PTTG抑制PI3K/AKT信號通路誘導皮膚鱗狀細胞癌細胞凋亡的機制

任永強，李慶華，黃新建，董 麗

皮膚鱗狀細胞癌(簡稱皮膚鱗癌)來源于皮膚的鱗狀上皮組織，是我國常見的皮膚惡性腫瘤之一，好發于老年人，至今病因尚未明確，認為可能與化學致癌劑、慢性炎癥、人乳頭瘤病毒感染等有關[1]。因此，了解皮膚鱗癌的發病機制，尋找其發生過程的關鍵分子，對于其診療具有重要意義。垂體腫瘤轉化基因(pituitary tumor transforming genes, PTTG)是新近發現的一個原癌基因，參與細胞增殖、凋亡、分化及信號轉導等，與腫瘤發生、發展密切相關[2]。有研究表明，PTTG在多種腫瘤組織和細胞中高表達，如食管鱗狀細胞癌、結直腸癌等，其高表達可促進腫瘤細胞增殖[3]。有關皮膚鱗癌中PTTG的研究較少，文獻報道下調PTTG基因表達可明顯抑制皮膚鱗癌細胞的增殖和遷移，下調MMP-2和MMP-9的表達，并在裸鼠移植瘤模型中得到證實[4-5]。PI3K/AKT信號通路是細胞內一條重要的信號途徑，參與細胞增殖、凋亡、侵襲轉移等過程，其激活可促進腫瘤細胞生長[6]。PTTG是否可抑制PI3K/AKT信號通路影響皮膚鱗癌細胞凋亡還未明確。因此，本實驗通過RNA干擾(RNAi)抑制人皮膚鱗癌細胞系A431中PTTG的表達，旨在探討抑制PTTG表達對A431細胞活力、凋亡的影響，并進一步探討對PI3K/AKT信號通路的影響。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器DMEM培養基、胎牛血清(FBS)、青霉素和鏈霉素均購自美國Gibco公司；MTT、DMSO、ROS檢測試劑盒均購自美國Sigma公司；Annexin V-FITC/PI雙染細胞凋亡試劑盒、流式細胞儀均購自美國BD公司；LY294002及PTTG、AKT、p-AKT、Cyclin D1和Bax抗體均購自美國CST公司；酶標儀購自美國Thermo公司。

1.2 細胞培養人皮膚鱗癌細胞系A431購自中國科學院上海細胞庫。……