人乳頭瘤病毒分型與Cervista檢測(cè)在宮頸內(nèi)皮病變中的診斷價(jià)值

范菊花 秦艷 宋春林

[摘要]目的 比較人乳頭瘤病毒（HPV）分型與Cervista檢測(cè)兩種方法在宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）中的診斷價(jià)值。方法 選取2017年1月～2018年12月我院經(jīng)新柏氏液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測(cè)并經(jīng)病理活檢確診為鱗狀上皮內(nèi)低度瘤樣病變（CIN1）106例和高度瘤樣病變（CIN2+）210例患者作為研究對(duì)象，采集宮頸脫落細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行HPV分型和Cervista檢測(cè)，比較兩種檢測(cè)的診斷效果。結(jié)果 HPV分型和Cervista檢測(cè)對(duì)14種高危型HPV的檢測(cè)結(jié)果一致率為87.34%（276/316），KI值為0.6377。HPV分型檢測(cè)在CIN1組中陽性率（51.88%）高于Cervista檢測(cè)的33.96%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但在CIN2+組中兩種方法陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 兩種檢測(cè)方法一致性良好，在宮頸癌篩查中的診斷價(jià)值相當(dāng)。HPV分型檢測(cè)在CIN1中有較高的陽性率。

[關(guān)鍵詞]宮頸上皮內(nèi)瘤變;人乳頭瘤病毒;反向點(diǎn)雜交;分型;Cervista檢測(cè)

[中圖分類號(hào)] R735.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2020）3（c）-0135-03

Diagnostic value of human papillomavirus typing and Cervista detection in cervical intraepithelial neoplasia

FAN Ju-hua? ?QIN Yan? ?SONG Chun-lin

Department of Pathology， Foshan Women and Children Hospital， Guangdong Province， Foshan? ?528000， China

[Abstract] Objective To compare the diagnostic value of two methods of human papillomavirus （HPV） typing and Cervista detection in cervical intraepithelial neoplasia （CIN）. Methods A total of 106 women with CIN1 and 210 women with CIN2+ diagnosed by new baishi liquid-based cytology （TCT） and confirmed by cervical biopsy in our hospital from January 2017 to December 2018 were enrolled in this study. All participants underwent HPV typing and Cervista testing simultaneously. Then the diagnostic effect of the two tests was compared. Results The overall coincidence rate of the two HPV testing methods was 87.34% （276/316）， and the KI value was 0.6377. The positive rate of HPV typing in CIN1 group was 51.88%， which was higher than that of Cervista testing （33.96%）， the difference was statistically significant （P<0.05）， but there was no significant difference between the two methods in the CIN2+ group （P>0.05）. Conclusion The two methods are in good consistency and have equivalent diagnostic value in cervical cancer screening. HPV typing test has a higher positive rate in CIN1.

[Key words] Cervical intraepithelial neoplasia; Human papillomavirus; Reverse dot blot; Typing; Cervista test

宮頸癌是中國女性第二大惡性腫瘤，僅次于乳腺癌。采用TBS分類法的新柏氏液基細(xì)胞學(xué)（thinprep cytologic test，TCT）檢測(cè)應(yīng)用于宮頸癌的篩查已有較長時(shí)間，大大提高了宮頸病變的檢出率。但單純的TCT檢測(cè)檢出率較低[1]。研究表明，HPV持續(xù)感染8個(gè)月以上可發(fā)生宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intra epithelial neoplasia，CIN），并有可能發(fā)展為浸潤癌[2]。因此，聯(lián)合TCT檢測(cè)和HPV病毒檢測(cè)才能有效控制宮頸癌的發(fā)生。HPV病毒檢測(cè)方法學(xué)較多，有些只能檢測(cè)高危亞型，有些只能檢測(cè)少數(shù)幾個(gè)亞型，基因型的感染存在明顯的年齡和地區(qū)分布差異[3]，因此，本研究對(duì)比分析了基于RDB-PCR法的HPV分型和Cervista檢測(cè)兩種不同的方法在CIN中的診斷價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2017年1月～2018年12月在佛山市婦幼保健院宮頸門診行宮頸癌篩查、經(jīng)TCT檢測(cè)為宮頸上皮內(nèi)瘤變的患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者無宮頸錐切、放化療史;患者非妊娠期;患者未患有高血壓、糖尿病等慢性病。排除標(biāo)準(zhǔn)：以病理活檢為“金標(biāo)準(zhǔn)”，剔除確診結(jié)果與TCT檢測(cè)結(jié)果不符者。入選患者CIN1共106例，CIN2+共210例，年齡20～50歲，中位年齡33.47歲。經(jīng)過患者知情選擇，采集宮頸脫落細(xì)胞，同時(shí)行HPV分型和Cervista檢測(cè)。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2方法

采集宮頸脫落細(xì)胞行TCT檢測(cè)，結(jié)果為低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）的患者，在陰道鏡下行病理活檢，根據(jù)確診結(jié)果分為CIN1組和CIN2+組。

使用TCT剩余樣本行Cervista檢測(cè)，采用酶切信號(hào)放大技術(shù)檢測(cè)14種高危型HPV病毒。其中A5/A6型包括51、56、66亞型，A7型包括18、39、45、59、68亞型，A9型包括16、31、33、35、52、58亞型。

采集宮頸脫落細(xì)胞行HPV分型，檢測(cè)23型HPV病毒，除了Cervista的14種高危型，還包括6、11、42、43、81這5個(gè)低危型以及53、73、82、83這4個(gè)高危型。

1.3觀察指標(biāo)

計(jì)算兩種HPV檢測(cè)方法的陽性率，比較CIN1和CIN2+兩組中的陽性率差異。比較HPV分型和Cervista檢測(cè)兩種方法的一致性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)（M）表示，計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。一致性采用Kappa檢驗(yàn)，KI>0.4為一致性良好，KI>0.75為一致性極好。

2結(jié)果

2.1兩種檢測(cè)方法陽性率的比較

Cervista檢測(cè)檢出CIN1組陽性率為33.96%（36/106），CIN2+組陽性率為92.85%（195/210）。HPV分型檢測(cè)出CIN1組陽性率為51.88%（55/106），CIN2+組陽性率為98.10%（206/210）。在CIN1組中，HPV分型陽性率高于Cervista檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;在CIN2+組中，兩種方法陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

2.2兩種檢測(cè)方法一致性的比較

在CIN1組中，兩種方法均為陽性的有35例，1例Cervista檢測(cè)（+）HPV分型檢測(cè)（-），20例Cervista檢測(cè)（-）HPV分型檢測(cè)（+）。在CIN2+組中，兩種方法均為陽性的有191例，4例Cervista檢測(cè)（+）HPV分型檢測(cè)（-），15例Cervista檢測(cè)（-）HPV分型檢測(cè)（+）。兩種方法均為陽性的共計(jì)226例，Cervista檢測(cè)（+）HPV分型檢測(cè)（-）共計(jì)5例，Cervista檢測(cè)（-）HPV分型檢測(cè)（+）共計(jì)35例（表2）。兩種方法結(jié)果一致性良好（KI=0.6377）。

3討論

宮頸癌是最常見的惡性腫瘤之一，在中國僅次于乳腺癌。全球每年新發(fā)病例52.8萬，其中26.6萬死亡[4]。中國每年新發(fā)病例超過13萬，占全球新發(fā)病例的25%[5]。由于通過宮頸癌篩查可明顯降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率，國內(nèi)外均高度重視宮頸癌的篩查[6-7]。目前在臨床已有多種方法運(yùn)用在宮頸病變檢查上，最為常見的是采用TBS診斷系統(tǒng)的新柏氏液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，敏感性40%～70%，特異性90%以上[8]，在國內(nèi)外都已將宮頸癌的發(fā)病率和死亡率降到較低水平。然而許多基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)病理醫(yī)生相對(duì)缺乏，因此難以適用于基層醫(yī)院大規(guī)模宮頸癌篩查。

HPV持續(xù)感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變的高危險(xiǎn)因素。目前已克隆的亞型超過160種，其中約40種與女性生殖道感染有關(guān)，根據(jù)病毒導(dǎo)致宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)性的大小，可將其分為高危型HPV和低危型HPV兩類[9]。低危型可引起良性病變?nèi)缟车罎耩嗟龋话悴粚?dǎo)致宮頸癌。高危型HPV可引起高級(jí)別的宮頸病變。大量研究表明，高危型HPV感染宮頸上皮基底層細(xì)胞后，首先呈游離狀態(tài)，處于這一狀態(tài)的HPV大多數(shù)在2年內(nèi)自然清除，一般不引起高級(jí)CIN，但其中部分高危型整合進(jìn)宿主DNA成為持續(xù)感染，并出現(xiàn)病毒癌蛋白E6、E7過度表達(dá)，最終導(dǎo)致宿主細(xì)胞發(fā)生癌變[10]。因此，檢測(cè)HPV病毒成為宮頸癌篩查的新手段。

近幾年開展的HPV病毒檢測(cè)，相對(duì)宮頸細(xì)胞學(xué)而言，作為宮頸癌前病變的一線初篩方法更有優(yōu)勢(shì)。目前已有多種HPV檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于臨床[11-12]。國內(nèi)程細(xì)云等[13]比較了HC2與TCT聯(lián)合運(yùn)用的價(jià)值，結(jié)果表明聯(lián)合檢測(cè)能有效提高靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度以及陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值，而單一的HPV檢測(cè)無法達(dá)到該成果。張朝清等[14]比較了HPV檢測(cè)聯(lián)合TCT在宮頸癌患者篩查和診斷中的意義，結(jié)果表明具有診斷效率高、診斷速度快、且不易誤診的優(yōu)點(diǎn)。吳志東等[15]則比較了HPV分型聯(lián)合TCT和陰道鏡在宮頸癌變篩查中的應(yīng)用價(jià)值，認(rèn)為將3種檢查方法聯(lián)合用于臨床宮頸病變的篩查能有效提高檢出率。而國外的研究比較了HC2和Cervista聯(lián)合運(yùn)用TCT的的診斷價(jià)值[16-17]。但是基于RDB-PCR的HPV分型與Cervista聯(lián)合TCT檢測(cè)的優(yōu)缺點(diǎn)卻鮮有比較。本研究選擇了316例經(jīng)病理活檢診斷為CIN的樣本同時(shí)進(jìn)行HPV分型檢測(cè)和Cervista檢測(cè)，以比較兩個(gè)HPV檢測(cè)方法聯(lián)合TCT檢測(cè)在CIN中的診斷價(jià)值。HPV分型檢測(cè)可以檢測(cè)23個(gè)亞型，其中包括5種低危型和18種高危型。而Cervista檢測(cè)僅包括14種高危型，這14種高危型在HPV分型檢測(cè)覆蓋范圍內(nèi)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在CIN1組中，HPV分型檢測(cè)的陽性率高于Cervista檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這其中一個(gè)原因是，在CIN1中有一些為低危亞型感染，如6、11、42、43、81這5個(gè)亞型，以及高危亞型中的53、73、82、83這4個(gè)亞型，這些是在Cervista檢測(cè)范圍之外的。這與董濱華等[18]的研究結(jié)果一致。而在CIN2+組中，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

綜上所述，兩種方法在宮頸癌篩查中結(jié)果一致性良好，有同等診斷價(jià)值。HPV分型檢測(cè)能夠檢測(cè)一些由低危亞型導(dǎo)致的低度病變。建議聯(lián)合HPV分型與TCT檢測(cè)用于宮頸病變的篩查。

[參考文獻(xiàn)]

[1]潘敏，鄧再興，桂啟芳.液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合高危型人乳頭狀瘤病毒-DNA檢測(cè)在早期宮頸癌及癌前病變?cè)\斷中的臨床價(jià)值[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2017，27（15）：2208-2210.

[2]陳淑芬，峗淑莉，宋春林，等.佛山地區(qū)8985例HPV感染亞型分析[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2015，15（3）：325-327.

[3]姚軍，李曼，鐘萍，等.HPV亞型感染的地域分布與宮頸病變的關(guān)系[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2011，27（1）：34-38.

[4]Schiffman M，Solomon D.Clinical practice.Cervical-cancer screening with human papillomavirus and cytologic cotesting[J].N Engl J Med，2013，369（24）：2324-2331.

[5]Li N，F(xiàn)ranceschi S，Howell-Jones R，et al.Human papillomavirus type distribution in 30 848 invasive cervical cancers worldwide：Variation by geographical region，histological type and year of publication[J].Int J Cancer，2011，128（4）：927-935.

[6]李靜然，張志軍，王禹，等.陰道自取樣HPV宮頸癌篩查聯(lián)合宮頸細(xì)胞學(xué)p16-（INK4a）蛋白檢測(cè)在精準(zhǔn)篩查中的應(yīng)用[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2019，20（4）：321-325.

[7]Arbyn M，Verdoodt F，Snijders PJ，et al.Accuracy of human papillomavirus testing on self-collected versus clinician-collected samples：a meta-analysis[J].Lancet Oncol，2014，15（2）：172-183.

[8] Liu Y，Zhang L，Zhao G，et al.The clinical research of Thinprep Cytology Test （TCT） combined with HPV-DNA detection in screening cervical cancer[J].Cell Mol Biol（Noisy-le-grand），2017，63（2）：92-95.

[9]董濱華，孫蓬明，毛曉丹，等.兩種不同人乳頭瘤病毒檢測(cè)方法對(duì)子宮頸上皮內(nèi)病變篩查價(jià)值的比較[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2016，17（6）：494-497.

[10]Berkhof J，Meijer C J.Human papillomavirus DNA versus papanicolaou screening tests for cervical cancer[J].N Engl J Med，2007，357（6）：642-643.

[11]周成，郭曉玲，劉正平，等.佛山地區(qū)15867例女性HPV基因亞型分析[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2017，17（3）：93-95.

[12]莫菊玲，馮敏清，鄭玉華，等.CervistaHPV檢測(cè)在宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變中的診斷價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（22）：3179-3181.

[13]程細(xì)云，余瑛，王冬梅.HC2與TCT檢測(cè)在宮頸癌及癌前病變中的診斷價(jià)值[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2017，24（8）：66-68.

[14]張朝清，劉麗，吳定濱，等.TCT聯(lián)合HPV檢查在宮頸癌患者篩查和診斷中的意義[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2018，25（6）：99-101.

[15]吳志東，吳振勇，黃彩鳳，等.TCT、HPV-DNA分型聯(lián)合陰道鏡檢查在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2019，26（6）：133-136.

[16]Alameda F，Garrote L，Mojal S，et al.Cervista HPV HR test for cervical cancer screening：a comparative study in the Catalonian population[J].Arch Pathol Lab Med，2015，139（2）：241-244.

[17]Boers A，Slagter-Menkema L，van Hemel BM，et al.Comparing the Cervista HPV HR test and Hybrid Capture 2 assay in a Dutch screening population： improved specificity of the Cervista HPV HR test by changing the cut-off[J].PLoS One，2017，9（7）：e101930.

[18]董濱華，孫蓬明，毛曉丹，等.兩種不同人乳頭瘤病毒檢測(cè)方法對(duì)子宮頸上皮內(nèi)病變篩查價(jià)值的比較[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2016，17（6）：494-497.

（收稿時(shí)間：2019-09-05? 本文編輯：陳文文）