晚期惡性腫瘤患者化療前后外周血T淋巴細胞亞群水平變化分析

高乃姝，朱曉雪，王明迪

（北京大學首鋼醫院，北京 100144）

人體免疫系統中，細胞免疫可有效抗腫瘤，其中以T淋巴細胞亞群中的CD8+、CD4+最為關鍵，CD8+能夠對靶細胞起到細胞介導細胞毒作用，對免疫反應具有抑制作用，而CD4+具有免疫監視功能，可輔助B細胞分泌抗體，增加白細胞介素Ⅱ含量，刺激自然殺傷細胞功能，殺滅腫瘤細胞[1]。二者之間的平衡，對機體免疫功能的維護具有重要作用。化療是臨床上對惡性腫瘤患者進行治療的重要手段，其所使用藥物大部分屬于非特異性細胞毒藥品，可降低機體免疫力，而T淋巴細胞亞群作為主要的人細胞免疫成分，亦會受到一定的影響[2]。為此，本研究分析了化療前后晚期惡性腫瘤患者的T淋巴細胞亞群水平變化情況。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月～2018年12月我院腫瘤科及血液科住院病人進行TB淋巴細胞亞群檢測的45例惡性腫瘤患者，其生存時間均超過3個月。入選者男26例，女19例；年齡29～70歲，平均（55.54±3.29）歲；腫瘤類型：胃癌9例，肺癌12例，乳腺癌12例，肝癌2例，結直腸癌5例，非霍奇金淋巴瘤5例。

1.2 方法

①主要儀器與試劑：流式細胞儀、蝸旋震蕩器、臺式離心機、加樣槍（1000ul、200ul、20ul）流式細胞專用試管、鞘液；PBS。Simultest IMK Lymphocytes Kit檢測試劑盒：A:CD3-FITC，CD8-PE，CD45-PerCP，CD4-APC；B:CD3-FITC，CD16+56-PE，CD45-PerCP，CD19-APC；FACS Lysing Solution紅細胞裂解液；均自美國Becton-Dickinson（BD）公司購得。②實驗步驟：取流式試管2支，依次編號為A和B，分別加入熒光抗體 A、B 10ul；收集抗凝血2-3ml，置于室溫下＜6 h，搖勻，反向加樣，將50 uL全血在不碰到管壁的前提下加入試管內，于室溫下避光保存，時間為15 min；將試管取出，每管添加10倍稀釋的450 uL FACS Lysing Solution，稍稍用力，混勻，避光放置10 min，待管內液體透亮；4℃避光，并于1 h之內上機檢測。

1.3 評價指標

記錄化療前以及化療后4 個月的患者總T 淋巴細胞百分比（T%）、輔助/誘導T淋巴細胞百分 比（ C D 4+T % ） 、 抑 制/細 胞 毒T淋 巴 細 胞 百分比（CD8+T%）、CD4+T%/CD8+T%。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件，計量資料采用“±s”表示，t檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

患者化療后CD4+T%及CD4+T%/CD8+T%低于化療前，T%、CD8+T%高于化療前，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 化療前后患者T淋巴細胞亞群水平對比（±s）

表1 化療前后患者T淋巴細胞亞群水平對比（±s）

時間 T%（%） CD4+T%（%） CD8+T%（%） CD4+T/CD8+T化療前(n=45) 69.15±5.06 34.57±5.09 33.06±4.23 1.59±0.13化療后(n=45) 87.62±3.54 22.63±3.41 47.52±5.09 0.43±0.22 t 20.064 13.073 14.657 30.451 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3 討 論

在腫瘤疾病的發生與進展過程中，機體免疫系統的作用不可忽視。相關研究指出，免疫系統可監測，并消除腫瘤細胞，而接受器官移植、存在獲得性免疫缺陷或者免疫功能不全的患者身患腫瘤疾病的幾率可能更高[3]。在人類機體中，完善的免疫系統可通過免疫監視，規避腫瘤的出現，抑制腫瘤疾病進展，故臨床上亦可通過淋巴細胞水平的變化對惡性腫瘤患者病情進行評估。

T淋巴細胞作為人體免疫系統中功能強大的重要細胞群，可通過各T淋巴細胞亞群之間的相互作用，有效維持正常的機體免疫。而紫杉醇、順鉑、多柔比星等藥物均可提高化療殺傷敏感性，影響腫瘤患者機體免疫力。本研究結果顯示，患者化療后CD4+T%及CD4+T%/CD8+T%低于化療前，T%、CD8+T%高于化療前，提示化療可在不同程度上影響晚期惡性腫瘤患者的外周血T淋巴細胞亞群水平。究其原因，化療藥物畢竟屬于細胞毒類藥物，具有毒性強、選擇性差的特點，可對免疫系統造成損傷，干擾免疫功能的實現[4]。化療后的腫瘤患者免疫功能受到抑制，機體識別或者殺傷突變細胞的功能減弱，但隨著時間的推移，化療藥物在患者體內代謝完全后，其免疫功能可逐漸得到恢復，T淋巴細胞亞群水平也會隨之恢復正常[5]。臨床上可借此對化療效果及患者病情進行觀察，以及時進行調整，更好地維護患者健康。

綜上所述，晚期惡性腫瘤患者在接受化療后，外周血T淋巴細胞亞群水平改變，可為治療方案的制定以及療效評估提供依據。