γ突觸核蛋白表達與胃癌臨床病理特征相關性的Meta分析

徐丹 李晶 肖馳 王儒涵 費晶 鞏平

(石河子大學醫學院第一附屬醫院腫瘤內科，新疆 石河子 832000)

胃癌(GC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，在所有腫瘤中死亡率占第五位〔1〕，隨著科學技術的發展，國內外有關GC的最新治療方案逐漸增多，但復發和轉移仍是影響患者預后的重要因素，也是導致GC患者高死亡率的主要原因〔2〕。因此，研究GC侵襲和轉移的分子機制，將有助于尋求GC診斷和治療的有效靶點。γ突觸核蛋白(SNCG)，也稱為乳腺癌特異性基因(BCSG)1，與α-突觸核蛋白和β-突觸核蛋白一樣，它屬于突觸核蛋白基因家族〔3〕。SNCG蛋白含有127個氨基酸，是一種天然的未折疊蛋白。研究顯示，SNCG在許多腫瘤組織中過表達，并與其臨床病理特征密切相關〔4,5〕。但不同文獻對于SNCG表達對胃腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移等的影響研究結論尚不一致，每篇文獻研究病例數相對較少，且SNCG表達與GC臨床病理特征的Meta分析目前尚無相關報道。本研究Meta分析綜合評價SNCG表達與GC臨床病理特征的相關性。

1 資料與方法

1.1文獻檢索 以PubMed、EmBase、Web of science、Cochrane Library、CNKI、VIP、萬方和CBM作為檢索的主要來源，以γ突觸核蛋白、胃腫瘤等為中文檢索詞，以gamma-Synuclein、Stomach Neoplasms等為英文檢索詞進行檢索，檢索時限為建庫至2019年1月1日。以PubMed檢索為例，詳細的檢索策略如下：#1 Search “Stomach Neoplasms”〔Mesh〕，#2 Search(((((((((((((((((Neoplasm,Stomach〔Title/Abstract〕)OR Stomach Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasms,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasms〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasm,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Neoplasms,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancer of Stomach〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancers〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancers〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancer of the Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer,Familial Diffuse〔Title/Abstract〕，#3 #1 OR #2，#4 Search “gamma-Synuclein”〔Mesh〕，#5 Search((gamma Synuclein〔Title/Abstract〕) OR Persyn〔Title/Abstract〕) OR Synoretin〔Title/Abstract〕，#6 #4 OR #5，#7 #3 AND #6。

1.2納入與排除標準 納入標準：1)國內外公開發表的論著和學位論文，提供包含SNCG與GC臨床病理特征相關性的原始數據；2)所有的病例取材前均未經化療、放療及其他可能對SNCG表達有影響的治療，實驗組均為通過病理學或細胞學檢查明確診斷為GC的患者，對照組均為癌旁正常組織或正常組織。3)各文獻所用的實驗方法均為免疫組化法；4)觀察性研究(病例對照或隊列研究)；5)統計方法應用恰當，數據質量可靠，有或可計算出OR值及95%CI。排除標準：1)綜述，評論，會議摘要類文章；2)評價指標的界定系數不符合本文標準；3)重復報告或者資料雷同；4)采用免疫組化法以外的方法進行檢測的文章；5)非人類實驗。

1.3原始文獻篩選和資料提取 篩選文獻由2名研究者按照納入排除標準獨立完成資料提取并交叉核對，如遇意見不合時，則通過討論或參考第3位研究者的意見。數據提取主要包括作者研究者姓名、發表時間、病例組和對照組的數量、表達陽性數量等。如果是同一作者或單位的報道，則僅保留病例數最大、最全的文獻。

1.4文獻質量評價 對納入研究的方法學質量進行紐卡斯爾-渥太華量表(NOS)量表評分，評價內容主要包括3個方面：選擇、可比性和暴露。每個研究的評價得分為0～9分，由2位評價員按照上述標準獨立進行，遇意見不合者，則經過討論解決或參考第三者意見。

1.5統計學方法 使用Review Manager 5.3進行Meta分析，對于SNCG的表達及與GC臨床病理特征的相關性，計算OR值及95%CI作為分析統計量，采用χ2檢驗對資料進行異質性檢驗，如P≥0.05，I2≤50%，則各研究間統計學異質性較小，可采用固定效應模型；若P<0.05，I2>50%，則認為研究間存在異質性，則選用隨機效應模型，并采用逐一排除研究的方法進行敏感性分析。此外，當Meta分析納入文獻≥10個時使用漏斗圖來判斷是否存在發表偏倚〔6〕。

2 結 果

2.1文獻篩選過程 根據關鍵詞初步檢索出文獻104篇，根據文獻題目與摘要剔除重復文獻35篇，進而剔除非人類實驗、綜述類、會議類及不相關的文題及摘要共計53篇，余下文獻通過閱讀全文后排除內容重復、檢測方法為非免疫組化法的文獻11篇，最終根據納入和排除標準選取出符合要求的5篇文獻〔7～11〕。根據《PRISMA聲明》文獻篩選流程圖如圖1。

圖1 薈萃分析中選擇研究的流程

2.2納入研究的基本特征 標準與排除標準納入5篇研究文獻。納入文獻中4個研究〔8～11〕分析SNCG在GC和正常胃黏膜組中的表達相關關系，共395例腫瘤組織，185例正常胃黏膜組。見表1。

表1 薈萃分析中包含的研究特征

2.3Meta分析結果

2.3.1SNCG表達在GC和正常胃黏膜組中的表達水平分析 4個文獻〔8～11〕納入資料中GC組SNCG陽性表達256例，正常胃黏膜組SNCG陽性表達31例。對入選研究的結果進行異質性檢驗，差異有統計學意義(χ2=12.52，df=3，P=0.006)；I2=76%，研究間異質性較大。采用隨機效應模型合并數據。結果顯示，兩組間差異有統計學意義(OR=18.47，95%CI：4.20～81.12，P=0.000 1)，表明SNCG在GC中高表達，見圖2。

圖2 SNCG表達在GC和正常胃黏膜組中的表達陽性率比較

2.3.2SNCG表達與GC年齡的相關性分析 按照60歲年齡分組標準納入2個研究〔7，11〕。其中年齡組<60歲156例，≥60歲162例，研究間無統計學異質性(P=0.85，I2=0%)，故采用固定效應模型合并數據，結果顯示，兩組間SNCG表達比較差異無統計學意義(OR=0.77，95%CI：0.48～1.24，P=0.28)。見圖3。

圖3 SNCG表達與GC患者年齡的相關性

2.3.3SNCG表達與GC患者浸潤深度的相關性 根據國際腫瘤TNM分期為標準：GC以腫瘤侵犯至固有肌層及以內即T1和T2作為淺浸潤組；腫瘤穿透漿膜下結締組織及以外即T3和T4作為深浸潤組。共有4篇文獻〔7～9，11〕納入本項Meta分析，其中淺層浸潤組(T1+T2)133例，深層浸潤組(T3+T4)332例，研究間異質性檢驗，無統計學異質性(χ2=5.8，P=0.12，I2=48%)，故采用固定效應模型進行Meta分析，SNCG表達差異有統計學意義(OR=0.25，95%CI為0.16～0.40，P<0.000 01)。見圖4。

2.3.4SNCG表達與GC患者分化程度的相關性 共有4篇文獻〔7～9，11〕納入本項Meta分析。其中高中分化有212例，低分化、印戒及黏液細胞癌有253例，異質性分析顯示，無統計學異質性(χ2=5.94，P=0.11，I2=49)，故采用固定效應模型進行分析。結果顯示，兩組SNCG表達差異無統計學意義(OR=0.79，95%CI為0.53～1.18，P=0.25)，故SNCG表達與GC的分化程度無相關性。見圖5。

2.3.5SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移的相關性分析 共有5篇文獻〔7～11〕納入本項Meta分析。其中無淋巴結轉移的有173例，有淋巴結轉移的有312例，GC內部存在統計學異質性(χ2=11.94，P=0.008，I2=75%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩組SNCG表達差異有統計學意義(OR=0.19，95%CI為0.07～0.51，P=0.000 9)，故SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移相關。見圖6。

2.3.6SNCG表達與GC患者臨床分期的相關性研究 共有2篇文獻〔7，9〕納入本項Meta分析。其中臨床Ⅰ～Ⅱ期有49例，臨床Ⅲ～Ⅳ 期有101例，內部無統計學異質性(χ2=0.00，P=0.99，I2=0%)，故采用固定效應模型進行Meta分析，GC兩組SNCG表達差異有統計學意義(OR=0.03，95%CI為0.01～0.08，P<0.000 01)。見圖7。

圖4 SNCG表達與GC患者浸潤深度的相關性

圖5 SNCG表達與GC患者分化程度的相關性

圖6 SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移的相關性

圖7 SNCG表達與GC患者臨床分期的相關性

2.4納入研究的偏倚評估及敏感性分析 所有納入文獻采用逐一排除的方法進行敏感性分析，任一納入的研究被排除后在相應的效應模型中數據統計分析結果與原來的相同，OR值相似，說明納入文獻穩定性較好。

3 討 論

SNCG主要分布于神經系統。SNCG最早發現于人乳腺癌cDNA文庫，已在乳腺癌中證實其具有促進乳腺癌浸潤和轉移的作用〔12〕。近來在膽管癌、卵巢癌和結直腸癌等惡性腫瘤中也發現SNCG的異常高表達，在晚期腫瘤中表達尤其升高，提示其在腫瘤的發生發展過程中喪失了原先的組織特異性，有望成為一個有效的腫瘤標志物。因此，高表達的SNCG是一種潛在的癌基因，是引發腫瘤的重要原因之一。目前國內外資料均顯示，過表達的SNCG不僅參與腫瘤的發生發展，還與腫瘤的侵襲、轉移和預后密切相關〔7～14〕。本研究提示SNCG過表達對GC淋巴結轉移有促進作用。Hibi等〔15〕通過體內研究表明，SNCG與胰腺癌患者的神經周圍侵襲及其他主要侵襲參數(包括腫瘤大小、血管侵犯、淋巴結轉移和UICC分期)顯著相關，此外，使用人胰腺癌細胞系進行神經侵襲和原位移植的小鼠模型中的SNCG基因沉默與神經侵襲及肝和淋巴結轉移(胰腺癌細胞的主要歸巢器官)的顯著減少相關，與本研究結果一致。而2008年董勇〔16〕在乳腺癌的研究提示，雌激素受體(ER)及SNCG狀況與新輔助化療療效相關，通過多因素Logistic回歸進一步闡明SNCG與乳腺癌新輔助化療敏感性之間有著顯著聯系。所以，以SNCG為靶點的靶向治療可能在胃腫瘤綜合治療中取得一定突破。

除了Stata、SPSS等Meta分析常用軟件外，Revman5.3軟件作為Cochrane系統評價的標準化軟件，特點包括操作簡單，可對錄入的計數資料、計量資料等不同類型數據進行Meta分析，并以森林圖的形式展示〔17〕。關于SNCG表達與GC臨床病理關系的這5篇文獻采用Revman5.3軟件，各文獻代表性良好。本研究的局限性在于雖然納入研究的方法為免疫組化法，但是該方法涉及的抗體來源、生產廠家、稀釋濃度及評定標準并非完全一致，也有可能影響Meta分析的結果，因此需要高質量的證據來完善該結果。

綜上，本研究結果顯示，過表達的SNCG與GC的浸潤深度，臨床分期，淋巴結轉移相關，此結果將可能為GC的早期診斷、預后評估及分子靶向治療奠定基礎。