中性粒細(xì)胞功能在慢性阻塞性肺疾病患者中的變化及臨床意義

曾廷武，杜 飛

(遵義市第一人民醫(yī)院，貴州 遵義 563000)

白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、C-反應(yīng)蛋白及降鈣素原是臨床上觀察炎性反應(yīng)的常用指標(biāo)，但其結(jié)果會(huì)受諸多因素的影響，尤其是在慢阻肺患者中，往往不能完全反應(yīng)患者的炎性反應(yīng)狀態(tài)。故需進(jìn)一步探索更多的能確切反應(yīng)炎性反應(yīng)狀態(tài)的生物標(biāo)記物。中性粒細(xì)胞及其釋放的中性粒細(xì)胞明膠酶(neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL)和中性粒細(xì)胞彈性蛋白(neutrophil elastase，NE)被認(rèn)為是最具有破壞性的酶類之一，在慢阻肺的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起到重要的作用，其主要功能是分解被中性粒細(xì)胞所吞噬的外源有機(jī)分子，而釋放到細(xì)胞外的NE作用主要靶點(diǎn)為彈性蛋白[1-2]。但目前對(duì)其研究甚少，本文通過(guò)觀察慢阻肺急性加重期及穩(wěn)定期的NGAL及NE的變化，探討其在慢阻肺患者中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2016年1月～2018年1月我科門診及住院診治的慢阻肺患者120例，所有患者的病史、體征、胸部CT、心電圖、肺功能及病情嚴(yán)重程度分級(jí)均符合《中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制定的慢性阻塞性肺疾病診治指南》(2013年修訂版)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。按病程分為急性加重期和穩(wěn)定期各60例。其中急性期組男54例，女6例，平均年齡(60.2±6.5)歲，其中肺功能輕至中度阻塞30例，重至極重度30例。穩(wěn)定期組男52例，女8例，平均年齡(63.2±8.6)歲，其中肺功能輕至中度阻塞30例，重至極重度30例。兩組性別構(gòu)成、年齡等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。且入選者近2個(gè)月內(nèi)均無(wú)明顯感染史和(或)合并影響免疫功能的疾病。

1.2方法

1.2.1一般指標(biāo)檢測(cè)：采集兩組患者的空腹靜脈血，采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血常規(guī)、血脂、血糖、肝腎功能及腦鈉肽等。測(cè)定肺功能、血氧飽和度及血?dú)夥治觥?/p>

1.2.2NGAL及NE活性的測(cè)定：在慢阻肺患者入院時(shí)(24 h內(nèi))及治療后病情穩(wěn)定時(shí)的清晨空腹?fàn)顟B(tài)下取肘靜脈血5 ml，4 200 r/min離心3 min，取0.5 ml以上上清液在離心管內(nèi)，同理取健康人的血漿，-80℃冷藏備用，采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immuneabsorption assay，ELISA)檢測(cè)NGAL活性；采用比色法測(cè)定NE的活性，均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

2 結(jié)果

2.1一般情況比較：兩組患者年齡、性別、吸煙史(量、年)和BMI比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。120例患者中有15例(12.5%)患者肥胖(BMI≥30 kg/m2)，兩組間肥胖患者比例無(wú)顯著差異。24例極重度患者需長(zhǎng)期氧療。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩組患者的一般資料比較(n=60)

2.2兩組患者中性粒細(xì)胞功能的比較：兩組患者血漿中性粒細(xì)胞功能的比較：急性加重期組NGAL及NE水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者的中性粒細(xì)胞功能比較

2.3中性粒細(xì)胞功能與肺功能嚴(yán)重程度的相關(guān)分析：急性加重期慢阻肺患者NGAL和NE在肺功能輕至中度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.425、-0.448，在肺功能為重至極重度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.636、-0.724；穩(wěn)定期慢阻肺患者NGAL和NE在肺功能輕至中度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.124、-0.214，在肺功能為重至極重度的相關(guān)系數(shù)分別為-0.226、-0.221。見(jiàn)表3。

表3 兩組中性粒細(xì)胞功能與不同阻塞程度的相關(guān)分析(n=30，r值)

3 討論

慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)是呼吸系統(tǒng)的常見(jiàn)病和多發(fā)病，在我國(guó)40歲以上人群中患病率高達(dá)8.2%，預(yù)計(jì)至2020年慢阻肺將占全球死亡原因的第3位、世界疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)第5位[3]。慢阻肺的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，當(dāng)前有很多種發(fā)病機(jī)制的報(bào)道，而慢阻肺的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中炎性反應(yīng)機(jī)制占有重要的地位[4]。慢阻肺為累及氣道、肺實(shí)質(zhì)、肺血管及至全身的慢性炎性反應(yīng)。慢阻肺的全身炎性反應(yīng)包括氧化應(yīng)激、外周血炎性細(xì)胞活化和炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生等。以血清中各種炎性標(biāo)志物，包括血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、CRP和IL-6等升高為特點(diǎn)[5]。也有研究發(fā)現(xiàn)慢阻肺的發(fā)病機(jī)制中FENO、IL-17也許有關(guān)鍵影響,兩者聯(lián)合也許可以作為判斷慢阻肺病情嚴(yán)重程度的重要方法[6]。NGAL屬于脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族的一員，擁有β折疊桶型的三級(jí)結(jié)構(gòu)使其可與固醇類、激素、脂多糖(LPS)、白三烯B4 ( LTB4 )等親脂性的小分子結(jié)合[7]，此外NGAL可與某些配體特異性結(jié)合。NGAL是由中性粒細(xì)胞和某些上皮細(xì)胞如腎小管上皮細(xì)胞所分泌的微量蛋白，在急慢性炎性反應(yīng)中表達(dá)均增高。國(guó)外研究報(bào)道在慢阻肺患者的痰、支氣管肺泡灌洗液及血漿中均升高，且與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及CRP呈正相關(guān)[8]。NGAL 可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞脫顆粒釋放大量趨化因子，使炎性細(xì)胞聚集從而殺滅病原體，參與機(jī)體的固有免疫[9]，是中性粒細(xì)胞活化的標(biāo)志物，對(duì)氣道病原體感染與過(guò)敏性炎性反應(yīng)有保護(hù)作用[10]。NGAL還可與細(xì)菌的載鐵蛋白結(jié)合，從而剝奪其生存所需的鐵，使其抑制細(xì)菌生長(zhǎng)[11]。在正常生理?xiàng)l件下，NE主要起防御作用，但是其活性與內(nèi)源性蛋白酶抑制劑的調(diào)控高度相關(guān)[12]。在氣道的炎性反應(yīng)中，可誘導(dǎo)細(xì)胞釋放多種促炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)炎性細(xì)胞遷移，進(jìn)而與多種炎性介質(zhì)、補(bǔ)體和細(xì)胞因子相互作用，增加級(jí)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的形成，導(dǎo)致氣道炎性反應(yīng)[13]。

本研究結(jié)果顯示，在慢阻肺急性加重期與穩(wěn)定期兩組比較，其血漿NGAL及NE水平均明顯升高。運(yùn)用Spearman相關(guān)系數(shù)分析發(fā)現(xiàn)NGAL和NE與肺功能呈負(fù)相關(guān)，且肺功能受損越嚴(yán)重，相關(guān)性越強(qiáng)，尤其是在急性加重期。國(guó)內(nèi)孫曉鈺等研究[14]發(fā)現(xiàn)慢阻肺急性加重期患者血NGAL在治療后顯著降低，NGAL可作為評(píng)估慢阻肺急性加重期患者病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)。該研究提示血漿NGAL和NE水平在慢阻肺急性加重期明顯升高，在穩(wěn)定期明顯下降，且NGAL和NE與肺功能的受損程度呈負(fù)相關(guān)。由此可見(jiàn)NGAL和NE可反應(yīng)慢阻肺的嚴(yán)重程度，可作為慢阻肺急性加重期的血清標(biāo)志物，可用于評(píng)估病情及療效。