冬凌草化學成分及藥理作用研究進展

張婉晴，夏小婧

（信陽職業技術學院藥學院，河南 信陽 464000）

關鍵字：冬凌草；化學成分；藥理作用；研究進展

冬凌草，系唇形科香茶菜屬植物碎米椏（Rabdosia rubescens（Hemsl.）Hara）的干燥地上部分，半灌木，以草質部分入藥，主要用于咽喉腫痛、有清熱解毒、消炎止痛、健胃活血等，主要用于咽喉腫痛、扁桃腺炎、蛇蟲咬傷等癥[1]。國內外研究發現，冬凌草中含有二萜類、單萜類及揮發油類、生物堿及黃酮類等化合物，具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、免疫增強等藥理作用[2]。在臨床上對食管癌、賁門癌、肝癌、乳腺癌等多種癌癥有療效。本文主要介紹近十年來冬凌草的化學及藥理研究進展，為該植物的進一步研究做參考。

1 化學成分研究

對冬凌草化學成分的研究在不斷深入，近年來已明確冬凌草抗癌提取物中冬凌草甲素和冬凌草乙素為主要有效成分。一般用含水乙醇、含水丙酮等溶劑提取，然后用不同溶劑萃取后用Diaion HP-20，Touopearl HW-40，Silica Gel，大孔吸附樹脂等層析柱細分。研究發現冬凌草的二萜類次生代謝成分結構復雜多變，不同產地區域所產的冬凌草化學成分極為相似，主要活性成分也相同，頗具開發價值。

1.1 二萜類

為冬凌草的主要活性成分，主要骨架構包括對映貝殼杉烷型和螺斷貝殼杉烷型，對映-貝殼杉烷二萜是一類有顯著抗癌活性的天然化合物。其中對映貝殼杉烷型包括：冬凌草甲素、冬凌草乙素、冬凌草丙素、冬凌草丁素、冬凌草戊素、牛尾草甲素、牛尾草乙素、牛尾草丙素等；螺斷貝殼杉烷型包括：盧氏冬凌草甲素、盧氏冬凌草乙素、貴州冬凌草素等[3-4]。

劉旭等[5]從湖北建始縣產冬凌草中共分離得到了91個二萜化合物，得到了47個新的二萜。細胞毒活性篩選的結果表明，含量較少的新化合物并不具有細胞毒活性，而含量較高的已知成分很多具有較好的活性。

謝瑞杰[6]把河南輝縣產冬凌草用丙酮水混合溶劑常溫浸泡提取，乙酸乙酯萃取，分離鑒定了14個二萜類化合物，其中兩個為2個新的化合物，分別命名為：rubescrystal A，rubescrystal B。劉建群等[7]從輝縣產冬凌草的石油醚和乙酸乙酯部位分離得到4個二萜化合物，其中癭花香茶菜素甲首次從冬凌草中分離得到。舒佳為等[8]從巴東冬凌草乙酸乙酯部位，分離出6個二萜類成分，其中neolaxiflorin U、hubeirubesin K、hubeirubesin、epinodosinol首次從該地區的植物中分離得到。

1.2 生物堿和其他含N類化合物

馮衛生等[9]用70%丙酮提取冬凌草地上部分，乙醚、乙酸乙酯、正丁醇分別萃取，利用大孔吸附樹脂色譜進行分離純化，對正丁醇部位從分離得到3個含N化合物：冬凌草堿，黃嘌呤，7-羥基-4（1H）-喹啉酮，其中冬凌草堿是一新生物堿。

吳兆華等[10]把冬凌草95%乙醇提取，正丁醇萃取部位分離一個新苯丙醇酯新化合物：2-氨基-3-苯丙基2-苯甲酰氨基 -3-利膽醇酯。

此外還分離得到：aurantiamide acetate、N-（2-氨甲酰基-苯基） -2-羥基苯甲酰胺-5-O-β-D-阿洛糖，2’ -乙酰氨基-3’ -苯基丙基-2-苯甲酰氨基-3-苯基丙酸酯[11]、4-乙酰氨基丁酸[12]。

1.3 黃酮類

劉凈等[12]80%乙醇回流提取，依次用不同溶劑萃取后，在乙酸乙酯部位和正丁醇部位分離出10個化合物，其中黃酮類有5，8，4’ -三羥基-6，7，3’-三甲氧基黃酮，苜蓿素，胡麻素。

宋軍發等[13]從冬凌草的乙酸乙酯部位分離出7個化合物，其中5-羥基-3’，4’6，7-四甲氧基黃酮，5-羥基-3‘4‘7-三甲氧基黃酮，4’，5，7-三甲氧基黃酮均為首次從該植物中分得。

此外，還分離得到：5，4’ -二羥基-6，7，8，3’-四甲氧基黃酮，槲皮素[11]，線薊素[14]。

1.4 三萜類、甾體類成

盧海英等[15]85%乙醇回流提取，從石油醚部分和乙酸乙酯部分分離并鑒定4個三萜類化合物，分別是α-香樹脂醇，β-香樹脂醇，2β-羥基齊墩酸，2α-羥基烏索酸。

李珊珊等[16]經甲醇回流提取，乙酸乙酯萃取，從中分離鑒定了6個化合物，其中betulin、betulinic acid為首次從冬凌草中得到的三萜類化合物，另外rabdosianin A、parvifoline為首次分離得到的二萜類成分。

此外，還分離得到4ζ-甲基-5α-羊毛甾烷-25-酮[7]，胡蘿卜苷，木栓酮[12]。

1.5 單萜及揮發油

冬凌草的莖葉的精油中主要含有α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯等單萜和倍半萜類化合物，壬醛、癸醛、原兒茶醛、棕櫚酸等小分子脂肪族化合物，以及正三十三烷[17]等長鏈烴。

唐倩囡等[18]用GC-MS技術對鶴壁冬凌草揮發油成分進行了研究，共鑒定49個化合物，主要成分為棕櫚酸甲酯、棕櫚酸乙酯、亞油酸乙酯、異戊酸香葉酯等。

李高申等[19]對濟源地區43種野生冬凌草揮發性成分的種類和相對含量分析，石竹烯、石竹烯氧化物、二氫獼猴桃內脂、植酮和百秋李醇在多種不同品系野生冬凌草的揮發性成分中存在，且為主要成分。

1.6 糖類成分

目前，分離得到enmenol-lα-O-β-D-glucoside，葡萄糖，α-D-呋喃果糖[3]，芹菜素-6，8-二 -C-β-D-葡萄糖苷[6]，山奈酚 -3，7-O-α-L-二鼠李糖苷[12]等。

1.7 有機酸類及其他類

盧海英等[11]從冬凌草85%乙醇提取，不同溶劑萃取，在氯仿部位和乙酸乙酯部位分離得到11種化合物，分離到的有機酸有香草酸、阿魏酸、咖啡酸。此外，還分離得到1，5-二-（3，4-二羥基苯基）-乙烯醚，3-（3，4-二羥基苯基）-2-異丙氧基-丙酸，鄰苯二甲酸雙-（2-乙基己基）酯[6]，二十七酸[7]、丁二酸[10]1藥理作用

1.8 抗腫瘤作用

研究表明冬凌草甲素和冬凌草乙素是冬凌草的主要抗癌活性成分，此外一些多糖類物質也具有抗腫瘤活性。且體外實驗研究發現冬凌草對前列腺癌、肺癌、白血病、乳腺癌等多種腫瘤的生長有抑制作用[20]。高世勇等[21]總結了2013年以前冬凌草抗腫瘤作用進展，但該方面研究發展迅速，現總結如下。

冬凌草甲素聯合吉西他濱對胰腺癌SW1990細胞抑制作用顯著[22]，冬凌草甲素 8-16μmol／L體外顯著抑制H929細胞增殖，并與濃度及時間呈正相關，TUNEL染色法檢出細胞核固縮、核碎裂；流式細胞術顯示，H929細胞凋亡率呈濃度依賴性遞增，pro-caspase-3、BCL-2、p-PI3K、p-Akt表達呈濃度依賴性遞減[23]。

冬凌草甲素處理后NK-92 MI在不同效靶比均可提高對THP1細胞的殺傷效率，冬凌草甲素可上調THP1細胞表面 MICB、ULBP1和 ULBP2表達，同時增加效靶細胞共培養上清中IFN-γ和TNF-β釋放，而對MICA、ULBP3表達及 TNF-α釋放無明顯影響[24]。

冬凌草甲素通過抑制乳腺癌細胞的增殖和侵襲，促進乳腺癌細胞的凋亡而展現出良好的抗乳腺癌的作用，并且隨著冬凌草甲素抗乳腺癌作用機制的進一步研究，該藥有望成為一種有效的抗乳腺癌藥物[25]。

1.9 抗菌作用

冬凌草醇劑對金葡菌、甲型溶鏈菌有明顯的抑制作用，對痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、白葡菌等均有抑制作用[26]。

冬凌草提取物質量濃度大于1 MIC時，在生物膜形成的初始時間（0 h）添加藥物，對金黃色葡萄球菌生物膜清除效果明顯，胞外多糖的合成也受到顯著的抑制。但處理已經初步形成的金黃色葡萄球菌生物膜時，需要提供藥物的質量濃度才能提高對胞外多糖合成的抑制活性[27]。

1.10 抗炎作用

冬凌草在腸道保護，呼吸系統保護、神經系統保護等方面從消化系統、呼吸系統、中樞神經系統和泌尿系統等涉及到的多種體內體外炎癥模型出發，對冬凌草甲素的抗炎作用及機制進綜述，揭示冬凌草甲素的抗炎作用與多種疾病的關系[28]。

戴一等[29]采用梯度水-乙醇溶劑法，分別提取冬凌草，提取物通過蛋清致大鼠足跖腫脹實驗以確定抗炎有效部位，結果顯示：冬凌草100%乙醇提取物組分具有明顯的抗炎作用，且MS分析該提取物中明顯含有冬凌草甲素及其他貝殼杉烷類二萜，HPLC測定該提取物冬凌草甲素的提取率為0.1746%。

1.11 免疫增強作用

冬凌草甲素能改善糖尿病心肌缺血再灌注損傷模型大鼠的心臟功能、減少心肌損傷和細胞凋亡、降低氧化應激和炎癥分子表達，其機制可能與抑制NF-κB信號通路活化有關[30]。

冬凌草甲素能降低血清Ig E水平，調節Th1／Th2分化，從而改善急性哮喘模型炎癥反應究結果發現，不同濃度的冬凌草甲素都能抑制小鼠的氣高反應，同時減少血清中特異性的Ig E。給藥后，冬凌草甲素能降低Th2比例，提高Th1比例，且高濃度的冬凌草甲素可以使Th1／T2的比例上升；同時發現，給藥后，IgG1比例下降，IgG2a濃度升高，說明哮喘中Th1和Th2比例影響IgG1和IgG2a分泌，進一步驗證了冬凌草甲素對T細胞的調節作用[31]。

1.12 其他作用

李寅超等[32]對冬凌草醇提物重復給藥（30d）毒性試驗結果綜合分析顯示，在本試驗條件下，大鼠分別灌胃給予冬凌草醇提物0.46g／kg（相當于原生藥材 9.99g／kg、0.71g／kg（相當于原生藥材15.41g／kg）、0.96g／kg（相當于原生藥材 20.84g／kg）的劑量，連續給藥30d、停藥恢復14d。除高劑量組1只雄鼠死亡外，其余各組均無動物死亡。高劑量組的大鼠呈現食欲減退，形體消瘦，反應遲鈍等毒副反應，根據體質量增長情況、耗食量、血液生化學、系統尸檢、臟器系數及組織病理學檢查結果分析，冬凌草醇提物高劑量重復給藥（30d）可能產生肝腎損傷作用，但其病變具有可逆性，病變程度與給藥有劑量依賴性。

此外，冬凌草甲素能夠抑制骨吸收，促進骨形成，有效預防睪丸切除誘發的大鼠骨質疏松癥發生[33]。

2 結語

近年來對冬凌草的化學成分、藥理作用的研究取得了重要的進展。有關冬凌草的化學成分研究主要涉及二萜類、揮發油、黃酮和有機酸等。冬凌草甲素具有有較好的抗腫瘤活性倍受人們關注，但研究機制深淺不一，鮮有針對性、系統性的關于某一疾病的研究，因此，應該對其藥用機理、細胞通路等方面進行系統研究。另外，冬凌草其他有效成分的藥理作用鮮有報道，因此，應針對冬凌草各藥理作用著重進行其有效部位及有效成分的篩選，以便為冬凌草的進一步開發利用提供科學依據。