抗核抗體及抗核抗體譜檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用價值探討

陳良東 江文倩

（江蘇省江陰市人民醫院檢驗科 江蘇 江陰 214400）

臨床診斷自身免疫性疾病的一個重要標志為自身抗體，隨著分子生物學等各種技術水平提高，臨床對自身免疫性疾病相關抗體的研究也不斷深入，自身免疫性疾病確診率也明顯提高[1]。在自身免疫性疾病臨床鑒別診斷中，抗核抗體結果及其熒光模型屬于重要篩選試驗，但因抗核抗體靶抗原包含細胞分裂周期蛋白、細胞骨架、細胞漿以及細胞核等全部細胞及其成分，從理論上來說，如果抗核抗體檢測結果為陰性，那么抗核抗體譜同樣也應該為陰性[2,3]。但在臨床實踐過程中，通常會發現采用間接免疫熒光法對抗核抗體進行初篩時，檢測結果顯示為陰性，但之后采用免疫印跡法對抗核抗體譜進行測定時，結果卻顯示為陽性，這會對自身免疫性疾病的臨床診斷產生極大影響[4]。鑒于此，本研究主要針對自身免疫性疾病中抗核抗體及抗核抗體譜檢測的應用價值進行探討，報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將2019 年1 月—2020 年2 月在我院診治的158 例自身免疫性疾病患者，男性70 例，女性88 例，年齡5～90 歲，平均（59.98±8.88）歲。所有患者均知情同意，且獲得醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

均抽取3～5mL 清晨空腹靜脈血，保持30min 靜置狀態后，按照3000r/min 的速度行10min 離心處理，置于-20℃的冰箱中待檢。采用間接免疫熒光法檢測抗核抗體，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，試劑盒提供方為歐蒙（杭州）醫學實驗診斷有限公司，每次試驗均需設置陽性、陰性對照，檢測結果采用BX43熒光顯微鏡進行觀察（日本生產），所有樣本均以1:80 稀釋，陽性結果判定標準為HP2 細胞和猴肝片中有特異性熒光出現，陽性樣本再按4個滴度進行測定，分別為1:160、1:320、1:640、1:1280最終確定其為陽性樣本的滴度[5]。采用免疫印跡法檢測抗核抗體譜，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，試劑盒提供方為歐蒙醫學實驗診斷股份公司，可用來對AMA M2、核糖體P 蛋白、組蛋白、核小體、dsDNA、PCNA、CENP B、Jo-1、PM-Scl、Scl-70、SS-B、Ro-52、SS-A、Sm、抗-nRNP 等15 種抗體進行測定，測定儀器為EUROBLotOne 全自動免疫印跡儀（德國歐盟生產）。

1.3 觀察指標

分析抗核抗體、抗核抗體譜檢測結果，同時分析兩者聯合檢測的診斷準確率。

1.4 統計學方法

研究中所有數據均納入SPSS 20.0 統計軟件，計量、計數資料分別經t、χ2檢驗，P＜0.05 差異有統計學意義。

2.結果

2.1 抗核抗體測定結果分析

研究共采集158 份血樣，共有18 份抗核抗體測定結果顯示為陽性，陽性率為11.39%，抗核抗體滴度＜1：80、≥1:80 且＜1:160、≥1:160 且＜1:320、≥1:320 且＜1:640、≥1:640且＜1:1280、≥1:1280 陽性分別占0.00%、11.11%、22.22%、38.89%、22.22%、5.56%，見表1。

表1 抗核抗體測定結果分析

2.2 抗核抗體譜測定結果分析

158 份血樣中，共有16 份抗核抗體譜測定結果顯示為陽性，陽性率為10.13%，抗核抗體滴度＜1：80、≥1:80 且＜1:160、≥1:160 且＜1:320、≥1:320 且＜1:640、≥1:640且＜1:1280、≥1:1280 陽性分別占6.25%、6.25%、18.75%、37.50%、25.00%、6.25%，見表2。

表2 抗核抗體譜測定結果分析

2.3 抗核抗體及抗核抗體譜測定結果相關性分析

18 例抗核抗體測定結果為陽性的患者中，5 例抗核抗體譜測定結果顯示為陽性（2 例臨床最終確診自身免疫性疾病），抗核抗體、抗核抗體譜測定結果均為陽性共14 例（13 例臨床最終確診自身免疫性疾病）；抗核抗體測定結果為陽性的18例患者中，15 例最終被確診為自身免疫性疾病，占83.33%；抗核抗體譜測定結果顯示為陽性的16 例患者中，14 例被確診為自身免疫性疾病，占87.50%，抗核抗體、抗核抗體譜測定結果均為陽性的14例患者中，13 例被確診為自身免疫性疾病，確診率為92.86%。

3.討論

臨床上，因自身免疫性疾病的臨床癥狀具有復雜、多樣的特點，且與感染性疾病、其他系統性疾病具有高度相似性，故其臨床診斷存在一定難度[6]。為了改善自身免疫性疾病患者預后，提高患者生活，需做到早發現、早診斷與早治療。自身抗體為自身免疫性疾病的一個重要標志，且每種自身免疫性疾病均有獨特的自身抗體譜[7]。存在于血液中的高效價自身抗體便為自身免疫性疾病的重要特征之一，同時也是臨床確診自身免疫性疾病的一個重要依據。抗核抗體是與自身免疫性疾病關系最為密切的自身抗體，屬于真核細胞細胞膜、細胞質以及細胞核等各種組分自身抗體的總稱，且不同自身免疫性疾病的抗核抗體譜各異。間接免疫熒光法是臨床檢測抗核抗體的金標準，也是臨床應用率較高的一種的自身抗體篩查試驗。抗核抗體常見熒光模式包括細胞質顆粒型、核著絲點型、核膜型、核仁型以及顆粒型等[8]。本次共采集158 份血樣，共有18 份抗核抗體測定結果顯示為陽性，陽性率為11.39%，且18 例陽性中，1:160～1:640 滴度患者居多。免疫印跡法是近年來出現的一項新型檢測技術，具有結果判讀方便、易自動化、快速、操作簡單等優點，可對和自身免疫性疾病相關的多種特異性自身抗體進行同時檢測，并且可長期保存膜條結果。本文中，抗核抗體測定結果為陽性的18 例患者中，15 例最終被確診為自身免疫性疾病，占83.33%，抗核抗體譜測定結果顯示為陽性的16 例患者中，14例被確診為自身免疫性疾病，占87.50%，抗核抗體、抗核抗體譜測定結果均為陽性的14 例患者中，13 例被確診為自身免疫性疾病，確診率為92.86%，提示臨床為提高自身免疫性疾病確診率，可聯合測定抗核抗體與抗核抗體譜。

綜上所述，自身免疫性疾病診斷中，抗核抗體及抗核抗體譜檢測，對自身免疫性疾病的診斷具有重要價值，且兩者聯合檢測具有互補性，可減少臨床誤診或漏診。