青年雞新城疫、高致病性禽流感免疫抗體檢測

謝 梅，劉廣喜，田亞娜

（衡水市冀州區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 053200）

2016 年以來，衡水市冀州區(qū)某青年雞養(yǎng)殖場根據(jù)疫苗廠家的建議結(jié)合本場經(jīng)驗(yàn)，自擬免疫程序進(jìn)行雞新城疫、高致病性禽流感等主要疫病免疫，未發(fā)生過新城疫、高致病性禽流感。 為摸清該場青年雞免疫抗體水平，給免疫工作提供科學(xué)依據(jù)，我們于2019 年7 月30 日對(duì)該場52 日齡青年雞隨機(jī)抽取30 只雞血清進(jìn)行了雞新城疫、H5 亞型禽流感(Re-11 株，Re-12 株)和H7 亞型禽流感（H7Re-2 株）免疫抗體檢測。 通過檢測，雞新城疫血凝抑制抗體效價(jià)平均為9.1log2，H5 亞型禽流感(Re-11 株)血凝抑制抗體效價(jià)平均為9.8log2，H5 亞型禽流感(Re-12 株)血凝抑制抗體效價(jià)平均為9.2log2，H7 亞型禽流感（H7Re-2 株）血凝抑制抗體效價(jià)平均為10log2，免疫抗體效價(jià)高而整齊，現(xiàn)將該場雞免疫方案及免疫抗體檢測結(jié)果報(bào)告如下，供獸醫(yī)同行和養(yǎng)雞工作者參考。

1 雞飼養(yǎng)管理和免疫情況

1.1 飼養(yǎng)管理情況

該青年雞養(yǎng)殖場位于村東南角，距村500m，養(yǎng)殖場周圍為楊樹林。 育雛舍為全封閉雞舍，自動(dòng)控溫、自動(dòng)通風(fēng)、人工光照。育雛籠為階梯式育雛籠，自動(dòng)飲水、自動(dòng)喂料、自動(dòng)清糞，自己出飼料配方讓某飼料廠配制混合飼料。 采取全進(jìn)全出飼養(yǎng)管理方法，每批飼養(yǎng)35000～40000 只，雞飼養(yǎng)周期55～60d。

1.2 免疫情況

1.2.1 1 日齡在孵化場噴霧免疫雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗（默沙東Ma5+Co30）1 頭份。

1.2.2 7 日齡用肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司生產(chǎn)的雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗點(diǎn)眼1.2 頭份，同時(shí)肌肉注射肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司生產(chǎn)的雞新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗0.3mL。

1.2.3 14 日齡翅根刺種楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn)的傳染性喉氣管炎、雞痘二聯(lián)活疫苗1.5 頭份，同時(shí)肌肉注射青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)的重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株）0.3mL。

1.2.4 21 日齡用肇慶大華農(nóng)雞新城疫、 傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗1.5 頭份，同時(shí)肌肉注射肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司生產(chǎn)的雞新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗0.3mL。

1.2.5 35 日齡肌肉注射青島易幫生物工程有限公司生產(chǎn)的重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11 珠+Re-12株，H7N9H7-Re2 株）0.4mL。

2 實(shí)驗(yàn)材料和方法

2.1 檢測方法 高致病性禽流感診斷技術(shù)GB/T 18936-2003血凝和血凝抑制（HA-HI）試驗(yàn)。

新城疫診斷技術(shù)GB/T 16550-2008 血凝和血凝抑制 （HAHI）試驗(yàn)。

2.2 檢測儀器 96 孔90°V 型血凝板、5～50μL 多道移液器、5～50μL 單道移液器、微量振蕩器、生化培養(yǎng)箱等。

2.3 檢測試劑

2.3.1 ND 抗原 生產(chǎn)廠家： 青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心；批號(hào)：010131801；生產(chǎn)日期：20180423；有效期：20200422。

2.3.2 H7 亞型Re-2 抗原 生產(chǎn)廠家： 哈爾濱國生生物科技股份公司；生產(chǎn)日期：20190415；有效期：20210414。

2.3.3 H5 亞型Re-11 抗原 生產(chǎn)廠家：哈爾濱國生生物科技股份公司；生產(chǎn)日期：20190416；有效期：20210415。

2.3.4 H5 亞型Re-12 抗原 生產(chǎn)廠家：哈爾濱國生生物科技股份公司；生產(chǎn)日期：20190415；有效期：20210414。

2.4 被檢血清 于2019 年7 月30 日該批52 日齡時(shí)，隨機(jī)抽取30 只雞翅靜脈血各2mL，自然分離血清，-15℃以下保存被檢。

3 免疫抗體檢測結(jié)果

3.1 ND 血凝抑制免疫抗體檢測結(jié)果

3 份10log2，27 份9log2，平均為9.1log2，抗體水平較高。

3.2 H5(Re-11)血凝抑制抗體檢測結(jié)果

26 份10log2，3 份9log2，1 份8log2，平均為9.8log2，抗體水平高而整齊。

3.3 H5(Re-12)血凝抑制抗體檢測結(jié)果

8 份10log2，21 份9log2，1 份8log2，平均為9.2log2，抗體水平高而整齊。

3.4 H7N9 血凝抑制抗體檢測結(jié)果

30 份10log2，抗體水平高而整齊。

4 討論與分析

4.1 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出， 該場于7 日齡和21 日齡接種二次肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司生產(chǎn)的新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗， 于14 日齡和35 日齡接種二次青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)的重組禽流感病毒 （H5+H7） 三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株），于52 日齡采血檢測，ND、H5 亞型Re-11、H5 亞型Re-12 和H7 亞型Re-2 血凝抑制抗體效價(jià)水平均較高，且比較整齊，說明疫苗質(zhì)量較好，免疫程序得當(dāng)。 7 日齡首免和21 日齡二免兩次雞新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗免疫間隔時(shí)間短，僅14d，但是免疫抗體效價(jià)還是較高的。

4.2 重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株）二次免疫后，三種毒株抗體效價(jià)相近，因此，在批量檢測中，只做一個(gè)毒株的血凝抑制免疫抗體效價(jià)，也可推測其他兩個(gè)毒株抗體效價(jià)。

4.3 在養(yǎng)雞生產(chǎn)中，有些蛋雞青年雞養(yǎng)殖場，在50～60d 育雛育成期間，僅做一次雞新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗和重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)或三價(jià)滅活疫苗的免疫，經(jīng)多次檢測，各種抗體水平均較低，平均僅2～4log2，不能很好抵抗野毒攻擊。

4.4 這次試驗(yàn)由于缺少H9 亞型禽流感抗原， 因此未做H9亞型禽流感抗體的檢測。 在以往的抗體檢測工作中， 用雞新城疫、H9 亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗免疫后， 同時(shí)進(jìn)行抗體檢測，一般H9 亞型禽流感抗體效價(jià)比雞新城疫抗體效價(jià)高1～2 滴度。

總之，在對(duì)蛋雞青年雞飼養(yǎng)場做雞新城疫、H9 亞型禽流感、H5 亞型禽流感和H7 亞型禽流感等病免疫時(shí)， 需要根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)做好加強(qiáng)免疫， 這樣才能保證在育雛后期有足夠的免疫抗體，免受各種相關(guān)病毒性疾病的侵襲。