420例流產物染色體核型分析

鄧月月 劉文華 戴鶯鶯

420例流產物染色體核型分析

鄧月月 劉文華 戴鶯鶯

目的 探究流產物染色體異常核型。方法 選擇420例首次流產（早期流產）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產物進行染色體核型分析。 結果 420例樣本染色體核型分析結果正常145例（34．5%），異常230例（54．8%），體外培養未見細胞生長45例（10．7%）。230例染色體異常樣本中以染色體數目異常最為常見，主要有16-三體42例（18．2%）、三倍體28例（12．2%）、X單體25例（10．8%）、四倍體12例（5．2%）、15-三體12例（5．2%），其他類型染色體異常包括染色體片段缺失、重復、插入、易位等。結論染色體異常是早期流產的重要原因，其中16-三體是最常見的染色體異常核型。

核型分析 流產物 染色體異常

流產是指妊娠不足28周、胎兒體重不足1 000g而終止的情況。有文獻報道臨床診斷妊娠者發生流產的概率約為15%，其中2次及上自然流產的發生率為2.2%～4.0%[1]。相關研究表明胚胎、胎兒染色體異常是早期流產的常見病因之一，占50%～60%[2]。染色體異常主要包括數目異常和結構異常，常見的異常核型有三倍體、多倍體、X單體等。妊娠合并染色體異常的結局為流產的概率高達99%。復發性流產者的流產物染色體異常發生率較高，目前可采用胚胎或胎兒流產組織體外培養法檢測染色體異常。有學者推薦對一次流產者的流產物進行細胞遺傳學分析，故筆者收集420例首次流產（早期流產）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產物進行染色體核型分析，以探究流產物染色體異常核型，現將研究結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 收集2014年12月至2016年6月在本院計劃生育門診就診的528例首次流產（早期流產）患者的宮腔搔刮或負壓抽吸的流產物，并存于密封的容器。本研究獲得本院人體研究倫理委員會批準。

1.2 方法 由高年資的細胞遺傳學研究者分離流產物樣本，取胚胎或絨毛組織進行體外培養，供染色體核型分析；其中108例不含胚胎或絨毛組織的樣本均丟棄，共分析染色體核型樣本420例。將樣品置于5ml的培養基（pH7.0）中，在CO2、37℃環境中培養24～48h；然后置于2個Leighton管[一個含有半Chang D?，另一個含有Amniomax?（2.5ml，pH7.0）]中制備培養物，在CO2、37℃的環境中溫育；當有足夠的組織生長時，每5ml培養物中加入60μl秋水仙堿，持續45min；最后除去生長培養基，在室溫下加入1%檸檬酸鈉10min。以上步驟重復2次，然后制板并用G帶染色。

1.3 觀察指標 計算早期流產患者的流產物各種類型染色體異常所占的比例，即某類型染色體異常例數/染色體異常總數。

2 結果

2.1 染色體核型分析結果 420例樣本染色體核型分析結果正常145例（34.5%），異常230例（54.8%），體外培養未見細胞生長45例（10.7%）。230例染色體異常樣本中以染色體數目異常最為常見，主要有16-三體42例（18.2%）、三倍體28例（12.2%）、X單體25例（10.8%）、四倍體12例（5.2%）、15-三體12例（5.2%），其他類型染色體異常包括染色體片段缺失、重復、插入、易位等，異常類型包括[+13，+15]、[+7，+16]、[+13，+21]、[+9，+13]、[+ 18，+21]、[+9，+14]、[+15，+21]、[+15，+16]、[Der（14；14）]、[Der（13；14）]、[Der（13；14）]、[Der（16；18）]、[Dup（7）（q21q34）]、[Der（10）t（10；16）（q25；q13）]、[R（14）（p11.2q32）]、[Der（6）t（6；X）（q11；q13）]、[48，XXY，+16]、[Add（17）（p11.2）]、[91，XXYY，+6，-21，-21]、[T（3；4）（q13；q35）]、[70，XXX，+ 22]、[68，XXX，-21]、[68，XXY，-17]、[Add（3）（p25，p26）]、[Dup（9）（q21q34）]、[Der（11；22）]、[-22，t（9；22）]、[Inv（Y）]、[T（3；13）（q27；q14）]、[Der（7）t（7；X）（q11；q12）]，見表1。

表1 染色體數目異常核型分析結果（n=230）

3 討論

目前診斷不良孕產病因的主要方法是對流產物進行細胞遺傳學分析，以便于指導治療方案的制定，降低病因診斷成本[1]。早期流產的主要病因是染色體異常，相關研究表明55.4%的流產病因是染色體異常[3]。本研究結果表明最常見的染色體異常類型是16-三體，與以往研究結果一致[4-5]。三體多與流產者年齡相關，年齡越大則染色體異常發生率越高；對于年齡＜35歲且不伴有染色體異常的流產者，流產病因主要包括內分泌因素、免疫因素、解剖因素等。多倍體、X單體亦是流產的常見病因，但相關研究表明與年齡未見相關性[5]。本研究結果表明54.8%的流產病因是染色體異常，與以往研究結果基本一致[5-6]。一項115例早期流產者流產物核型分析結果表明，61%的流產病因是染色體異常，其中染色體數目異常占90%，染色體結構異常占10%[3]。一項相似的研究顯示420例早期流產者流產物染色體核型分析結果異常率為46%。因此，流產物核型分析可用于早期病因診斷及指導治療方案制定，降低病因診斷成本[1]。筆者建議對流產物核型分析結果正常的二次早期流產者，需查找其他病因。

綜上所述，染色體異常尤其是非整倍體，是流產的重要病因。其中16-三體是最常見的染色體異常類型，其次為三倍體、X單體、四倍體、15-三體等。細胞遺傳學分析對流產（尤其是復發性流產）具有重要的診斷價值。

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Cytogenetic analysis of miscarriage samples

Objective To examine the chromosome abnormalities in miscarriage samples．MethodsTissue samples were collected from uterine curettage or vocuum suction in 420 miscarriage patients,and the karyotype analysis was performed．Results There were 145 cases of normal results(34．5%),230 cases of abnormal results(54．8%),and in 45 samples there was no cell growth(10．7%)．In 230 abnormal samples numerical abnormalities were the most frequent,including 16-trisomy(42 cases), triploidy(28 cases),monosomy X(25 cases),tetraploidy(12 cases)and 15-trisomy (12 cases);the other abnormalities were chromosome deletion,duplication,insertion and translocation． Conclusion Cytogenetic alterations are important cause of miscarriages and 16-trisomy is the most frequent one．

Karyotype analysis Miscarriage Chromosomal alterations

2016-12-16）

（本文編輯：陳丹）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.5.2016-2119

310008 杭州市婦產科醫院婦產科

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