上海崇明地區(qū)0～12歲兒童呼吸道病原體抗體檢測(cè)分析*

張 旭，王 寧，周 曄，胡道軍△

(1.上海交通大學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院檢驗(yàn)科,上海 202150； 2.上海崇明區(qū)新河社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心檢驗(yàn)科，上海 202156)

學(xué)齡前兒童呼吸道病原體感染是兒科最常見的疾病之一，往往占到呼吸道感染的80%以上。呼吸道病原體譜檢測(cè)項(xiàng)目主要包括吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、嗜肺軍團(tuán)菌(LP)、肺炎衣原體(CP)、肺炎支原體(MP)、流感病毒A(IVA)、流感病毒B(IVB)、副流感病毒(PIV)等呼吸道病原體IgM抗體。由于其受地區(qū)、性別、年齡、季節(jié)等因素影響較大，因此，調(diào)查各個(gè)地區(qū)兒童該病原體譜的特點(diǎn)顯得尤為重要。本研究主要采用間接免疫熒光法對(duì)上海崇明地區(qū)0～12歲兒童上述8種病原體抗體進(jìn)行檢測(cè)，掌握本地區(qū)兒童呼吸道病原體感染的分子流行病學(xué)特征，為本地區(qū)兒童呼吸道病原體感染臨床診治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 該研究項(xiàng)目經(jīng)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。本研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)為：(1)0～12歲兒童；(2) 2015年4月至2018年11月在新華醫(yī)院崇明分院門診和病房就診患兒；(3)研究病例均為急性呼吸道感染，包括上呼吸道感染、急性支氣管炎、急性毛細(xì)支氣管炎和支氣管肺炎，每個(gè)患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《實(shí)用兒科學(xué)》(第7版)。此次研究共納入病例數(shù)4 272例，包括男2 390例，女1 882例;其中嬰幼兒(≤3歲)2 208例，學(xué)齡前兒童(4～6歲)1 340例，兒童(7～12歲)724例。

1.2呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè) 采取患兒靜脈血1.5～2.0 mL，注入促凝管，4 000 r/m,離心10 min分離血清，應(yīng)用間接免疫熒光法同時(shí)檢測(cè)血清中RSV、ADV、LP、CP、MP、IVA、IVB、PIV 8種常見呼吸道病原體IgM抗體，8項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM 抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司；LEICA DM500型熒光顯微鏡購(gòu)自德國(guó)萊卡公司。嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)置質(zhì)控保證結(jié)果準(zhǔn)確性,為降低人為因素，所有試驗(yàn)均由資深的檢驗(yàn)技術(shù)人員完成。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用率或構(gòu)成比表示，患兒間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)出現(xiàn)如下情況時(shí)，所有的理論數(shù)T≥5并且總樣本量n≥40，用χ2檢驗(yàn)；如果有理論數(shù)T<1或n<40,則用Fisher′s精確檢驗(yàn)法。

2 結(jié) 果

2.14 272 例患兒中8種病原體的檢出情況分析 4 272 例患兒中有939 例8 種呼吸道病原體陽(yáng)性，總陽(yáng)性率為21.98%。2 390 例男性患兒中有450 例(18.83%)陽(yáng)性，1 882 例女性患兒中有489例(25.98%)陽(yáng)性，兩者陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=31.012，P<0.001) 。939 例陽(yáng)性患兒中單種病原體感染773例(82.32%)，2 種及以上病原體混合感染166例(17.68%)，單/混合病原體感染比例為4.66∶1。

2.2呼吸道病原體感染的構(gòu)成 939例感染患兒中MP感染最多，為377例(占40.15%)其次為IVB感染[35.68%(335/939)]。在773例單種病原體感染患兒中MP感染率也最高，為38.42%(297/377)，其次為IVB[27.30%(211/939)]。在166例混合病原體感染患兒中IVB感染率最高為74.70%(124/166)，其次為IAV[60.24%(100/166)]。見表1。

表1 各種病原體感染構(gòu)成和陽(yáng)性率[ n(%)]

2.3呼吸道病原體感染與年齡的關(guān)系 不同年齡段兒童，CP、MP、IVA、IVB、PIV感染率有顯著性差異。幼兒組IVB，MP和IVA陽(yáng)性率最高，分別為IVB(6.52%)、MP(6.07%)、IVA(4.48%)。學(xué)齡前期組則以IVA和IVB 感染為主(6.79%、10.67%)。學(xué)齡期組則以MP和CP感染為主(15.61%、7.04%)。其余病原體多呈散發(fā)感染。見表2。

2.4呼吸道病原體感染與季節(jié)的關(guān)系 春、夏、秋、冬四季的陽(yáng)性率分別為22.45%、19.46%、24.52%、21.05%。本地區(qū)不同季節(jié)的病原體感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，主要表現(xiàn)為CP、IVA和IVB。CP感染率夏秋高于冬春季節(jié)，IVB冬春季節(jié)高于夏秋，IVA感染率秋冬季高于春夏。見表3。

表2 不同年齡段患兒各呼吸道病原體陽(yáng)性率分析

注：-表示此項(xiàng)無(wú)數(shù)據(jù)。

表3 不同季節(jié)呼吸道病原體感染分布特征分析

注：-表示此項(xiàng)無(wú)數(shù)據(jù)。

3 討 論

呼吸道感染是兒科常見病和多發(fā)病，居兒童發(fā)病率首位。該病常見病原微生物包括細(xì)菌、病毒和非典型病原體。常見病原體有MP、IVB、IVA、CP、PIV等，其發(fā)病與季節(jié)、年齡、地域等都有一定的關(guān)系，且呈現(xiàn)不同的流行趨勢(shì)[1-3]。一般認(rèn)為血清特異性IgM 通常在病原體感染發(fā)病后1周左右出現(xiàn)，7～14 d達(dá)高峰，在血清持續(xù)時(shí)間較短，一般為1～3個(gè)月[4-5]。

本地區(qū)4 272 例患兒中總陽(yáng)性率為21.98%，這高于國(guó)內(nèi)深圳地區(qū)陽(yáng)性率(14.55%)[2]。但低于甘肅報(bào)道的(37.60%)和山東(35.75%)，分析原因可能為在這些研究中采用的方法學(xué)和不同地區(qū)所檢測(cè)的病原體不一致[6-9]。目前，呼吸道病原體檢測(cè)方法主要包括培養(yǎng)分離法、血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè)，培養(yǎng)分離法和核酸檢測(cè)靈敏度高，但培養(yǎng)陽(yáng)性率受標(biāo)本采集、運(yùn)送、接種是否及時(shí)等因素的影響；核酸檢測(cè)技術(shù)條件要求嚴(yán)格、成本高，其檢測(cè)通量無(wú)法滿足日益增多的臨床標(biāo)本量[10]。本研究采用間接免疫熒光法檢測(cè)呼吸道病原體IgM抗體，間接免疫熒光法可獨(dú)立同時(shí)檢測(cè)各種病原體IgM抗體而彼此無(wú)干擾，靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、成本低廉，是目前短時(shí)間內(nèi)快速、準(zhǔn)確診斷呼吸道感染的常用方法之一，對(duì)臨床早期診斷具有重要意義[11-12]。

呼吸道病原體感染的939 例患兒中MP感染最多,為377例(40.15%)，與近期研究報(bào)道保持一致[3],其次為IVB感染335例(35.68%) ，提示8項(xiàng)呼吸道病原抗體在呼吸道感染中的病原學(xué)診斷中具有重要的意義。不同呼吸道病原感染差異明顯，其中，MP是呼吸道感染的常見病原菌，其經(jīng)飛沫傳播，容易導(dǎo)致患者上呼吸道感染癥狀，并導(dǎo)致氣管炎、支氣管炎和肺部感染疾病的發(fā)生。

本研究顯示不同年齡段病原體IgM檢出率也不同，分析原因可能由于嬰幼兒的免疫系統(tǒng)發(fā)育還不夠成熟，病原體感染后可因免疫反應(yīng)弱不能有效產(chǎn)生特異性IgM而出現(xiàn)假陰性結(jié)果等。其中IVB最常見于4～6歲患兒，MP最常見于7～12歲患兒，以上結(jié)果提示不同病原體對(duì)不同年齡段的患兒易感性不同，可能與嬰幼兒呼吸道生理結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和機(jī)體免疫力存在關(guān)聯(lián)。

呼吸道病原體流行常有一定的季節(jié)性。本研究顯示秋冬季是本地區(qū)兒童呼吸道病原體的感染高峰期，其次為春夏季。這與文獻(xiàn)[13-16]報(bào)道的最高陽(yáng)性率在冬季或夏季不一致，這可能與上海崇明地區(qū)特有的地理位置有關(guān)，上海崇明島地處長(zhǎng)江口，是中國(guó)第三大島，人口流動(dòng)相對(duì)較少，秋冬季節(jié)氣溫易反復(fù)。本地區(qū)兒童呼吸道病毒不同季節(jié)條件下，表現(xiàn)為CP感染率夏秋高于冬春季節(jié)，IVB冬春季節(jié)高于夏秋，IVA感染率秋冬季高于春夏。

4 結(jié) 論

本次研究結(jié)果提示，在0～12歲患兒呼吸道感染的診斷中，8項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM 抗體能夠?yàn)榕R床診治提供可靠的信息，在輔助診斷和指導(dǎo)抗菌藥物應(yīng)用中具有重要意義。