血清淀粉樣蛋白A、C反應(yīng)蛋白熒光免疫層析聯(lián)合檢測方法的建立①

賀 沁 周春峰 王云龍 明 亮 李玉林 曹繼宗

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，鄭州 450052)

感染性疾病是威脅人類健康的重要病因之一，臨床常以C反應(yīng)蛋白(C-reaction protein，CRP)和血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)作為早期診斷感染性疾病的檢測指標(biāo)。CRP和SAA是反映早期炎癥的敏感指標(biāo)，當(dāng)機(jī)體發(fā)生細(xì)菌感染時，二者含量顯著升高；而在病毒感染早期，SAA顯著升高，CRP不升高或僅小幅升高[1,2]。因此，SAA與CRP聯(lián)合檢測有利于早期鑒別細(xì)菌或病毒感染，為臨床用藥提供參考[3,4]。目前，臨床上針對SAA、CRP檢測主要是化學(xué)發(fā)光和免疫比濁法，這些方法主要適用于擁有相對完善檢驗設(shè)備的大中型醫(yī)院，不適用基層或社區(qū)醫(yī)療機(jī)構(gòu)床旁快速檢測，限制了其臨床應(yīng)用。

本研究旨在利用熒光免疫層析技術(shù)建立一種可同時聯(lián)合定量檢測血清中CRP、SAA的檢測方法，既滿足社區(qū)基層醫(yī)院常規(guī)檢測的需求，又可提高鑒別細(xì)菌、病毒感染的準(zhǔn)確度，節(jié)省檢測時間，指導(dǎo)患者合理用藥，為感染性疾病的早期篩查提供了一種便捷、準(zhǔn)確的檢測方法。

1 材料與方法

1.1材料 Eu3+羧基熒光微球購自上海微測生物科技有限公司；鼠抗兔IgG單克隆抗體、CRP配對單克隆抗體、SAA配對單克隆抗體、硝酸纖維素膜、PVC板、玻璃纖維素膜、吸水紙、CRP、SAA線性質(zhì)控品，精密性質(zhì)控品均由河南省生物工程技術(shù)研究中心提供。N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)購自南京化學(xué)試劑股份有限公司。三維點膜噴金儀、自動斬切機(jī)購自上海金標(biāo)生物；熒光定量分析儀購自杭州峰航科技有限公司；……