一例中華鱉消化道環狀出血病的診斷及治療

中華鱉是我國重要名特優水產養殖品種之一，全國中華鱉年產量約30 萬噸，其中浙江省中華鱉養殖年產量約占全國總產量的一半，產值達60 億元以上。近年來，由于環境、飼料、養殖管理等因素導致的中華鱉病害不斷，是影響產業健康可持續發展的重要原因。2019年4月，杭州市一養殖場暴發中華鱉病害，經技術人員現場檢查、病原分離鑒定、藥物敏感性試驗，指導養殖戶對癥用藥，有效控制了病害的繼續發展。現將有關診斷及治療情況總結如下，供從業者參考。

一、診斷

發病養殖池每天死亡中華鱉30～40 只，患病中華鱉體表無明顯癥狀，但活力減弱，解剖可見肝腫大充血、脾臟充血、腸道出血嚴重。剪開腸道，在胃與腸道交接處出現明顯的一條環狀出血點(圖1)，發病嚴重的中華鱉在此形成環狀失血帶并以其為起點，點狀出血現象由密轉稀逐漸向腸道末端蔓延。

圖1 發病中華鱉消化道出血癥狀

二、病原分離與鑒定

在無菌條件下取典型癥狀患病中華鱉的肝、脾、腎及胃腸交接處接種到普通營養瓊脂，28℃條件下培養24 小時后觀察細菌生長情況。接種患病中華鱉肝、脾及胃腸交接處的平皿上均長出淡黃色、邊緣光滑、直徑2毫米左右的菌落。挑取單菌落作革蘭氏染色，顯微鏡下觀察為革蘭氏陰性短桿菌。應用生物梅里埃公司的ATB ID 32E 腸桿菌科半自動鑒定系統，對獲得的細菌進行生化鑒定：用接種針將培養的細菌轉移至0.85%氯化鈉溶液制成0.5 麥氏濁度的菌懸液，在ATB ID 32E 細菌半自動鑒定條上，每個測試孔加入55 微升，在相應孔滴入無菌石蠟油，28℃培養18 小時，利用半自動鑒定儀讀取結果見表1，初步鑒定為溫和氣單胞菌。根據臨床癥狀及實驗室細菌培養鑒定，初步判定此病例為細菌感染引起的中華鱉出現持續性緩慢死亡。

表1 細菌生化鑒定結果

三、細菌最小抑菌濃度測定

選取14 種抗菌藥物用于測試。將選用的抗菌藥物溶解配置成抗菌藥溶液，新鮮培養的細菌用0.85%氯化鈉溶液制成0.5 麥氏濁度的懸菌液，取40 微升，加入19.96 毫升0.85%氯化鈉溶液制成測試菌液。將抗菌藥溶液和測試菌液依次加入測試孔，使測試孔抗菌藥最終濃度依次為0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128、256、512 毫克/升，每孔菌液最終濃度為6×106個/毫升。28℃培養18 小時，測試孔內未見懸濁的視為該孔抗菌液濃度為最小抑菌濃度。測試結果見表2。

四、治療

根據藥敏結果，使用硫酸新霉素進行治療，每千克體重用50 毫克水產用硫酸新霉素拌飼投喂，每天2次，連用7天，及時做好病死中華鱉的撈出和無害化處理。施藥后第3 天中華鱉死亡減少，至第5天死亡現象停止，當年未出現該病的復發情況。2020年4月，該養殖場又出現同樣癥狀的中華鱉，在第一時間使用上述方案進行控制，至用藥第3天即有效控制了病害的蔓延。

表2 細菌最小抑菌濃度測定結果

五、分析

近年中華鱉養殖的細菌性病害逐漸增多，導致抗菌藥物使用的增加，細菌性病原的抗藥性增強。反映到本病例上，病原菌對甲砜霉素、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲唑、磺胺嘧啶、紅霉素、氨芐青霉素等均不敏感，這是當前中華鱉養殖過程中出現的常態。本病例選用了相對敏感的硫酸新霉素而不是最敏感的恩諾沙星，也是為了保留當地中華鱉在對抗細菌性病害中的可使用藥物種類。