陽陵泉埋線對家兔膽囊結(jié)石形成影響的研究*

鄭志祥

江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，江西省南昌市 330006

膽囊結(jié)石的發(fā)病群體主要以成年人為主，并且女性的發(fā)病率高于男性群體，尤其對40歲以上的成年人而言，膽囊結(jié)石的發(fā)病率會隨著年齡的增長逐漸上升。目前結(jié)石主要分為膽固醇結(jié)石與以膽固醇為主的混合性結(jié)石以及黑色結(jié)石為主[1]。針灸治療膽囊疾病的經(jīng)驗十分豐富，《靈樞·邪氣臟腑病形》篇中曾有記載：“膽病者，善太息,口苦……取陽陵泉”，意為患有膽囊方面的疾病，經(jīng)常存在口苦等臨床表現(xiàn)，其治療穴位可選擇陽陵泉穴[2]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對其進行了大量研究，研究結(jié)果證實針刺陽陵泉穴位對患有膽囊疾病患者的膽道系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用。因此按照傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中“合治內(nèi)府”的治療理論，可選擇膽腑下的陽陵泉穴作為治療膽囊結(jié)石的常用穴位[3]。為此，本研究選取28只家兔作為研究材料，展開電刺治療家兔膽囊結(jié)石的研究，旨在探究埋線刺激陽陵泉穴防治膽石癥的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗對象 本研究于2018年9月—2019年8月選取28只由北京海淀區(qū)興隆實驗動物養(yǎng)殖場提供的成年健康大耳白家兔，月齡均3個月，體重(2.1±0.6)kg，雌雄比例為1∶1。實施1周適應(yīng)性喂養(yǎng)后根據(jù)隨機分配的原則分為4組，分別為正常對照組、高膽固醇組、陽陵泉穴埋線組、陽陵泉穴周邊組織埋線組(穴位外3cm)，每組7只。

1.2 方法

1.2.1 埋線:正常對照組喂普通顆粒飼料；高膽固醇組喂以含1.2%膽固醇顆粒飼料；陽陵泉穴埋線組(雙側(cè)陽陵泉穴分別埋入可吸收腸線，每15d重復(fù)埋入)埋線后第1天開始喂以含1.2%膽固醇顆粒飼料；陽陵泉穴周邊組織埋線組(穴位外3cm，非穴位位置)與陽陵泉穴埋線組同天一起埋線，并于埋線后第1天開始喂以含1.2%膽固醇顆粒飼料。動物分籠飼養(yǎng)4周，自由進食飲水。

1.2.2 標(biāo)本收集:實驗動物處死前禁食12h。苯巴妥鈉麻醉，將兔仰臥固定在兔板手術(shù)臺上，碘伏消毒后開腹，解剖出膽囊及膽總管，切除膽囊連同膽囊內(nèi)膽汁一起備檢。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 觀察膽囊結(jié)石：正常膽囊膽汁內(nèi)無結(jié)石形成，結(jié)石判定標(biāo)準(zhǔn)：肉眼觀察膽汁內(nèi)棕黑色、成型顆粒，米粒大小；鏡下見致密大團塊膽固醇結(jié)晶。

1.3.2 分析膽囊內(nèi)膽汁成分：膽固醇、膽汁酸的測定采用酶比色法，磷脂測定采用酶顯色法，以及各組的膽汁成石指數(shù)(iithogenic index，u)，通過Carey表計算。

1.3.3 實施膽囊壁病理組織學(xué)檢查：取相同部位的部分膽囊壁組織，常規(guī)用10%的甲醛固定，脫水，石蠟包埋，切片，蘇木精—伊紅(HE)染色，光鏡觀察。

2 結(jié)果

2.1 各組家兔的結(jié)石形成情況 通過對各組家兔的結(jié)石形成情況分析發(fā)現(xiàn)，高膽固醇組的成石率最高，各組之間的差異較為顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組家兔的結(jié)石形成情況

2.2 各組家兔膽汁內(nèi)膽固醇值的比較 通過對各組家兔膽汁膽固醇進行檢測發(fā)現(xiàn)，高膽固醇組的膽固醇值最高，并且除了正常對照組，陽陵泉埋線組的膽固醇值最接近正常值，各組之間的差異較為顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組家兔膽汁內(nèi)膽固醇值的比較

2.3 各組家兔的膽囊壁病理組織學(xué)檢查 通過對各組家兔的膽囊壁實施病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)：正常對照組并不存在炎細胞浸潤；高膽固醇組的膽囊上皮黏膜變短，并且存在全層壞死改變，此外該組家兔的膽囊上皮存在乳頭水腫以及間質(zhì)內(nèi)炎細胞浸潤情況；陽陵泉埋線組的膽囊黏膜層較為完整，但腔內(nèi)存在分泌物，并且間質(zhì)內(nèi)存在較少的炎細胞浸潤以及纖維結(jié)締組織增生情況；陽陵泉周圍埋線組的膽囊上皮存在乳頭變短以及增粗情況，并且在黏膜上皮的基底層處以及膽囊周圍的疏松組織內(nèi)能夠發(fā)現(xiàn)中性粒細胞浸潤，并且血管腔內(nèi)也可發(fā)現(xiàn)成堆的中性粒細胞。通過對各組家兔實施病理切片觀察和分析發(fā)現(xiàn)，高膽固醇組的炎性反應(yīng)最重，其次為陽陵泉周圍埋線組，第三位陽陵泉埋線組，最輕的為正常對照組。見圖1～4。

圖1 高膽固醇組

圖2 陽陵泉周圍組

圖3 陽陵泉組

圖4 正常對照組

3 討論

膽囊結(jié)石具有全球性以及多發(fā)性的特征，其中該疾病在國內(nèi)的發(fā)病率為7%～10%，并且隨著經(jīng)濟水平的不斷增長，膽囊結(jié)石的發(fā)病率一直呈逐漸上升的趨勢[4]。目前針對膽囊結(jié)石的治療主要以手術(shù)治療為主，雖然治療效果較好，但同時也具有較高的并發(fā)癥發(fā)生率以及手術(shù)風(fēng)險，例如膽源性胰腺炎、急性膽囊炎以及膽囊穿孔等。據(jù)了解，早在公元前2000年針灸便已成為預(yù)防和治療疾病的一種手段，該治療方式是指通過針刺或者艾灸身體穴位的方式，經(jīng)過全身經(jīng)絡(luò)對患者機體的陰陽氣血以及臟腑功能進行調(diào)節(jié)，從而達到治療疾病的目的[5]。并且有學(xué)者的研究資料顯示針灸治療疾病的效果顯著高于藥物治療。穴位埋線治療是指將羊腸線埋入對應(yīng)穴位，并利用羊腸線對穴位實施持續(xù)性的刺激，從而達到治療效果。該治療方案是在針灸留針的基礎(chǔ)上發(fā)展而來，既能夠保持針灸的持續(xù)作用，也可以增強對患者的治療作用。穴位埋線所使用的羊腸線能夠在患者機體中逐漸軟化、分解直至液化吸收，該治療方案對穴位產(chǎn)生的生理和生物化學(xué)刺激的時間長達20d甚至更久，因此穴位埋線不僅能夠彌補針刺時間短的缺點，而且能夠鞏固對患者的治療效果，降低復(fù)發(fā)率。近幾年很少有關(guān)于利用穴位埋線治療膽囊結(jié)石的研究，只有針刺治療的相關(guān)研究。有學(xué)者的研究結(jié)果表示，通過針刺雖然能夠提升患者的膽囊收縮功能，但是在一定程度上對結(jié)石的排出以及治療并沒有顯著的影響，因此本研究通過建立28只家兔模型，并開展膽囊結(jié)石相關(guān)研究的方式探究陽陵泉埋線對膽囊結(jié)石的影響。

本研究結(jié)果顯示，膽固醇高的家兔其結(jié)石的形成率非常高，即高膽固醇組>陽陵泉周圍埋線組>陽陵泉埋線組>正常對照組，并且分析比較4組的膽固醇值發(fā)現(xiàn)高膽固醇組的膽固醇值最高，其中陽陵泉埋線組的膽固醇值最接近正常值，4組之間的差異較為顯著，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。證實膽固醇是判斷和檢測患者是否患有膽囊結(jié)石的關(guān)鍵指標(biāo)之一。此外，本研究結(jié)果表示高膽固醇組的炎性反應(yīng)最高，其次是陽陵泉周圍埋線組，隨后是陽陵泉埋線組以及正常對照組。證明高膽固醇能夠提高膽囊結(jié)石患者的炎性反應(yīng)，從而影響患者的治療效果。本研究通過對部分家兔飼喂高膽固醇飼料的方式建立結(jié)石模型，并探究陽陵泉穴埋線對模型的影響。此外，分析各組膽汁成分也證明對于膽囊結(jié)石患者可以通過刺激陽陵泉穴改變膽汁中黏蛋白的含量，從而達到治療的目的，因此本課題從側(cè)面也為今后的臨床治療提供了一定的參考意義。

綜上所述，陽陵泉埋線能夠在一定程度上降低膽囊結(jié)石疾病的膽固醇值，從而達到減少結(jié)石量的目的，進而在治療膽囊結(jié)石方面起到重要作用，該項研究也為今后的臨床治療提供了一定的參考價值。