鼻咽癌患者血清EB病毒抗體表達(dá)及診斷價值研究

陳珊，劉健，姚藝雄

肇慶市第一人民醫(yī)院檢驗科，廣東 肇慶 526020

鼻咽癌在我國屬于常見的一種惡性腫瘤，尤其是在我國南方地區(qū)的廣東省一帶，發(fā)病率極高，因此鼻咽癌又被稱為“廣東癌”[1]。該疾病源于鼻咽部上皮組織，其發(fā)病位置隱蔽，且發(fā)病早期患者體征癥狀不明顯，存在較高的誤診、漏診情況，約75%的患者在鼻咽癌確診時已經(jīng)為中期或中晚期，且其五年生存率僅為30%～45%，嚴(yán)重威脅到患者的生命安全[2-3]。因此，能夠有效進(jìn)行鼻咽癌的早期診斷與早期治療對于控制鼻咽癌的病情發(fā)展具有重要意義。近年來，隨著對惡性腫瘤的研究逐步深入，發(fā)現(xiàn)鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制可能與特殊的環(huán)境因素及遺傳因素有關(guān)，且與EB病毒的感染具有一定的相關(guān)性，在鼻咽癌患者的血清檢測當(dāng)中，絕大多數(shù)患者檢測到抗EB病毒抗原的抗體[4-5]。通過對患者血清EB病毒抗體的檢測可以對鼻咽癌進(jìn)行早期的預(yù)警與篩查，為進(jìn)行鼻咽癌的早期干預(yù)治療提供診斷依據(jù)。本文選我院近年來收治的鼻咽癌和鼻咽部良性疾病患者為研究對象，探討鼻咽癌患者血清EB病毒抗體表達(dá)及診斷價值，為患者臨床診療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月至2019年6月肇慶市第一人民醫(yī)院收治的60例確診為鼻咽癌患者為研究組，并選取同期就診的60例鼻咽部良性疾病患者為對照組。對照組患者中女性27例，男性33例；年齡19～76歲，平均(40.32±7.28)歲；鼻咽炎27例，鼻息肉33例。研究組患者中女性23例，男性37例；年齡23～78歲，平均(43.77±7.93)歲；TNM臨床分期：Ⅰ期7例，Ⅱ期17例，Ⅲ期16例，Ⅳ期20例。兩組患者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均經(jīng)病理診斷確診且未經(jīng)治療；②所有患者資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能異常者；②精神障礙者；③妊娠或哺乳期者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者及其家屬知情并簽署同意書。

1.2 觀察指標(biāo)與檢測方法 比較兩組患者血清EB病毒抗體檢測陽性率。抽取兩組患者清晨空腹肘靜脈血5 mL，置于無抗凝劑的真空管，靜置30 min后使用離心機(jī)器以3 000 r/min的速度常溫狀態(tài)下離心10 min，取其上清液，放置在-80℃冷凍環(huán)境中保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對兩組患者3種EB病毒抗體(VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG)進(jìn)行檢測，檢測試劑盒選自中山生物工程有限公司。使用酶標(biāo)檢測儀(深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司)檢測3種抗體的吸光度值，Cut off=0.10+陰性對照A值均值(A值大于0.1時結(jié)果作廢，重新實驗)。標(biāo)本A值≥Cut off值：患者被判斷為EB病毒抗體陽性；標(biāo)本A值＜Cut off值：患者被判斷為EB病毒抗體陰性。所有實驗均由專業(yè)人員嚴(yán)格按照操作章程、制度進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗；采用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC)分析3種EB病毒抗體對鼻咽癌患者的診斷價值，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清EB病毒抗體檢測陽性率比較 研究組患者血清EB病毒VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗體檢測陽性率均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者血清EB病毒抗體檢測陽性率比較[例(%)]

2.2 三種EB病毒抗體對鼻咽癌患者的診斷效能比較 三種EB病毒抗體聯(lián)合診斷的ROC曲線下面積(AUC)明顯高于VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG單獨(dú)診斷；三種EB病毒抗體聯(lián)合診斷對鼻咽癌患者的靈敏度、特異度、陽性檢測值和陰性檢測值均明顯高于VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG單獨(dú)診斷，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 三種EB病毒抗體對鼻咽癌患者的診斷效能比較(%)

3 討論

近年來，鼻咽癌的發(fā)病率逐年升高，尤其在我國南方地區(qū)，發(fā)病率更是居高不下，其發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，而醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為，鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制與患者的環(huán)境、遺傳、EB病毒感染息息相關(guān)[6-7]。研究表明，患者EB病毒長期反復(fù)感染會導(dǎo)致其鼻咽部上皮永生化，并且進(jìn)一步導(dǎo)致鼻咽部位的惡化[8]。EB病毒在進(jìn)入患者機(jī)體的鼻咽部上皮細(xì)胞內(nèi)長期潛伏增殖，一旦患者惡性腫瘤病發(fā)導(dǎo)致其免疫功能下降或紊亂，潛伏在上皮組織細(xì)胞的EB病毒就會活化并且進(jìn)一步引發(fā)感染，從而使得患者機(jī)體做出應(yīng)對反應(yīng)，產(chǎn)生VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG等抗體[9-10]。因此，針對EB病毒這一情況，對患者血清進(jìn)行病毒抗體檢測，有助于其鼻咽癌病情的早期診斷，并對其及時的治療與干預(yù)起積極作用。

本研究采用ELISA法對60例鼻咽癌患者和60例鼻咽部良性疾病患者的三種EB病毒抗體進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果顯示，鼻咽癌患者血清中VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG等EB病毒抗體的陽性率明顯高于鼻咽部良性疾病的患者，說明VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG這三種EB病毒抗體能夠?qū)Ρ茄拾┑臋z測起到輔助診斷的作用，是十分重要的血清診斷標(biāo)志物。鼻咽癌患者通常在出現(xiàn)臨床癥狀3年前左右會出現(xiàn)EB病毒抗體的持續(xù)升高并能夠通過儀器檢測[11-12]。有研究表明，對鼻咽癌患者予以有效治療或手術(shù)，可使其血清中VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG等EB病毒抗體的陽性率明顯下降；而鼻咽癌良性疾病患者或健康者血清VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG等EB病毒抗體呈陽性，將明顯增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險。所以，對鼻咽癌高發(fā)區(qū)人群進(jìn)行VCA-IgA、EA-IgA、EA-IgG等EB病毒相關(guān)抗體篩查，對于鼻咽癌的早期診斷與干預(yù)治療具有重要意義。

在3種EB病毒抗體診斷鼻咽癌中，VCA-IgA是臨床篩查鼻咽癌的經(jīng)典指標(biāo)，但在其檢測中所表現(xiàn)出的高靈敏度存在假陽性的可能，需要在長期臨床實踐中驗證其可靠性，但陽性患者出現(xiàn)鼻咽癌的概率不到十分之一，所以進(jìn)行診斷排除陽性患者的患病率仍需要進(jìn)行大量的實踐工作，并且在排查中對患者經(jīng)濟(jì)造成較大壓力[13-14]。EA-IgA單一診斷鼻咽癌患者的靈敏度低，在正常人體中基本不會被查出，而鼻咽癌患者抗體滴度低于1.5時也難以顯示陽性，因此EA-IgA單一診斷鼻咽癌可能存在漏診的情況[15-16]。診斷使用EA-IgG抗體檢測效果相對較好，具有較高的特異性，但EA-IgG陽性檢測值較低。由檢查結(jié)果可以得知，VCA-IgA診斷鼻咽癌的靈敏度顯著高于EA-IgA、EA-IgG，但其特異度和準(zhǔn)確度均明顯低于EA-IgA、EA-IgG；采用單一病毒抗體指標(biāo)進(jìn)行診斷時，各指標(biāo)陽性檢測值均達(dá)不到50%，使用3種EB病毒抗體聯(lián)合診斷時，陽性預(yù)測值可升高至82.64%，AUC也增高至0.943，提升效果十分明顯，說明采用三種病毒抗體聯(lián)合檢測能夠有效的提高診斷準(zhǔn)確度，彌補(bǔ)單一指標(biāo)檢測的不足，能夠為鼻咽癌患者的診斷提供可靠依據(jù)，三種EB病毒抗體聯(lián)合診斷的臨床應(yīng)用價值高，對于鼻咽癌患者的早期診斷和干預(yù)治療意義重大[17-18]。

綜上所述，與鼻咽部良性疾病患者相比，鼻咽癌患者血清EB病毒VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗體檢測陽性率均較高。VCA-IgA、EA-IgA及EA-IgG抗體均可以有效篩查鼻咽癌患者，而三種EB病毒抗體聯(lián)合診斷可以有效提高患者診斷的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度，有利于患者早期診斷、療效判定及預(yù)后判斷，為患者及時制定個性化治療方案，進(jìn)而提高鼻咽癌治愈率和患者生存時間。