中藥方劑口服聯(lián)合化療對老年胃癌患者外周血T淋巴細胞亞群及血清MMP-9、TIMP-1和VEGF表達的影響

顧國群 張斌忠 范耀華 李艷 儲水鑫

(嘉興市第二醫(yī)院 1中醫(yī)科，浙江 嘉興 314000；2腫瘤外科；3腫瘤內(nèi)科)

胃癌是常見一種惡性腫瘤，據(jù)統(tǒng)計資料顯示其發(fā)病率呈不斷上升趨勢，嚴(yán)重威脅患者生命〔1〕。胃癌早期無明顯癥狀，隨著疾病的不斷進展，可出現(xiàn)上腹部不適、輕度惡心感及食后飽脹等，而晚期則表現(xiàn)為反復(fù)上腹部疼痛、嘔吐及腹痛加重向腰背放射等，出現(xiàn)消化道出血癥狀，如黑便、嘔血等〔2，3〕。目前，手術(shù)被認(rèn)為胃癌最直接且最有效的一種方法，但由于手術(shù)創(chuàng)傷會造成患者生活質(zhì)量及身體功能下降，且可能導(dǎo)致其并發(fā)癥增加〔4〕。因此，采用綜合治療方法尤為重要，包括化療、中醫(yī)藥等〔5，6〕。近年來發(fā)現(xiàn)，血清基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9、組織MMP抑制劑(TIMP)-1和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與癌癥發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本研究探討中藥方劑口服聯(lián)合化療對老年胃癌患者外周血T淋巴細胞亞群及血清MMP-9、TIMP-1和VEGF表達的影響。

1 資料與方法

1.1研究對象 選擇嘉興市第二醫(yī)院于2015年12月至2017年12月收治的老年胃癌患者102例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織學(xué)證實為胃癌，且患者病理分期Ⅲ～Ⅳ期；②患者Karnofsky功能狀態(tài)(KPS)評分≥60分，且預(yù)計生存期3個月以上者；③自愿遵守研究期間治療方案，且簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重并發(fā)癥如出血傾向、感染發(fā)熱或上消化道出血等；②合并心腦血管、造血系統(tǒng)及肝腎等嚴(yán)重原發(fā)病者；③精神疾病者；④過敏體質(zhì)者。按照隨機數(shù)字表法分為觀察組51例與對照組51例。觀察組男28例，女23例；年齡65～76〔平均(70.12±5.46)〕歲；體重52～78〔平均(62.13±5.46)〕kg；TNM分期：Ⅲ期31例，Ⅳ期20例。對照組男30例，女21例；年齡67～75〔平均(69.74±4.89)〕歲；體重49～79〔平均(61.70±4.95)〕kg；TNM分期：Ⅲ期29例，Ⅳ期22例。兩組基線資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法 對照組：給予患者化療方案，具體方法：口服替吉奧50 g/次，每日2次，連續(xù)14 d；靜脈注射奧沙利鉑130 mg/m2，d1；觀察組：在對照組基礎(chǔ)上結(jié)合中藥方劑口服，組成包括太子參15 g、黃芪30 g、薏苡仁15 g、半枝蓮15 g、白花蛇舌草15 g、莪術(shù)15 g、白術(shù)15 g、法半夏10 g、茯苓10 g、山藥10 g、丹參10 g、陳皮6 g，炙甘草3 g，取諸藥水煎，取汁300 ml，每次150 ml，分早晚兩次溫服。兩組均以21 d為1個周期，連續(xù)化療2～4個周期評價。

1.3療效標(biāo)準(zhǔn) ①完全緩解：化療療程結(jié)束后可見腫瘤消失且能夠維持1個月以上者；②部分緩解：化療療程結(jié)束后腫瘤兩個最大的相互垂直直徑乘積縮小超過30%及以上者，且能夠持續(xù)1個月以上；③穩(wěn)定：化療療程結(jié)束后腫瘤兩個最大的相互垂直的直徑乘積縮小≤30%，或者增大不足20%，且能夠維持1個月以上者；④進展：化療療程結(jié)束后腫瘤兩個最大的相互垂直直徑乘積增大20%及以上。

1.4指標(biāo)評價

1.4.1KPS評分評價 分別于化療前后評價患者生存質(zhì)量，KPS評分為0～100分，評分越高生存質(zhì)量越好。

1.4.2主要癥狀積分 包括上腹疼痛、納差、乏力，按照病情嚴(yán)重分為無(0分)、輕度(1分)、中度(2分)和重度(3分)，評分越高癥狀越嚴(yán)重。

1.4.3外周血T淋巴細胞測定 分別于化療前后抽取外周靜脈血2 ml，以流式細胞儀測定T淋巴細胞亞群變化。

1.4.4血清MMP-9、TIMP-1和VEGF表達 分別于化療前后抽取外周靜脈血4 ml，分離血清，于-20℃下保存待測，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定MMP-9、TIMP-1和VEGF表達。

1.4.5毒副反應(yīng) 觀察化療期間毒副反應(yīng)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件行t檢驗、χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組近期療效比較 觀察組完全緩解5例，部分緩解28例，穩(wěn)定13例，進展5例；對照組完全緩解2例，部分緩解21例，穩(wěn)定19例，進展9例。觀察組總有效率(64.70%)明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(45.10%，χ2=3.960,P<0.05)。

2.2兩組KPS評分比較 兩組化療前KPS評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.533，P>0.05)；兩組化療后KPS評分較治療前明顯增加(觀察組：t=18.224，對照組：t=9.549，均P<0.05)；觀察組化療后KPS評分明顯高于對照組(t=7.366，P<0.05)。見表1。

2.3兩組主要癥狀積分比較 兩組化療前上腹疼痛、納差和乏力積分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.140、0.641、0.840，均P>0.05)；兩組化療后上腹疼痛、納差和乏力積分較化療前明顯降低(觀察組：t=29.429、39.270、52.166，對照組：t=14.801、18.292、21.435，均P<0.05)；觀察組化療后上腹疼痛、納差和乏力積分明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=18.562、18.156、20.668，P<0.05)。見表2。

表1 兩組KPS評分比較分,n=51)

與本組化療前比較:1)P<0.05;與對照組化療后比較:2)P<0.05，下表同

表2 兩組主要癥狀積分比較分,n=51)

2.4兩組T淋巴細胞亞群比較 兩組化療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.343、0.576、0.219，均P>0.05)；對照組化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較化療前明顯下降(t=8.281、14.165、7.096，均P<0.05)；觀察組化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較化療前明顯升高(t=9.229、8.187、9.037，P<0.05)；觀察組化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=19.769、21.615、19.941，均P<0.05)。見表3。

表3 兩組T淋巴細胞亞群變化比較

2.5兩組血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平比較 兩組化療前血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.561、0.537、0.648，均P>0.05)；兩組化療后血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平較治療前明顯降低(觀察組：t=43.286、14.653、22.509，對照組：t=17.258、5.333、11.080，均P<0.05)；觀察組化療后血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平明顯低于對照組(t=23.244、8.924、11.826，均P<0.05)。見表4。

表4 兩組血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平比較

2.6兩組毒副反應(yīng)比較 觀察組毒副反應(yīng)明顯少于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 兩組毒副反應(yīng)比較(n,n=51)

3 討 論

胃癌作為消化系統(tǒng)中最常見的一種腫瘤，具有較高的發(fā)病率和病死率〔7，8〕。化療是治療胃癌主要手段，雖可取得良好療效，但其毒副反應(yīng)較為明顯，并且會導(dǎo)致患者免疫功能下降〔9，10〕。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為脾為后天之本，脾胃虛弱，則脾失健運，運化無權(quán)，聚濕生痰，阻塞經(jīng)絡(luò)，水谷難以運化，則會導(dǎo)致機體失養(yǎng)，血行不暢，化生瘀毒，痰瘀互結(jié)，而致阻于胃脘，形成腫瘤〔11～13〕。中醫(yī)理論認(rèn)為胃癌多因過度憂思、飲食不節(jié)導(dǎo)致運化功能失常、脾胃受損，絡(luò)脈阻塞，陽氣不大，氣滯痰凝等；認(rèn)為氣、瘀、毒、痰。因此，應(yīng)以益氣健脾、暢達陽氣為治療法則〔14～17〕。本文中藥方劑中，太子參、黃芪具有益氣健脾功效，薏苡仁、茯苓具有健脾滲濕功效，半枝蓮、白花蛇舌草、莪術(shù)具有行氣破血、清熱解毒、祛瘀止痛、軟堅散結(jié)功效，白術(shù)具有健脾益氣功效，法半夏具有降逆止嘔和胃、化痰消痞散結(jié)功效，山藥具有健脾功效，丹參具有活血功效，陳皮具有燥濕化痰、健脾滲濕功效，炙甘草具有健脾、調(diào)和諸藥功效。本研究結(jié)果表明中藥方劑口服聯(lián)合化療可提高療效，提高患者生存質(zhì)量，改善患者癥狀，改善患者免疫功能，降低毒副反應(yīng)。

MMP-9是MMPs家族中分子量最大的一種酶，能夠降解基底膜及細胞外基質(zhì)，從而使腫瘤細胞可突破基底膜屏障，促進癌細胞對周圍組織浸潤和轉(zhuǎn)移，并且與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)〔18〕。通常情況下，TIMPs與MMPs在體內(nèi)保持相對平衡的狀態(tài)，并且其平衡決定ECM的降解，在組織的修復(fù)、重塑、胚胎植入及腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用〔19〕。研究顯示，在低氧狀態(tài)下腫瘤細胞可分泌大量VEGF，并且VEGF過度表達可促使胃癌組織新的血管生成和轉(zhuǎn)移〔20〕。本研究表明，中藥方劑口服聯(lián)合化療可降低血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平表達。