M-CSF、CA153、HPV聯合檢測在宮頸癌早期篩查中的臨床意義

陳遠平，杜 仲，袁 竟，張蘭櫻△，徐云芳

(瀘州市人民醫院：1.醫學檢驗科；2.婦產科，四川瀘州 646000)

宮頸癌是臨床婦科一種常見腫瘤，發生于女性生殖系統，其發病率與病死率均較高[1]。據有關統計，在發展中國家宮頸癌在女性惡性腫瘤的發病率中僅次于乳腺癌，病死率僅次于乳腺癌與肺癌[2]。我國每年新發病例約有10萬，占世界新發病例的1/5[3]。宮頸癌早期篩查可早期發現病例，積極治療，對于提高宮頸癌患者的生活質量及生存時間均具有重要意義。巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)主要存在于骨髓腔內[4]，是一種具有譜系特異性的細胞因子，對于患者單核細胞的增殖、分化具有一定的意義。有研究認為，M-CSF與宮頸癌以及乳腺癌具有顯著相關性[5]。糖類抗原153(CA153)是重要的宮頸癌腫瘤標志物，可以作為術后病情監測指標。人乳頭瘤病毒(HPV)已經被證實為宮頸癌患者重要的病原微生物。本研究將通過對M-CSF、CA153、HPV聯合檢測在宮頸癌早期篩查中的臨床意義進行研究，為臨床診斷與治療提供科學依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 將本院2016年3月至2018年10月收治的120例宮頸癌患者作為宮頸癌組，另選取同期于本院體檢合格者120例作為健康組，不典型增生患者120例作為CIN組。據宮頸癌病理學分級標準(宮頸癌FIGO分期標準)，Ⅰ級患者67例，Ⅱ級患者53例；患者平均年齡為(45.93±7.31)歲；平均體質量指數(BMI)為(23.18±1.39)kg/m2；文化程度：小學及以下患者29例，中學或中專患者31例，大專及以上患者60例；近1年性生活情況存在患者71例；根據HPV亞型致病力大小或致癌危險性大小，HPV高危型患者77例，HPV低危型患者43例。3組研究對象的年齡、BMI、1年性生活狀況、宮內節育器狀況、文化程度之間的比較差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。本研究獲得本院倫理委員會批準，所有研究對象已簽署知情同意書。納入標準：(1)宮頸癌組患者均經過病理診斷，符合宮頸癌及癌前病變規范化診療指南(試行)[6]中關于宮頸癌的診斷標準；(2)宮頸癌組患者均為首次確診為宮頸癌；(3)對照組研究對象的血細胞計數、肝腎功能、血脂等均正常。排除標準：(1)合并妊娠者；(2)入院前3個月內進行過免疫抑制相關治療者；(3)合并其他部位惡性腫瘤或代謝性疾病(如糖尿病等)；(4)入院前進行過放療或化療等。

1.2方法 采集所有研究對象靜脈血4 mL，3 500 r/min離心15 min，取上清液，使用雅培i2000SR全自動化學發光免疫分析儀對其CA153水平進行檢測；采用ELISA檢測M-CSF水平，試劑由上海酶聯生物科技有限公司提供；HPV分型檢測采用PCR+膜雜交法，取保存有宮頸組織標本的細胞保存液使用匯研科創Expure-20全自動核酸提取儀進行核酸提取，取1 μL抽提好的DNA樣品用7500Peal-Time PCR System核酸擴增儀進行PCR擴增，再使用HybriMax醫用核酸分子快速雜交儀對PCR擴增產物進行膜雜交，最后根據顯色對結果進行判斷。所有的操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行。

1.3觀察指標 分別對3組研究對象的M-CSF、CA153、HPV水平進行比較。

2 結 果

2.13組研究對象的M-CSF、CA153、HPV水平比較 宮頸癌組患者的M-CSF、CA153、HPV水平均顯著高于CIN組和健康組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.2宮頸癌疾病與血清M-CSF、CA153、HPV水平相關性比較 宮頸癌疾病與血清M-CSF、CA153、HPV均呈正相關，相關系數分別為0.223、0.334、0.342，且相關性具有統計學意義(P<0.05)。

2.3多因素分析 通過多因素分析，M-CSF、CA153、HPV均為宮頸癌患者的獨立危險因素，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

2.4單獨檢測和聯合檢測效能比較 M-CSF、CA153、HPV聯合檢測的診斷靈敏度高于單獨檢測，通過ROC曲線分析，患者M-CSF、CA153的臨界值分別為485.12 pg/mL和317.62 U/mL。見表4。

表1 3組研究對象的基礎資料比較

表2 3組研究對象的M-CSF、CA153、HPV水平比較

表3 宮頸癌組患者的多因素分析

表4 單獨檢測和聯合檢測效能比較

3 討 論

宮頸癌是臨床常見的女性生殖系統惡性腫瘤，其發病率較高[7]。宮頸癌早期癥狀不明顯，多呈隱匿狀態，多數患者在診斷時已經是宮頸癌中晚期，所以早期診斷對宮頸癌患者的預后具有重要意義[8]。目前，對于宮頸癌患者的診斷多采用宮頸細胞涂片、陰道鏡檢查及宮頸薄層液基細胞學檢查[9]。雖然各種檢查對于患者的診斷具有一定的意義，但是依然有可能造成患者的漏診。

腫瘤標志物是在腫瘤的發生、發展過程中由腫瘤患者的腫瘤細胞分泌以及合成或者是患者正常細胞對腫瘤細胞的反應性物質。在惡性腫瘤患者中，腫瘤標志物檢測具有舉足輕重的作用，同時其檢測過程無創、簡便，易于被患者接受，目前也成為腫瘤診斷的重要依據[10]。但是腫瘤標志物單獨檢測對于患者癌癥的診斷意義較差，所以臨床上多采用聯合診斷方法。有研究報道認為，腫瘤標志物聯合人附睪分泌蛋白4可以顯著提高宮頸癌患者的診斷靈敏度以及特異度，同時對于患者的早期診斷以及治療效果的評價具有積極的意義[11]。本研究中，患者的腫瘤標志物水平顯著高于健康人群。分析認為，相比健康人群，患者的腫瘤標志物水平顯著升高，但是從單一的腫瘤標志物水平的升高，并不能對患者的腫瘤情況進行診斷，需要聯合其他生物學標志物的診斷才對患者具有積極的意義[12]。

在腫瘤細胞的增殖、分化過程中，細胞周期蛋白以及細胞周期蛋白依賴蛋白激酶和抑制蛋白激酶具有重要的調控意義。在患者腫瘤細胞增殖的不同時相，主要表現為細胞周期G1期持續時間的不同。在以往的研究中發現，細胞M-CSF水平可顯著提高患者腫瘤細胞的細胞周期蛋白以及細胞周期蛋白依賴蛋白激酶，進而促進腫瘤細胞的增殖。有研究報道認為，細胞質內較高水平的M-CSF水平可在一定程度上促進腫瘤細胞的增殖[13]。活化P38、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)以及PI3K信號途徑，激活NADPH氧化酶，對于腫瘤細胞的增殖、分化具有一定的意義[14]。本研究分析結果顯示，患者的M-CSF水平顯著高于健康人，提示腫瘤的細胞增殖程度升高，本文與以上研究相互印證。

在以往的研究中已經發現宮頸癌患者的發病與HPV具有顯著的相關性，但是HPV的感染與多種疾病均具有一定的相關性[15-17]。通過對HPV的單獨檢測，對于患者的宮頸癌病變程度并不具有相應的診斷意義，所以本研究通過對3種物質的聯合檢測發現，觀察組患者聯合檢測診斷效能顯著高于對照組。同時通過對其他兩種物質的臨界值分析，在臨床上可作為宮頸癌診斷的依據。

本研究僅僅從患者的診斷進行分析，未能從患者的治療效果以及預后進行分析，有關患者的M-CSF、CA153、HPV的聯合檢測對宮頸癌患者的不同階段以及預后的預測價值，有待在日后的研究中進一步探索。

4 結 論

M-CSF、CA153、HPV聯合檢測對宮頸癌早期篩查具有重要意義，在一定程度上可對患者的宮頸癌病變程度進行早期預測。