丹七膠囊對血小板聚集功能影響的臨床研究*

陳 思，凌莉琴，劉超男，江 虹，周 靜△

(1.四川大學華西醫院實驗醫學科，四川成都 610041；2.四川大學華西臨床醫學院，四川成都 610041)

血小板被活化后可發生黏附和聚集，這在動靜脈血栓的形成過程中發揮了重要作用[1]。丹七膠囊的主要成分為何首烏、丹參、三七粉，具有活血化瘀，理氣止痛之效，臨床上用于預防和治療冠心病、心絞痛、高血脂及心腦血管循環功能障礙引起的頭暈、心肌缺血等[2-3]。有動物實驗報道丹七片能抑制血小板聚集功能[4]，本文擬通過研究丹七膠囊對不同類型誘導劑誘導的血小板聚集功能的影響，進一步探討丹七膠囊影響血小板功能的生理機制，為該藥的臨床應用提供一定的藥理學依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年2—3月年齡為20～28歲健康志愿者32例，其中男性16例，女性16例。排除冠心病、靜脈血栓、嚴重心律失常和肝、腎、血液系統疾病患者。

1.2儀器與試劑 血常規檢測所用儀器為Sysmex XE-5000全自動血液細胞分析儀，凝血常規采用Sysmex CS-5100全自動血凝分析儀檢測，肝腎功指標采用Roche Cobas 8000全自動生化分析儀檢測，血小板聚集功能采用 Chrono-log 700血小板聚集分析儀進行檢測。血小板激活劑二磷酸腺苷(ADP)、腎上腺素(EPI)、花生四烯酸(AA)和瑞斯托霉素(RIS)均購自Hyphen Biomed公司。

1.3給藥方式 將健康志愿者隨機分為空白對照組(安慰劑2 g/次)、低劑量組(丹七膠囊1 g/次)、高劑量組(丹七膠囊2 g/次)、超高劑量組(丹七膠囊3 g/次)，連續服用1周，每天3次。各組性別、年齡等資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.4指標檢測方法 于服藥后1周后采集受試者空腹靜脈血標本，除檢測血常規[紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細胞計數(WBC)、血小板計數(PLT)、血小板分布寬度(PDW)、平均血小板體積(MPV)、大血小板比率(P-LCR)、血小板壓積(PCT)]、凝血常規[凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(FIB)]、肝腎功能指標[總膽紅素(TB)、直接膽紅素(DB)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、三酰甘油(TG)、膽固醇(CHOL)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]，另用光散射比濁法對不同誘導劑ADP、EPI、AA和RIS誘導的血小板聚集功能進行測定。

2 結 果

2.1各組間常規檢查結果比較 服用丹七膠囊1周后，3個劑量組的血常規、凝血常規和肝腎功指標，與空白對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2各組間AA和RIS誘導的血小板最大聚集率(MA)比較 服用丹七膠囊1周后，3個劑量組和空白對照組相比，AA和RIS誘導的MA比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3各組間ADP和EPI誘導的MA比較 服用丹七膠囊1周后，3個劑量組和空白對照組相比，3個劑量組ADP和EPI誘導的MA下降，低劑量組MA與空白對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。高劑量組和超高劑量組的ADP和EPI誘導的MA與空白對照組和低劑量組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，但超高劑量組與高劑量組之間MA比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。ADP和EPI誘導的MA有一定相關性(r=0.321，P=0.013)。

表1 服藥1周后各組常規檢查結果比較

續表1 服藥1周后各組常規檢查結果比較

表2 服藥1周后不同誘導劑后各組MA比較

注:*P<0.05,與空白對照組、低劑量組比較。

3 討 論

血小板聚集功能改變是血栓形成過程中重要的啟動因素之一[5]，與心腦血管疾病、深靜脈血栓、肺栓塞等臨床常見病或危重病的發病有一定聯系。丹七膠囊對血小板聚集功能的影響可能為血栓性疾病的防治提供新思路。

不同誘導劑通過不同途徑誘導血小板聚集，ADP和EPI均可通過影響血小板內腺苷酸活化酶水平介導血小板聚集過程。ADP是臨床上最常用的血小板聚集誘導劑之一，可結合血小板膜上ADP受體抑制血小板腺苷酸環化酶的活化，繼而通過降低血小板中環磷酸腺苷(cAMP)水平，促進Ca2+內流，誘發血小板聚集[6-8]。EPI與血小板表面腎上腺素能受體α2A結合，影響ATP依賴的CI-通道，降低腺苷酸環化酶活性，減少血小板內cAMP，從而誘導血小板聚集[9-11]。AA在環氧化酶作用下產生前列腺素G2、前列腺素H2，并通過一系列反應形成大量血栓素A2(TXA2) 。TXA2使血小板內cAMP減少，胞內游離Ca2+增多，因而有很強的聚集血小板的作用[12-13]。 ADP、AA和EPI通過不同途徑降低血小板內cAMP水平，促使鈣離子內流進而誘導血小板聚集。磷酸二酯酶抑制劑類藥物通過抑制細胞內cAMP的水解過程，抑制ADP、AA、EPI誘導的血小板聚集[14]。在本研究中，健康志愿者連續服用丹七膠囊1周后，ADP和EPI誘導的MA下降，表明丹七膠囊具有抑制血小板聚集的作用。AA誘導的MA未見明顯變化，提示丹七膠囊可能作用于ADP和EPI誘導血小板聚集的共同途徑即通過抑制或降低血小板腺苷酸環化酶的活性發揮其抑制血小板聚集的功能。

本研究發現服用不同劑量丹七膠囊后，ADP和EPI誘導的MA明顯下降。與空白對照組比較，高劑量和超高劑量組受試者 ADP和EPI誘導的MA下降，差異均有統計學意義(P<0.05)，但高劑量組與超高劑量組之間MA比較，差異無統計學意義(P>0.05)，提示可能丹七膠囊對血小板聚集的抑制作用與服用藥物劑量有關。在一定藥物濃度范圍內，增大口服丹七膠囊的劑量無明顯不良反應且能更好地抑制血小板聚集，但繼續增大丹七膠囊劑量不能增強抑制效果。

有研究報道，在動脈粥樣硬化家兔模型中丹七下調動物血脂水平[15]，但本研究中丹七膠囊未影響健康人血脂水平，其可能原因：(1)健康人脂蛋白代謝不同于病理狀態；(2)不同研究中丹七膠囊劑量不同；(3)動物實驗與人體實驗存在差異。

4 結 論

丹七膠囊一定程度抑制血小板聚集，這一作用可能通過影響血小板內腺苷酸活化酶水平實現，且其抗血小板聚集效應可能與用藥劑量有關。本研究探討了丹七膠囊抑制血小板聚集可能的生理機制及藥物機制，為該藥防治血栓性疾病提供了實驗依據。