我院地中海貧血的基因型特點

孔鳳珍 吳贊開 溫嘉敏 劉惠

[摘要]目的 研究我院地中海貧血的基因型特點。方法 選取2016年1月～2018年6月在我院接受健康體檢及產前檢測的1600例受檢人員實施項目數據指標分析，采用聚合酶鏈式反應法+膜雜交法測定全部受檢人員的α地中海貧血或β地中海貧血型別，統計檢測結果。結果 1600例受檢人員中，地中海貧血的檢出率為47.19%，比較常見的有SEA雜合缺失的α地中海貧血、41-42位點雜合突變的β地中海貧血、3.7雜合缺失的α地中海貧血、654位點雜合突變的β地中海貧血、-28位點雜合突變的β地中海貧血、3.7缺失復合東南亞型缺失的α地中海貧血、17位點雜合突變的β地中海貧血及4.2雜合缺失的α地中海貧血、71-72位點雜合突變的β地中海貧血。結論 我院α地中海貧血型別以SEA雜合缺失為主，β地中海貧血型別以41-42位點雜合突變為主，需要加強咨詢和干預管理，控制及減少地中海貧血情況。

[關鍵詞]α地中海貧血;β地中海貧血;型別

[中圖分類號] R556.61? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2020）3（c）-0156-04

Genotypic characteristics of thalassemia in our hospital

KONG Feng-zhen? ?WU Zan-kai? ?WEN Jia-min? ?LIU Hui

Department of Laboratory， People′s Hospital of Gaoyao District in Zhaoqing City， Guangdong Province， Zhaoqing? ?526040， China

[Abstract] Objective To study the genotypic characteristics of thalassemia in our hospital. Methods From January 2016 to June 2018， 1600 health examinees and prenatal examinees in our hospital were selected and analyzed for item data. The α thalassemia or β thalassemia types of all the examinees were determined by polymerase chain reaction and membrane hybridization， and the statistical results were obtained. Results Among the 1600 subjects， the detection rate of thalassemia was 47.19%. The most common ones were α thalassemia with SEA heterozygosity deletion， β thalassemia with 41-42 heterozygosity mutation， α thalassemia with 3.7 heterozygosity deletion， β thalassemia with 654 heterozygosity mutation， β thalassemia with -28 heterozygosity mutation， 3.7 deletion combined with Southeast Asia type deletion of alpha thalassemia， 17-locus heterozygous mutation of beta-thalassemia and 4.2-locus heterozygous deletion of alpha-thalassemia， 71-72 locus heterozygous mutation of β thalassemia. Conclusion In our hospital， the main type of α thalassemia is sea heterozygous deletion， and the main type of β thalassemia is 41-42 heterozygosity mutation. It is necessary to strengthen counseling and intervention management to control and reduce the situation of thalassemia.

[Key words] α thalassemia; β thalassemia; Type

地中海貧血為常見的一種遺傳性血液疾病，α地中海貧血、β地中海貧血是地中海貧血常見的兩種類型，地中海貧血的患病率較高，對地中海貧血患者機體健康帶來不良影響的同時，也導致地中海貧血患者心理健康受到一定影響，同時導致地中海貧血患者的日常生活質量顯著下降[1-2]。不同地區的地中海貧血型別存在一定差異性，中國廣東省地中海貧血人數較多，嚴重損害人們的機體健康[3-4]。因此，實行地中海貧血檢測具有重要價值，有助于盡早檢出地中海貧血并予以及時干預[5-6]。本研究對在我院接受健康體檢及產前檢測的1600例受檢人員予以調查及統計，評估我院受檢人員地中海貧血型別的檢測結果，為本地區地中海貧血情況提供數據支持，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月～2018年6月在我院接受健康體檢及產前檢測的1600例受檢人員，其中男451例，女1149例;年齡22～45歲，平均（30.59±2.65）歲。本研究已經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準：受檢人員自愿參與本研究并簽署知情同意書，且愿意接受地中海貧血檢測。排除標準：①存在缺鐵性貧血疾病者;②存在急性出血現象者。

1.2方法

1.2.1檢測儀器及試劑? 檢測儀器：ABI2720 PCR擴增儀（美國賽默飛世爾）、HB2012A 凱普核酸分子雜交儀（潮州凱普生物化學有限公司），試劑：α-地中海貧血基因檢測試劑盒（廣州凱普醫藥科技有限公司）、β-地中海貧血基因檢測試劑盒（廣州凱普醫藥科技有限公司）。

1.2.2檢測方法? 采用聚合酶鏈式反應法+膜雜交法。

1.2.3 DNA獲取方法? 采集受檢人員2 ml靜脈血，加入3倍體積溶血溶液，放在冰水浴內靜置1 h，讓紅細胞溶血，實施離心干預，添加SE液（75 mmol/L氯化鈉，25 mmol/L乙二胺四乙酸）適宜懸浮細胞，添加十二烷基硫酸鈉（SDS）調節濃度至1%，將蛋白酶K加入，調節濃度到100 mg/L，在56℃水浴內靜置7 h，采取等體積酚、酚/氯仿、氯仿/異戊醇各抽提1次，采取醋酸鈉/無水乙醇處理得到DNA[7]。

1.2.4聚合酶鏈式反應法? 采取DNA合成儀得到聚合酶鏈式反應引物及探針，設定反應體積為50 μl，設定擴增條件是94℃、50 s，50℃、50 s，70℃、50 s，實行30次循環[8]。

1.2.5 DNA電泳法? 得到10 μl擴增產物，采取1.3%瓊脂糖予以凝膠電泳，于100伏電壓下實施1 h凝膠電泳，采取溴乙啶予以染色，于紫外檢測儀分析檢測結果[9]。

1.2.6反向斑點雜交法? 將反向斑點雜交膜條置入添加雜交液的反應管內，添加產物，采取水浴實施變性干預，予以過夜雜交，實行洗膜操作，添加酶對生物蛋白實行標記，實行洗膜操作，添加酶底物予以顯色處理，分析檢測結果[10]。

2結果

1600例受檢人員中，檢測結果正常的有845名，占比52.81%（845/1600）;檢出地中海貧血755例，占比47.19%（755/1600）。其中，SEA雜合缺失的α地中海貧血最為常見，占比17.81%，其次是41-42位點雜合突變的β地中海貧血，占比5.31%，然后依次是3.7雜合缺失的α地中海貧血（4.81%）、654位點雜合突變的β地中海貧血（3.25%）、-28位點雜合突變的β地中海貧血（2.94%）、3.7缺失復合東南亞型缺失的α地中海貧血（1.94%）、17位點雜合突變的β地中海貧血（1.44%）及4.2雜合缺失的α地中海貧血（1.44%）、71-72位點雜合突變的β地中海貧血（1.12%），其余α地中海貧血或β地中海貧血不同型別所占比率均在1%以下（表1）。

3討論

地中海貧血為多見的一種溶血性疾病，主要由于珠蛋白產生存在障礙而引發，該疾病具有遺傳特征[11-13]。α地中海貧血、β地中海貧血為地中海貧血的常見類型，同時也為廣東省較為高發的貧血類型[14]。

本研究統計我院地中海貧血的型別情況，旨在為本地區地中海貧血的針對性干預及預防提供參考。本研究結果顯示，接受健康體檢及產前檢測的1600例受檢人員中，檢測結果不正常的占比高于47.00%，較常見的包括SEA雜合缺失的α地中海貧血（17.81%）、41-42位點雜合突變的β地中海貧血（5.31%）、3.7雜合缺失的α地中海貧血（4.81%）、654位點雜合突變的β地中海貧血（3.25%）、-28位點雜合突變的β地中海貧血（2.94%）、3.7缺失復合東南亞型缺失的α地中海貧血（1.94%）、17位點雜合突變的β地中海貧血（1.44%）及4.2雜合缺失的α地中海貧血（1.44%）、71-72位點雜合突變的β地中海貧血（1.12%），其余α地中海貧血或β地中海貧血不同型別較為少見，所占比率都處于1%以下。提示我院地中海貧血情況較為多見，有可能和本地區人們對地中海貧血的認知度較低、婚前及產前接受地中海貧血檢測率較低等存在一定關系。黃爍丹等[15]的研究中，對廣東省梅州地區本市戶籍人口人員的血液標本實施檢測，檢出血液學陽性29 852例，明確存在地中海貧血的有18 770例，α地中海貧血相關基因突變類型共有6種，α地中海貧血相關基因突變類型最為常見的是-SEA，所占比率為75.224%，β地中海貧血相關基因突變類型有14種，β地中海貧血相關基因突變類型最為常見的是IVS-Ⅱ-654（C-T），所占比率為38.069%，然后是CD41/42（-TTCT），所占比率為33.626%。與本研究結果存在部分相似性，提示本研究結果具有可靠性。

綜上所述，我院α地中海貧血型別主要為SEA雜合缺失，β地中海貧血型別主要為41-42位點雜合突變，應進一步增強咨詢及干預管理，有效控制和減少地中海貧血情況。

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（收稿日期：2019-08-12? 本文編輯：閆? 佩）