VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1聯合檢測對早期胰腺癌臨床診斷價值研究*

宋亞邛，胡海燕

齊齊哈爾醫學院附屬第一醫院(齊齊哈爾 161041)

胰腺癌屬于臨床上較為常見的消化系統惡性腫瘤之一，具有發病率高、病情進展迅速、病死率高以及預后不良等特點，患者5年存活率低于5%，是嚴重威脅人類生命健康安全的重大疾病之一[1]。該病在發病早期具有較強的隱匿性，臨床漏診率達39%～70%，絕大部分患者一經確診便已是中晚期，喪失了手術根治的最佳時機，從而對其生存質量造成顯著影響[2]。隨著近年來相關研究的逐漸深入，不少的學者發現，針對胰腺癌患者，若能早期確診并實施積極有效的治療，可在一定程度上提高患者的5年存活率[3]。由此可知，尋找一種合理有效的診斷手段對提高胰腺癌的早期診斷率和延長生存期具有重要的意義[4]。血清腫瘤標志物檢測是目前臨床上廣泛用以檢查多種惡性腫瘤的無創手段之一，且在胰腺癌的診斷與預后方面得到廣泛的應用。然而，通過單一腫瘤標志物的檢測進行胰腺癌的診斷存在一定的局限性，而聯合多項腫瘤標志物可明顯提高診斷準確率[5]。鑒于此，本文通過研究血管內皮生長因子(VEGF)、轉化生長因子-β1(TGF-β1)、糖抗原19-9(CA19-9)、糖抗原242(CA242)和分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)聯合檢查對早期胰腺癌患者的臨床診斷價值，旨在為臨床胰腺癌的早期診斷、治療提供參考依據。

資料與方法

1 一般資料 選取我院從2016年2月至2019年2月收治的胰腺癌患者60例作為病變組。其中，男34例，女26例，年齡29～78歲，平均年齡(56.29±10.73)歲；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期37例；腫瘤直徑：<5 cm者29例，≥5 cm者31例；文化程度：初中或初中以下24例，高中或高中以上36例。病例納入標準[6]：①所有胰腺癌患者均經影像學檢查以及手術病理組織活檢確診；②年齡≥18周歲；③入院前尚未接受化療、放療等抗腫瘤治療；④無臨床病歷資料缺失。排除標準：①伴有其他惡性腫瘤者；②心、肝、腎等重要臟器發生病變者；③意識模糊或伴有精神疾病者；④正參與其他研究者。另選取我院同期收治的胰腺炎患者60例作為對照組。其中，男33例，女27例，年齡30～77歲，平均年齡(56.82±10.55)歲；文化程度：初中或初中以下22例，高中或高中以上38例。病例納入標準：①均經影像學及手術病理組織活檢確診為胰腺炎；②年齡≥18周歲；③無重要臟器功能障礙；④均可正常交流溝通。排除標準：①合并其他惡性腫瘤者；②意識障礙或伴有精神疾病者；③正參與其他研究者。兩組患者年齡、性別等指標比較，差異無統計學意義(P>0.05)，均衡可比。此外，本研究已獲得研究對象同意，并得到醫院倫理委員會批準。

2 研究方法

2.1 血清標本采集和處理：患者入院后分別采集清晨空腹肘靜脈血5 ml，以3000 r/min作為離心條件，進行時長為10 min的離心處理，取血清保存于-80℃冰箱中備用。

2.2 血清學指標水平檢測：VEGF水平檢測采用酶聯免疫吸附法進行，使用儀器為ELISA酶標儀(購自北京普天新橋技術有限公司)，具體操作以購自武漢博士德生物科技有限公司的相關試劑盒說明書進行。TGF-β1水平檢測通過放射免疫分析法實現，使用儀器為M240172型放射免疫分析儀(購自西化儀科技有限公司)，具體操作嚴格遵從購自武漢博士德生物科技有限公司的相關試劑盒說明書進行。CA19-9、CA242水平檢測通過Beckman Cpulter公司所提供的DXI800型化學發光儀以及相關試劑盒(購自Roche公司)進行。DKK1水平檢測主要是通過DNM-9202G酶聯分析儀(購自北京普朗公司)和相關酶聯免疫試劑盒(購自上海撫生公司)進行檢測，相關操作遵從儀器和試劑盒說明書進行。

3 觀察指標 比較兩組血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平，血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1單獨檢測及聯合檢測診斷胰腺癌的結果，分析血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平與胰腺癌患者病理特征的關系。VEGF≥150 ng/L即為陽性；TGF-β1≥15 μg/L即為陽性；CA19-9≥35 U/ml即為陽性；CA242≥20 U/ml即為陽性；DKK1≥2.0 ng/ml即為陽性。

結 果

1 兩組血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平對比 病變組及對照組在血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平方面對比，前者高于后者(均P<0.05)，見表1。

表1兩組血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平對比

2 血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1單獨檢測及聯合檢測診斷胰腺癌的結果對比 血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1聯合檢測診斷胰腺癌的靈敏度、特異度、準確度分別為95.00%、91.67%、93.33%，相較于上述各項血清學指標單獨檢測明顯更高(均P<0.05)，見表2。

3 血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平與胰腺癌患者病理特征的關系 腫瘤分期為Ⅲ-Ⅳ期的胰腺癌患者血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242、DKK1水平相較于Ⅰ-Ⅱ期患者更高(均P<0.05)，見表3。

表2血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1單獨檢測及聯合檢測診斷胰腺癌的結果對比

注：采用確切概率法進行比較

表3血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平與胰腺癌患者病理特征的關系

注：與Ⅰ-Ⅱ期相比，*P<0.05

討 論

近年來手術切除率的不斷提高和治療方式的多樣化有利于降低胰腺癌患者的并發癥發生風險，顯著提高患者的存活率[7-8]。然而，由于胰腺癌的臨床表現隱匿，一經發現往往已到了中晚期，無法實施手術切除，而放化療的效果并不理想，因此早期有效的診治是有效提高胰腺癌治療效果以及改善預后的重中之重[9-10]。腫瘤標志物指在惡性腫瘤的發生、發展過程中通過腫瘤細胞基因表達而合成分泌，可反映腫瘤生長狀況的一類物質。VEGF主要通過促進腫瘤血管形成，繼而在腫瘤發生、進展過程中發揮重要作用[11-12]。CA19-9與CA242是目前頗受臨床以及科研工作人員所關注的一種胰腺癌較為敏感的腫瘤標志物。TGF-β1主要通過在轉錄時以及轉錄后對原癌基因C-myc表達產生抑制，進一步在腫瘤的發生、發展過程中起著至關重要的作用[13-14]。DKK1屬于重要的分泌型糖蛋白，在不同腫瘤中的表達水平存在差異，如在胃腸道腫瘤、乳腺癌以及神經膠質瘤等腫瘤中表達下降或缺失，但在肺癌以及肝癌等腫瘤中表達顯著升高。

本研究發現，病變組及對照組在血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平方面對比，前者高于后者。邢瑞青等人的研究報道表明，胰腺癌組血清VEGF、CA19-9水平顯著高于胰腺良性病變組[15]。而陳守慶等人的研究報道發現，胰腺癌組血清CA19-9、CA242和DKK1水平均明顯高于胰腺良性疾病組以及健康對照組[16]。三項研究基本相符，提示了血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1在胰腺癌中存在明顯高表達，可能參與了胰腺癌的發生、發展過程。VEGF是迄今為止臨床上所發現的特異性最高、作用最顯著的促血管生長因子，可誘導實體瘤組織血管形成，繼而導致瘤細胞迅速增殖；TGF-β1可能具有腫瘤抑制因子的作用，然而隨著腫瘤的不斷發展，腫瘤細胞會擺脫TGF-β1的抑制，甚至在TGF-β1的刺激下快速生長，刺激了血管生成以及細胞播散；CA19-9是目前文獻報道對胰腺癌敏感度最高的最有價值的腫瘤標志物，其雖可在其他腫瘤中出現異常升高，但水平遠遠遜色于胰腺癌；CA242主要存在于胰腺癌以及結腸癌細胞中，是診斷胰腺癌的特異性指標之一；DKK1可通過和Wnt受體LRP5/6以及另一種穿膜蛋白Kremen1/2相結合，繼而形成三聚體，促進細胞內吞，從而導致細胞膜上的LRP5/6降低，發揮阻斷Wnt信號胞內傳遞的作用，從而參與腫瘤的發生、發展[17-19]。此外，血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1聯合檢測診斷胰腺癌的靈敏度、特異度、準確度分別為95.00%、91.67%、93.33%，相較于上述各項血清學指標單獨檢測明顯更高。黃媛等人的研究顯示，血清CA19-9、CA125、CEA、CYFRA21-1、CA15-3和Galectin-3聯合檢測應用于胰腺癌的診斷效能明顯高于上述各項指標單獨檢測[20]。這也與本研究相似，提示了在臨床工作中可通過聯合檢測上述指標水平為早期胰腺癌的診斷提供參考依據。究其原因，筆者認為可能與上述各項指標在診斷胰腺癌過程中具有協同互補作用有關。另外，腫瘤分期為Ⅲ-Ⅳ期胰腺癌患者血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平相較于Ⅰ-Ⅱ期患者更高，其主要原因可能在于腫瘤分期的不斷提高反映了患者病情的不斷加劇。

綜上所述，血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平在胰腺癌中均存在明顯高表達，聯合檢查上述各項指標水平可提高早期胰腺癌診斷的靈敏度、特異度、準確度，有利于臨床判斷胰腺癌患者的病情嚴重程度，具有較高的臨床應用價值。