PAI-1過表達促進食管鱗癌細胞的侵襲和遷移

王迪，楊荔艷，劉奏，余竟，張敏杰，張鈺，蔡巖，徐昕，郝佳潔，王明榮

研究報告

PAI-1過表達促進食管鱗癌細胞的侵襲和遷移

王迪，楊荔艷，劉奏，余竟，張敏杰，張鈺，蔡巖，徐昕，郝佳潔，王明榮

國家癌癥中心/國家腫瘤臨床醫學研究中心, 中國醫學科學院北京協和醫學院腫瘤醫院腫瘤精準醫學研究中心, 分子腫瘤學國家重點實驗室，北京 100021

食管癌是常見的惡性腫瘤之一。由基因編碼的纖溶酶原激活物抑制因子1 (plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)已被報道在多種類型癌癥患者的腫瘤組織中存在高表達并參與癌癥進展。為探討PAI-1蛋白在食管鱗癌中的作用及其分子機制，本研究首先利用Western blot實驗和酶聯免疫吸附實驗(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測各食管鱗癌細胞系中PAI-1的表達和分泌水平，結果顯示，PAI-1高表達的食管鱗癌細胞系分泌至細胞外的PAI-1水平相對較高。進一步選取PAI-1表達及分泌水平均較高的KYSE150和KYSE450細胞系作為研究模型，通過siRNA(小干擾RNA)瞬時轉染和Transwell實驗證實敲降可顯著抑制食管鱗癌KYSE150和KYSE450細胞的侵襲和遷移。同時，構建了慢病毒介導的穩定敲降細胞株KYSE150和KYSE450，將穩定敲降的細胞培養基中外源加入PAI-1蛋白進行Transwell回復實驗，結果表明PAI-1過表達可增強食管鱗癌細胞的侵襲和遷移能力。體內實驗結果顯示，降低PAI-1表達可顯著抑制食管鱗癌細胞的成瘤和肺轉移能力。分子水平檢測表明PAI-1過表達可激活AKT和ERK信號通路，免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, Co-IP)實驗結果進一步顯示PAI-1可能與膜受體LRP1 (LDL receptor related protein 1)存在相互作用。上述研究結果表明，PAI-1可能通過與LRP1相互作用進而促進食管鱗癌細胞的侵襲和遷移。……