絨毛膜羊膜炎與陰道微生物菌群的臨床相關性

陳丹玲 許林莉 梁海英 吳錦華

廣東省婦幼保健院產(chǎn)科，廣東廣州 511400

絨毛膜羊膜炎是指病原微生物侵入到破裂的絨毛膜引發(fā)的非特異性感染性疾病[1]。由于本病起病隱匿，早期無明顯臨床癥狀，部分患者被確診時已是感染晚期，錯過治療的最佳時機，從而嚴重的影響了母嬰的生命健康[2]。而絨毛膜羊膜炎的病因尚未明確，可能與宮頸或陰道內(nèi)的病原微生物上行性感染、血液性感染和直接感染（絨毛膜取樣、羊水穿刺等其他胎兒檢測）等因素有關[3-4]，但目前臨床中對于本方面的相關研究較少，因此，我院從絨毛膜羊膜炎與陰道微生物菌群的臨床相關性進行分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月～2019年3月于我院進行治療的156例患者為研究對象，其中78例絨毛膜羊膜炎孕婦為感染組，78例無絨毛膜羊膜炎孕婦為非感染組。納入標準：（1）感染組患者均符合《中華婦產(chǎn)科學》對絨毛膜羊膜炎的診斷標準[5]：患者體溫＞37.8℃，心率＞100次/min，胎心基線＞160次/min，白細胞計數(shù)＞15×109/L，羊水具有刺鼻的臭味，滿足以上3個條件即可診斷，若患者未出現(xiàn)上述癥狀則為非感染者；（2）單胎妊娠者；（3）孕周為30～40周；（4）入院前均未服用任何抗菌的藥物。排除標準：（1）不符合納入標準者；（2）患有妊娠合并癥或并發(fā)癥者。兩組患者年齡、孕周、孕前BMI、產(chǎn)次等一般情況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院相關倫理委員會批準，患者簽署知情同意書。

表1 兩組患者基線資料比較

表2 兩組孕婦陰道感染情況比較[n（%）]

1.2 方法

1.2.1 陰道微生物菌群檢測方法 全部孕婦在產(chǎn)檢時，將涂抹潤滑液的陰道窺探器置入陰道內(nèi)，觀察陰道分泌物的性狀，然后醫(yī)生用無菌棉拭子盡量收集陰道口內(nèi)3～4cm處的陰道分泌物，將收集標本的棉拭子放入含有1mL Tris-HCl的無菌管里，加入溶菌酶，將混合液的濃度調(diào)到100μg/mL，37℃條件下振動30min，加入蛋白酶K，將混合液的濃度調(diào)到200μg/mL，56℃條件下反應3h，10000r/min離心15min，取上清液，進行細菌DNA的檢測。

1.2.2 絨毛膜羊膜炎檢測方法 胎盤胎膜檢測取自陰道分娩或剖宮產(chǎn)分娩時，取距離胎膜破口5cm處2cm×2cm×2cm大小的胎膜組織，10%甲醛固定，石蠟包埋，進行病理切片后HE染色，電鏡觀察高倍視野下含有5個或5個以上的中性粒細胞浸潤，同時患者伴有體溫升高，心率加快、血常規(guī)中白細胞增加，即可診斷為絨毛膜羊膜炎。

1.3 觀察指標

比較兩組患者B族鏈球菌、陰道加德納菌、類桿菌、大腸埃希菌、解脲支原體的陰道感染率。

1.4 統(tǒng)計學方法

全部數(shù)據(jù)均使用SPSS20.0進行處理，計數(shù)資料用率（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料用（±s）表示，采用t檢驗。應用Logistic回歸分析絨毛膜羊膜炎發(fā)生的的獨立危險因素，及其比值比（Odds ratio， OR）和95%的置信區(qū)間。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組孕婦陰道感染情況比較

感染組孕婦的陰道感染率明顯高于非感染組，且感染組B族鏈球菌、類桿菌、陰道加德納菌、大腸埃希菌、解脲支原體的感染率明顯高于非感染組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

2.2 絨毛膜羊膜炎發(fā)生的相關危險因素的單因素Logistic回歸分析

單因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，解脲支原體（OR=3.700；P=0.028）、B族鏈球菌（OR=21.459；P=0.003）、類 桿 菌（OR=4.957；P=0.045）、陰 道加 德 納 菌（OR=28.368；P=0.001）、大 腸 埃 希 菌（OR=6.239；P=0.020）為絨毛膜羊膜炎發(fā)生的危險因素，見表3。

2.3 絨毛膜羊膜炎發(fā)生的相關危險因素的多因素Logistic回歸分析

多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，B族鏈球菌（OR=8.85；P=0.049）、陰道加德納菌（OR=17.162；P=0.008）、大腸埃希菌（OR=6.562；P=0.022）為絨毛膜羊膜炎發(fā)生的獨立危險因素，見表4。

表3 絨毛膜羊膜炎的相關危險因素的單因素Logistic回歸分析

表4 絨毛膜羊膜炎的相關危險因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

絨毛膜羊膜炎是婦產(chǎn)科常見的疾病[6]，由于胎膜破裂后多種病源微生物上行性感染所致，其感染率隨著胎膜破裂時間的延長而增高，常會引起早產(chǎn)、新生兒敗血癥和胎兒死亡等不良的母嬰結(jié)局[7-8]。而由于本病早期臨床癥狀不明顯，難以發(fā)現(xiàn)，因此部分孕婦被診斷時已是感染晚期[9]，延誤了最佳治療時機[10]，從而嚴重威脅了母嬰的生命安全，所以對于絨毛膜羊膜炎孕婦給予早期預防性治療尤為重要，且受到了醫(yī)護人員的廣泛重視。因此，筆者從絨毛膜羊膜炎與陰道微生物菌群的臨床相關性進行研究，為臨床治療本病提供理論指導。

本研究結(jié)果顯示：感染組陰道感染率明顯高于非感染組，說明絨毛羊膜炎與陰道微生物菌群存在相關性，分析原因為妊娠期間孕婦體內(nèi)的激素改變，導致陰道內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變，正常情況下占優(yōu)勢的乳酸桿菌被抑制導致其他微生物出現(xiàn)異常增殖，從而誘發(fā)細菌性陰道病，而細菌性陰道病會增加上行性感染的風險，故陰道細菌感染率越高則絨毛膜羊膜炎發(fā)生風險越高[11]；另外，由于妊娠期間母體的免疫功能下降，對于陰道、宮頸、胎盤、羊膜、絨毛膜等局部組織的屏障保護作用下降，對病原微生物的抵抗力降低，故為病原微生物感染提供了一個有利的條件[12]。因此，當病原微生物侵入到組織或黏膜后進行大量繁殖，并在宮頸或陰道穹隆處產(chǎn)生多種蛋白水解酶，降低了胎膜的脆性和強度，從而增加了孕婦絨毛膜羊膜炎發(fā)生的風險。

單因素Logistic回歸模型分析結(jié)果顯示：B族鏈球菌、陰道加德納菌、類桿菌、大腸埃希菌、解脲支原體與絨毛膜羊膜炎的發(fā)生具有相關性，分析原因為，B族鏈球菌主要寄居于生殖道和泌尿道，對黏膜的吸附力和穿透力較強，對機體的損害較大。當B組鏈球菌感染陰道、宮頸等處時可進行大量繁殖，上行性感染胎膜，并通過該菌產(chǎn)生的多種蛋白水解酶和免疫細胞的吞噬作用侵蝕胎膜，引起胎膜的脆性增加、張力下降，從而導致胎膜破裂，使得細菌進入胎膜，誘導絨毛膜羊膜炎的發(fā)生[13-14]。本研究結(jié)果與路暢[15]等研究一致。陰道加德納菌、類桿菌屬于厭氧菌，可以產(chǎn)生陰道溶細胞素，抑制陰道的免疫屏障作用，并且可以通過CD59補體分子途徑激活蛋白激酶，誘導陰道上皮細胞凋亡，從而為細菌的增殖提供了一個有利的環(huán)境，同時其能夠緊密的吸附于陰道黏膜上皮表面，并于其表面產(chǎn)生致密的生物膜，對陰道上皮細胞具有較強的細胞毒作用，從而加快了細菌的增殖，導致細菌上行性感染進入羊膜腔，引起絨毛膜羊膜炎的發(fā)生。解脲支原體為女性生殖道的正常菌群，屬于條件致病菌，當機體免疫功能下降時，其可分泌磷脂酶對機體產(chǎn)生破壞，并上行性感染胎膜，引起絨毛膜羊膜炎的發(fā)生；另外解脲支原體可促進機體內(nèi)花生四烯酸轉(zhuǎn)變成前列腺素，進而促進炎癥反應，同時支原體感染后可激活免疫細胞發(fā)生免疫反應，加速胎膜損傷，從而引起絨毛膜羊膜炎的發(fā)生[16]。本研究結(jié)果與Romero等[17]的研究結(jié)果一致。大腸桿菌屬于革蘭陰性桿菌，感染后陰道和宮頸內(nèi)產(chǎn)生大量的蛋白水解酶，水解胎膜細胞外基質(zhì)，使得胎膜的張力下降，導致胎膜破裂，從而引起絨毛膜羊膜炎[18]。本研究結(jié)果與戴小波等[19]的研究結(jié)果一致。

多因素Logistic回歸分析表明B族鏈球菌、陰道加德納菌、大腸埃希菌是絨毛膜羊膜炎的獨立危險因素，說明B族鏈球菌、陰道加德納菌、大腸埃希菌一定程度上影響絨毛膜羊膜炎的發(fā)生。同時本研究樣本數(shù)較少，不能保證所有的絨毛膜羊膜炎孕婦接受檢查。本研究結(jié)果與黃麗娜等[20]的研究結(jié)果一致。

綜上所述，絨毛膜羊膜炎與陰道微生物菌群具有臨床相關性，且B族鏈球菌、陰道加德納菌、大腸埃希菌是絨毛膜羊膜炎發(fā)生的獨立危險因素。