高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用和效果

孟 薇

（阜新市檢驗檢測認證中心，遼寧 阜新 123000）

高效液相色譜法最早源于20世紀60年代，其被廣泛應用于石油化工、環保、醫藥及生命科學領域中，并于藥品檢驗中取得一定成效。1985年，我國在藥品檢驗中滲入了高效液相色譜法，其被視為藥品質量控制主要方法[1]。高效液相色譜法進一步下細化了經典液相色譜法，具有應用效果明顯、效率高等特點。相比于經典液相色譜法，其應用了顆粒較小的均勻規則的固定相，具有較高的分離效率及較小的傳質阻抗[2]。與此同時，高效液相色譜法輸送流動相應用了高壓輸送泵，其有助于縮短時間，同時合理應用較高靈敏度的檢測器，靈敏度高，同時業務發展高效液相色譜法奠定了基礎。

1 簡析高效液相色譜法

高效液相色譜法又被稱為高壓液相色譜、高分離度液相色譜和高速液相色譜及近代柱色譜。高效液相色譜法是現階段使用范圍較廣、應用效果高且檢測速度快的一種藥品檢測、分析方法[3]。其除了可以分離分析藥物成分，與此同時，可定性定量分析藥物，所以，相比于單一的分析方法，其優點顯著，在我國藥品檢測中具有顯著作用。但是現階段，由于中藥成分等因素的作用，致使重要有效成分的研究已經成為重點。而高效液相色譜法能夠為中藥有效成分問題解決提供新的方法與思路，從而推動我國醫療視野進一步發展。基于此，本文針對高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用、原理與特點等進行了簡單分析。

2 分析高效液相色譜法原理、特點

高效液相色譜法的流動相為液體，而高壓輸液系統是色譜中相對重要的一個分支。該方法利用高壓輸液泵，混合不同比例或不同集性的溶劑，將所制流動相泵入到存在固定項的實驗色譜柱中，利用樣閥注將檢測樣品注入其中，通過流動相向柱內流通，柱內液體分離充分后，逐步向檢測器內滲入并進行有效監測，以此達到試樣化學分析[4]。從原理角度分析，從本質上來講，兩種檢測方法并未見顯著差異，其通過高效微粒固定相、高靈敏度檢測器和新型高壓輸液泵進行，充分發揮經典液相色譜法優勢。現階段，高效液相色譜法應用過程中使用了高效色譜填料及小口徑柱，通過高壓輸液泵加快溶劑流通速度，在短時間內通過色譜柱[5]。因為高效液相色譜法利用具有較高工作效率的高壓輸液泵，所以其可以快速檢測藥物成分，并利用色譜柱實施分離，從一定程度上，使分離效果及檢測速度提高。相比于經典柱色譜法，其分離速度更快，有些甚至高達1000倍，所以，高效液相色譜法特點主要包括四點，即高靈敏、高壓、高效及高速，所以，臨床應用過程中，高效液相色譜法使用范圍越來越廣[6]。

3 分析藥品含量檢測中高效液相色譜法的應用

3.1 藥品含量檢測中高效液相色譜法的應用：實驗原料中每種雜質及每種成分含量檢測過程中，均可以通過高效液相色譜法進行，其能夠在短時間內進行檢測，而且具有較高的準確性和可靠性[7]。如檢測吡羅昔康含量期間，因為該藥物是常見酰胺類化合物之一，極易被水解、氧化，致使水溶液化學穩定性較差，因此，可通過高效液相色譜法實施檢測。實際操作期間，將0.01 mol/L的鹽酸甲醇溶液視為容積，不僅有助于容積溶解性提高，同時也可促進吡羅昔康溶液穩定性提高，確保良好的檢測結果。檢測四環素類藥物過程中，利用高效液相色譜法可分離檢測四環素類康立體異構體和自身；檢測螺旋霉素發酵溶液中機酸含量過程中，可通過高效液相色譜法對機酸類型進行檢測，以便對螺旋霉素代謝機制進行分析；鹽酸萘甲唑啉是鹽酸萘甲唑啉鼻用劑型凝膠主要成分，通過高效液相色譜法檢測，通過乙腈有效析出凝膠基質中的高分子物質，以便將高分子物質堵塞液相柱問題解決，避免對檢測進行干擾。由上述內容分析，通過高效液相色譜法抽樣檢查藥品，能夠對原藥品中的雜質、成分、中間體含量準確檢查，避免流通假冒偽劣產品，進而達到用藥品安全性及質量的提高的目的[8]。

3.2 相關物質檢測中高效液相色譜法的應用：藥品運輸、制備、儲藏、使用期間均可能形成相物質，從一定程度上影響了藥品安全及質量，如制備藥品過程中，可能有中間體、副產物及異構體帶入；運輸藥瓶過程中，極易形成降解物、聚合物等。基于此，應加強對藥品影響穩定性因素進行分析，并控制具有較大毒性物質。因為具有較小的有關物質含量，因此，常規檢查的檢查結果準確性將會受到影響。如監測鹽酸特拉唑嗪片中相關物質期間，通過常規檢測法薄層色譜法對鹽酸特拉唑嗪進行檢測，其檢出限是0.025 mg/mL，具有較低的檢測靈敏度。但是，通過高效液相色譜法檢測，最小檢出限準確度可達到0.05 μg/mL。可見，高效液相色譜法有助于相關物質監測準確性及靈敏度提高。

3.3 藥物鑒別中高效液相色譜法的應用：每種藥物的藥用價值存在差異，因此需要將藥物鑒別工作做好，以便每種藥物充分發揮自身作用。通過高效液相色譜法對藥物鑒別診斷，將藥物性質、保留時間及組分結構保留下來，并將其視為藥物定性參數[9]。如鑒別南北五味子過程中，利用該方法可有效監測五味子中組分含量，通過C18柱，合理配置流動相比例，即65∶35，合理控制流速，以1.0 mL/min速度進行，設置波長為250 nm，可將南北五味子組分含量準確、快速鑒別。由上述分析，藥物鑒別中，高效液相色譜法可為藥物鑒別提供新的方法及思路。

3.4 抗生素藥品檢驗中高效液相色譜法的應用：抗生素類藥品臨床使用過程中，患者極易產生不良反應，而這一想象誘發因素有有很多，包括聚合物、中間體及降解產物等雜志，因此，必須合理控制抗生素類藥物中的每種雜志量。如定量分析氨芐西林丙磺舒分散片中雜質過程中，通過高效液相色譜法檢測，可于短期內分離降解產物、藥品主要成分及相關物質，從而更好的控制制劑限度。通過上述內容分析，檢驗抗生素藥品過程中，通過高效液相色譜法可對藥品中雜質含量有效控制，以此促進抗生素藥物作用效果。

3.5 中藥質量檢測過程中高效液相色譜法的應用：中藥組成相對復雜，而且具有較大的質量檢測難度，常規監測方法準確檢測率偏低，通過高效液相色譜法可能將中藥分離難度大、中藥成分問題解決，其被視為中藥有效成分含量檢測的主要方法。高效液相色譜法可于短期內對待檢測中藥實施分離，將藥物及其雜質分離出，以便更好的檢測、鑒別中藥成分、含量，檢查中藥質量。如檢測丹岑滴丸中黃芩苷及隱丹參酮過程中，通過高效液相色譜法，可獲取準確定量結果及分離度，彌補不足。所以，檢測中藥質量過程中，高效液相色譜法的應用，其可以有效改變常規檢驗方法，改變常規摸、看、嘗、聞等鑒別中藥方法，定量控制中藥有效成分，使中藥質量檢測發展至規范化、現代化和標準化方向。

3.6 手性藥物質量檢測中高效液相色譜法的應用：每種手性藥物于機體內的作用存在差異，包括兩種，即高效低毒和可能伴有毒害作用。手性制藥原理以化合物原理為主，以此制定作用效果明顯、藥物專一性高、不良反應小的藥物。通常情況下，手性化合物獲取方法包括不對稱合成、天然無的提取、外消旋體拆分和生物合成等[10]。現階段，色譜分離方法是常見手性藥物分析之一，其包括超臨界流體色譜、高效液相色譜和高效毛細血管電泳色譜等，在手性藥物拆分中具有重要作用。目前，高效液相色譜法被視為手性物質拆分的主要方法，針對醫務人員加強對了該部分內容的研究，其能夠對諸多手性藥物實施分離。總而言之，手性新藥研究、手性藥物代謝及質量控制過程中，高效液相色譜法應用價值較高，應用及發展前景廣泛。

3.7 藥物有效成分檢出中高效液相色譜法的應用：每一種新型藥品上市前，均需要進行嚴格檢測，對其有效成分含量密切監測，在有效成分符合相關標準后，方可上市使用和銷售。高效液相色譜法能夠對藥品組成成分有效準確判別，該方法具有較高的靈敏度和準確度，避免藥物中附加劑干擾檢測結果。如檢測鳳尾茶中黃酮含量過程中，通過高效液相色譜技術，可有效檢測含量，檢測方法方便、簡單。測定結果相對平穩，出口鳳尾茶期間，通過該技術檢測，有助于推動我國藥物出口進一步發展。據有關資料顯示，通過高效液相色譜法可以檢測不同地區、不同成熟度的黃芪藥材成分，從而比較不同時期黃芪藥物效果，與此同時，可以將質量較好的黃芪反映出來。換言之，通過高效液相色譜法有助于更好的開展藥物檢測。

3.8 非添加化學成分檢驗中高效液相色譜法的應用：因為我國近些年來市場競爭日益強烈，保健品、中成藥中通過非法方式添加化學成分已經成為制假的一種方法。所以，檢測藥品中非化學成分過程中，藥品檢驗也是一種新的方法。高效液相色譜法在藥品非化學成分檢驗過程中具有一定功效。檢測藥品成分過程中，薄層色譜法檢測相對復雜的重要期間，誤差率較高，而且專屬性有待進一步提高。而且高效液相色譜法具有較高的分析能力與分離功能，其可于短時間定量檢查、分離定性藥物成分，從而確保藥物質量，保證良好的用藥效果。

4 結束語

在我國社會經濟飛速發展的背景下，國藥產業發展速度越愛越快，藥物質量深受社會人群及醫學人員的關注，藥物檢測被視為醫藥產業管理的重點，首選，需要將藥物質量關卡工作做好，以此保證我國醫療行業平穩、持續發展。高效液相色譜法不僅具有快捷、高效、方便等特點，在儀器自動化水平方面，同樣具有顯著優點。除此之外，高效液相色譜法可有效檢測藥品含量、成分、非法添加化學成分及有關物質等。為了進一步提升我國藥品工作質量，因此需要加強對檢測技術使用、開發的關注，以便更好的發展健康事業，推動我國進一步發展。