色甘萘甲那敏鼻噴霧劑治療急性非化膿性中耳炎療效及對患者血清miR-203a和miR-155的影響

王瑤君，王 巖

錦州醫科大學附屬第三醫院(錦州121000)

急性非化膿性中耳炎好發于冬春季，多由上呼吸道感染引起，其臨床表現有耳痛、耳漏、鼓膜穿孔和聽力下降等，部分患者的治療較為困難。病變形成過程中內環境可出現多種改變，如炎性失平衡、免疫失平衡等[1]。近年研究顯示，小RNA在病變形成中起重要的調節作用，可能是調節炎癥反應及免疫性反應的重要介質[2]。miR-203a和miR-155被認為與頭頸部的炎癥反應有關,對調控局部和全身的炎癥級聯反應有重要作用[3]。色甘萘甲那敏鼻噴霧劑(順妥敏)是新型鼻腔黏膜減充血劑，抑制組織肥大細胞脫顆粒來阻止組胺、白三烯、前列腺素等的釋放，從而阻斷致敏物質對組織細胞造成的影響。因此，它可以調節機體的炎癥反應和免疫性反應，減輕癥狀。本研究在常規性治療的基礎上加用順妥敏注射液對我院收治的急性非化膿性中耳炎患者進行治療和對照觀察，并關注其對血清中miR-203a和miR-155的影響。

資料和方法

1 一般資料 選擇2018年6月至2018年12月在我院確診的急性非化膿性中耳炎患者作為研究對象，共102例，年齡在7～63歲，平均年齡(23.6±6.5)歲，其中男52例，女50例。依隨機原則將患者分為觀察組和對照組。觀察組共51例，年齡在7～63歲，平均年齡為(23.8±7.2)歲，其中男25例，女26例。對照組共51例，年齡在7～62歲，平均年齡為(23.4±6.3)歲，其中男27例，女24例。兩組在性別、年齡方面比較無統計學差異。本研究經本院倫理委員會審批，患者或家屬簽定知情同意書。病例納入標準：①存在一定程度耳痛、聽力下降、鼓膜充血(可合并穿孔)、發熱等癥狀體征；②病程小于3 d，首次就診之前未經治療；③年齡在7歲以上。排除標準：①急性化膿性中耳炎伴并發癥、慢性中耳炎急性發作、中耳膽脂瘤感染急性發作、鼻咽部腫瘤占位、重度感音神經聾；②伴有腭裂、先天性中耳和內耳畸形；③其他嚴重基礎疾病。

2 治療方法 兩組患者均口服抗菌藥物和桉檸蒎腸溶軟膠囊。對照組加用生理性海水噴鼻，每次每側鼻孔1噴，每日3次，兩次間隔時間為4 h以上。觀察組加用順妥敏噴鼻，每次每側鼻孔1噴，每日3次，兩次間隔時間為4 h以上。

3 療效評價 于治療第7天結束時，應用急性中耳炎(療效)量化評分表進行評價，見表1。分數范圍為0～15分，得分越高表示癥狀越重。

表1急性中耳炎(療效)量化評分表

4 miR-203a和miR-155的檢測 于治療前、治療7 d后(第8天早晨)抽取患者空腹靜脈血3 ml，2000 r/min 離心后提取血漿中的miRNA。在miR Base數據庫(www.mirbase.org)中獲得相關miRNA的成熟序列并設計對應的引物，由蘇州睿贏生物技術公司合成引物，相關試劑購自美國ABI公司，應用美國Bio-Rad公司的熒光定量PCR基因擴增儀CXF96完成實驗。應用PCR系統中的軟件得到各樣本中miR-203a和miR-155的Ct值。U6的拷貝數作為基數校正miRNA結果，用miRNA的Ct值減去患者同種miRNA樣本中U6的Ct值計為樣本中miR-203a和miR-155的ΔCt值，ΔΔCt=待測樣品中目的基因ΔCt-參照樣品中目的基因ΔCt。計算樣本中miR-203a和miR-155的確切表達量，即2-ΔΔCt。見表2、3。

表2引物設計

表3擴增程序的設定

結 果

1 兩組治療前后療效評分變化比較 兩組治療前療效的量化評分無統計學差異，治療后兩組療效量化評分均下降，但是觀察組的下降高于對照組，見表4。

表4兩組治療前、治療后療效量化評分比較(分)

注：與治療前比較，*P<0.05

2 兩組治療前后血清中miR-203a和miR-155變化比較 兩組治療前血清中miR-203a和miR-155的表達差異無統計學意義。治療后兩組患者血清中miR-203a和miR-155的表達均下降，但是觀察組miR-203a和miR-155的下降值明顯高于對照組。見表5。

表5兩組治療前后血清中miR-203a和miR-155下降值比較(灰度值)

注：與治療前比較，*P<0.05

討 論

急性非化膿性中耳炎臨床較為常見，其發生機制為：上呼吸道病毒感染引起呼吸黏膜腫脹，包括鼻腔和咽鼓管，進而導致咽鼓管阻塞，中耳負壓形成。如果時間過長，鼻咽部潛在的病原將被吸入中耳腔。由于咽鼓管易發生阻塞，導致感染引起的中耳滲出物的清除能力下降，使液體聚集于中耳內。感染途徑主要是經外耳道鼓膜途徑，血行感染也較為常見。研究顯示感染途徑的形成與機體的免疫反應有關[4-5]。臨床治療以綜合治療為主，應用抗菌藥物是主要的治療方法。鼻腔減充血劑作用在鼻咽部，能使鼻咽黏膜充血水腫減輕，使咽鼓管的功能恢復。順妥敏作為新型鼻噴劑，有鼻腔減充血作用及抗變態反應功效[6-7]。順妥敏還含有兩種抗變態反應的成分，使其在應用中可以抑制變態反應的發生。動物實驗中發現，順妥敏在應用過程中對大鼠鼻黏膜損害小，且效果理想[8]。

本研究結果顯示，順妥敏治療急性非化膿性中耳炎的療效明顯，臨床中可以及時應用。順妥敏的成分中有馬來酸氯苯那敏、色甘酸鈉、鹽酸萘甲唑啉等，具有抗過敏、抗炎和減輕鼻內充血的作用。色甘酸鈉為肥大細胞穩定劑，可以有效抑制炎癥介質的釋放，減少組胺、前列腺素的生成，阻斷致敏物質對組織細胞造成的影響。鹽酸萘甲唑啉屬于擬腎上腺素藥物，可以收縮黏膜血管，興奮黏膜、間質血管平滑肌，從而迅速解除鼻塞。長期大劑量使用鹽酸萘甲唑啉會產生藥物依賴，單純的鹽酸萘甲唑啉噴鼻劑的含量為0.1%，而順妥敏中鹽酸萘甲唑啉的含量為0.025%，降低了產生耐藥的風險。馬來酸氯苯那敏屬于第一代抗組胺藥物，可通過拮抗組胺H1受體來控制過敏性炎癥的發生，從而起到抗過敏的作用。噴鼻藥物主要沉積在鼻腔前部，加入減充血劑可減輕鼻黏膜腫脹，提升鼻用藥物的鼻腔分布范圍(可達上鼻甲部)，增加了抗炎效果[9-10]。本研究結果顯示，應用順妥敏治療后血清中miR-203a和miR-155的表達均下降，但是觀察組的下降值明顯高于對照組，提示順妥敏的效果良好，可以優化內體內環境中miR-203a和miR-155的表達，減少由兩者引發的內環境功能失調。既往研究認為，miR-203a和miR-155與炎癥反應和免疫反應有關。研究顯示miRNA能夠對轉錄后水平的基因翻譯進行有效抑制，進而對靶miRNA進行降解，對靶基因生物學功能產生影響[11]。miR-203a和miR-155具有相似的調控位點，兩者可能還具有協同作用。miR-203a對各種通路的調控作用可能更強，如對IL-6和IL-23等炎性相關因子及免疫相關因子的調節作用[12-13]。順妥敏應用時可選擇性抑制血小板合成與釋放血栓素A2等，具有擴張血管、改善微微循環的作用[14]。由于miR-203a在細胞增殖方面也有調節作用，因此順妥敏在miR-203a下調后也可以減少局部組織細胞的增殖。

總之，順妥敏對急性非化膿性中耳炎患者的療效明顯，且能有效下調血清中miR-203a和miR-155的含量，減少炎性刺激因素的生成，對優化內環境有一定作用。