醫學觀察者核酸檢測陽性70例(9.49%)，陰性664例(89.97%)，可疑4例(0.54%)。各年齡段陽性率為7個月～6歲12.50%(2/16)，7～14歲10.34%(3/29)，15～40歲9.00%(19/211)，41～60歲8.09%(25/309)，>61歲12.14%(21/173)。陽性結果來源于23個家庭，家庭內核酸檢測陽性者1～6例，中位數為3例，主要呈家庭聚集性分布。核酸檢測結果見表1。

表1 醫學觀察者首次核酸檢測及可疑者隔日復測結果

Table 1 Results of the initial nucleic acid test of medical observed persons and the retest of suspected persons the next day

結果首次檢測例數比例(%)可疑者隔日檢測例數比例(%)陽性527.05 1864.29可疑283.79414.28陰性65889.16621.43合計738100.00 28100.00

2.2 血常規檢測結果 738例醫學觀察者血常規檢測，白細胞計數減少者(<3.5×109/L)2例，淋巴細胞計數減少者(<1.1×109/L)21例，核酸檢測結果陽性及可疑醫學觀察者血標本白細胞計數均正常，僅2例淋巴細胞計數減少。無癥狀感染者血常規結果符合新冠肺炎發病早期特點者僅占2.70%(2/74，包含4例仍可疑者)。

2.3 發病情況 70例核酸檢測結果陽性者，42.86%(30例)于14 d觀察期內出現發熱、咳嗽、氣促、呼吸困難等癥狀，被列為確診病例轉至定點醫院。后續對余下40例送至指定隔離點繼續觀察，超過14 d后有2例發病，余下38例全部轉陰。664例核酸檢測陰性者，1.51%(10例)于14 d觀察期內出現癥狀，并被臨床確診(未在本院再次進行核酸檢測)，余下陰性觀察者至14 d期滿均無發病情況，且第二次核酸檢測也均為陰性。4例可疑醫學觀察者平穩度過14 d觀察期，隨后送至指定隔離點繼續觀察，后續全部轉陰。14天內發病率為5.42%(40/738)，繼續觀察期發病率為4.55%(2/44)，整個集中隔離期發病率為5.69%(42/738)。

3 討論

新冠肺炎已證實可以在人際間傳播[9]，且人群普遍易感，導致目前感染病例仍在增長，已出現家庭聚集性發病[10]，并形成全球蔓延態勢。世界衛生組織于2020年1月31日宣布新冠肺炎疫情暴發構成“國際關注的突發公共衛生事件(public health emergency of international concern，PHEIC)”[11-12]。當前研究表明，無癥狀新型冠狀病毒感染者可能造成疾病傳播[13]，故早期識別對控制疾病的流行與傳播極為重要[14]。

對738例以新冠肺炎病例家庭成員為主的無癥狀醫學觀察人員進行核酸檢測篩查，陽性率高達9.49%，考慮到實際感染患者的核酸檢測不一定為陽性，本研究中核酸檢測呈陰性的受檢者在觀察期內也有發病的情況，實際感染的比例應該更高。70例核酸檢測陽性但暫無癥狀者，45.71%在30 d內轉化為確診病例，這些轉化病例在檢測核酸時病毒已侵入體內，只是尚未引起全身免疫性反應，但也可能具有一定的傳染性。因此，盡早發現無癥狀感染者有利于提前干預，避免或縮短病程，減輕癥狀，也有助于疫情防控[15]。

研究發現，部分新冠肺炎潛伏期>14 d[16]，故將14 d內未發病的核酸檢測陽性和可疑醫學觀察者轉移至特定隔離點繼續觀察，后續確有發病的情況；其他觀察者在整個醫學觀察期均未發病，目前已全部轉陰并解除集中隔離(集中隔離時間最長者為27 d)。

各項規范、指南、專家共識明確指出，核酸檢測陰性，并不能排除被新型冠狀病毒感染的可能。本研究中有核酸檢測呈陰性的醫學觀察者在14 d觀察期內出現臨床癥狀而被臨床確診的情況。而余下核酸檢測陰性醫學觀察者則平穩度過了14 d的隔離觀察期，并在第二次核酸檢測中仍呈陰性，隨即解除定點隔離，并囑咐不適隨診(至截稿日尚未接到任何不適消息報告)。因此，依據本研究檢測結果，隔離14 d后核酸檢測仍呈陰性的密切接觸者基本可排除被新型冠狀病毒感染的可能。

為做好疫情的排查，國家衛生健康委員會指出無癥狀感染者主要來源有：(1)新冠肺炎病例的密切接觸者；(2)聚集疫情調查中的主動檢測；(3)新冠肺炎病例傳染源追蹤過程中發現暴露人群；(4)有新冠肺炎病例、持續傳播地區旅游史和居住史的人群。本研究僅以新冠肺炎病例的密切接觸者為研究對象，目前尚未涉及其他3種無癥狀感染者，后期根據情況再做相應報道。