姜春林,張玉穩
(1.煙臺市園林建設養護中心 南山公園動物園,山東 煙臺 264001 ;2.威海市劉公島國家森林公園管理處,山東 威海 264200)
2018年9月初,本園飼養雛孔雀共28只,1~4月齡不等,均為機器孵化出雛,飼養在育雛場內。9月8日開始陸續有雛孔雀出現發病癥狀,開始表現為精神沉郁,食欲不振,喜伏地蹲臥,翅膀下垂,隨病程發展,食欲減少甚至廢絕,呆立不動,對外界刺激反應遲鈍,有的病例出現呼吸困難,伴隨呼吸動作有節奏的張口伸頸,偶見甩頭動作。個別病例眼瞼腫脹,發生粘連而導致不能睜眼,扒開粘連的眼瞼,內有淡黃色干酪樣凝塊。有腹瀉癥狀,肛門周圍羽毛被糞便污染。
雛孔雀尸體體況差,消瘦,氣管切開后發現內有黏液,肺臟顏色蒼白。胸氣囊壁、肺氣囊壁、腹腔和肝臟漿膜渾濁,尤其在肺臟實質和表面、胸氣囊表面布滿小米粒大的黃白色沙粒狀結節(見中插彩版圖1),質地硬,切開內容物為干酪樣。部分病例有卡他性腸炎,腹膜炎。
3.1 顯微鏡鏡檢 剪取肺臟和胸氣囊的適量病灶結節,置于載玻片上,用另一塊載玻片壓碎,加3~5滴20%的氫氧化鉀溶液,后進行常規鏡檢觀察到分隔的菌絲。為增強觀察辨別效果,將墨汁染料加入氫氧化鉀溶液中,100倍鏡下可見分隔的菌絲、分生的孢子柄和孢子(見中插彩版圖2)。
3.2 病理組織學檢查 肺臟病灶呈纖維素性肺炎,對病變肺臟做病理切片,發現肺臟組織有結節樣霉菌病變(見中插彩版圖3),并有炎性細胞浸潤。肝組織切片發現菌絲體深入肝細胞,肝小葉結構被破壞,有大量中性粒細胞浸潤,有的肝細胞結構消失,脂肪變性,含鐵血黃素沉積。
3.3 真菌分離培養和鏡檢 剪取有結節的肺臟和肝臟病灶組織各0.5 cm3,接種涂抹在沙保氏培養基,在細菌培養箱37 ℃進行培養20 h后,生長出白色絨毛狀菌落。隨著培養時間的延長,出現2種不同形態的霉菌菌落,在培養8 d后菌落直徑達到6 cm。菌落剛生長時為白色緊密絨狀,霉菌孢子逐漸生長,形成大部分為黃綠色的菌落,外周為白色。
在載玻片上加少量生理鹽水后,用鑷子取培養物一小塊,放于此載玻片上,使菌絲體能分開,加蓋玻片制成常規壓片,置于高倍顯微鏡下觀察。可見到串珠狀分生孢子的形態,孢子柄一端頂囊膨大[1],呈燒瓶狀,菌絲為煙綠色圓柱形(見中插彩版圖4)。經上述檢測鑒定為煙曲霉菌。
霉菌是形成分枝菌絲的真菌的統稱。飼料與環境都可能被霉菌污染,當環境條件差,空氣中懸浮大量霉菌孢子,或長時間飼喂發霉飼料都會引起霉菌性疾病[2]。霉菌(主要為煙曲霉菌)引發家禽霉菌性肺炎,特別是常引起幼禽多發,發病率和死亡率均較高[3]。該病例通過病理學剖檢、真菌培養和顯微鏡檢查確定為煙曲霉菌感染。通過實地查訪了解到孔雀吃剩和散落的飼料沒有及時清理,很容易發生霉變;地面墊料潮濕,且環境通風不良,致使籠舍內霉菌大量繁殖生長。同時雛孔雀日齡小,抵抗力較弱,易發病。
本著消除病因的原則,制定治療措施。加強飼養和環境管理,消除環境中的霉菌;將舍內原有的墊料更換為新鮮的未發霉墊料,開窗通風,降低舍內的濕度。同時用0.05%的硫酸銅溶液噴灑籠舍墻壁和地面,殺滅并抑制霉菌的生長。抑制、殺滅體內霉菌;在飼料中添加適量脫霉吸附劑(主要成分為蒙脫石散),并按照每只6萬單位的用量添加制霉菌素,連用5 d。因剖檢孔雀后,發現肺部生長有霉菌,故采用了將制霉菌素溶解于滅菌注射用水后適量滴鼻,藥物能到達肺部,療效較好。為防止繼發感染和異物性肺炎;每天1次肌內注射頭孢唑林鈉,用量為25 mg/(kg·bw),連用5 d。在飲水里添加電解多維供動物自由飲用,以提高機體抵抗力。通過上述治療后,28只雛孔雀只死亡5只,其他都恢復健康。