LTB4和BLT1在類風濕關節(jié)炎中的作用

魏志萍

河南護理職業(yè)學院，河南安陽 455000

關節(jié)炎可以分為炎癥性和非炎癥性。類風濕性關節(jié)炎（RA）是一種以關節(jié)滑膜炎為主要特征的自身免疫疾病，在臨床上表現(xiàn)為關節(jié)腫脹、畸形，甚至功能喪失[1]。白三烯B4（LTB4）是一種炎癥脂質介體，由花生四烯酸經(jīng)5-脂氧合酶（5-LO）和LTA4-水解酶（LTA4H）作用產(chǎn)生[2]。LTB4 有兩個G 蛋白偶聯(lián)受體：BLT1（高親和力）和BLT2（低親和力），并且LTB4 可以誘導趨化性、脫粒和粘附等炎性相關反應[3]。研究發(fā)現(xiàn)BLT1 在中性粒細胞上高度表達，并且可以調(diào)節(jié)LTB4 在中性粒細胞中的活性[4]。經(jīng)檢測，鼠BLT1 與人類BLT1 相似，并且通過對BLT1 缺陷小鼠研究發(fā)現(xiàn)，在BLT1 缺陷小鼠的中性粒細胞中LTB4 可發(fā)揮全部活性[5]。BLT1除了存在于中性粒細胞中，還可以在巨噬細胞、平滑肌細胞、內(nèi)皮細胞、活化的T 細胞以及肥大細胞中表達[6-8]。BLT2 在人的白細胞中大量表達，但在鼠類體內(nèi)卻很難檢測到[9]。雖然BLT2 在體內(nèi)介導LTB4 功能中的作用尚不清楚，但是研究發(fā)現(xiàn)BLT2與第二種脂質配體12-（S）-hydroxy-5Z，8E，10E-十七碳三烯酸（12-HHT）的親和力比BLT1 高[10]。

使用動物模型研究類風濕關節(jié)炎的致病機制可為臨床治療提供依據(jù)。有研究表明LTB4 和BLT1 在小鼠類風濕關節(jié)炎發(fā)病機制中具有非常關鍵的作用[11]。現(xiàn)對LTB4 和BLT1 對類風濕關節(jié)炎的作用的最新研究作如下綜述，以期為臨床治療類風濕關節(jié)炎提供理論基礎。

1 LTB4-BLT1在膠原誘導的關節(jié)炎中的作用

Ⅱ型膠原誘導的關節(jié)炎（CIA）動物模型在目前研究中廣泛使用，通過將完全弗氏佐劑（CFA）與Ⅱ型膠原蛋白（CII）充分乳化，制成CII 乳劑進行皮內(nèi)注射，進而引發(fā)關節(jié)炎[12]。C. Han 等[13]通過對大鼠CIA 模型進行研究，發(fā)現(xiàn)在CIA 發(fā)病早期滑膜中檢測到BLT1 mRNA 表達，并且BLT1 在外周血單個核細胞中表達較高。W.H. Shao[14]通過BLT1基因敲除（Blt1-KO）CIA 小鼠研究BLT1 在CIA 發(fā)病中的作用，發(fā)現(xiàn)Blt1-KO 小鼠體內(nèi)T 細胞和B 細胞的表達完全無CIA 癥狀，但其體內(nèi)抗CII 抗體的表達卻與CIA 模型小鼠相一致，這表明BLT1 的抑制與CII 膠原抗體的產(chǎn)生無關。此外，在CIA 模型小鼠的滑膜組織中檢測到CD3+T 細胞的表達，在Blt1-KO 小鼠滑膜組織中并未檢測到[11，14]。這些數(shù)據(jù)表明，BLT1 可能通過促使T 細胞進入關節(jié)組織，從而在關節(jié)炎發(fā)病機制中發(fā)揮關鍵作用。

2 LTB4和BLT1在K/BxN血清轉移性關節(jié)炎中的作用

K/BxN 血清轉移性關節(jié)炎小鼠模型是將識別MHC II 類分子呈遞的牛核糖核酸酶肽的T 細胞受體（TCR）轉基因KRN 小鼠與NOD 小鼠交配來制作的，K/BxN 小鼠從約5 周齡起自然發(fā)展為關節(jié)炎[15]。中性粒細胞進入關節(jié)需要BLT1，M. Chen 等[16]經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，在K/BxN STA 模型中，Blt1-KO 小鼠可以完全抑制關節(jié)炎的發(fā)展，如果將野生型小鼠的中性粒細胞過繼轉移至Blt1-KO 小鼠中則可引發(fā)小鼠出現(xiàn)關節(jié)炎癥狀，表明在關節(jié)炎的發(fā)病過程中中性粒細胞是BLT1 的關鍵應答細胞。此外，5-LO 和LTA4H 作為LTB4 合成的關鍵酶，在關節(jié)炎的發(fā)展過程中也發(fā)揮著非常重要的作用。如果將野生型小鼠的中性粒細胞過繼轉移至5-LO 基因敲除（Alox-5-KO）小鼠中同樣可引發(fā)小鼠出現(xiàn)關節(jié)炎癥狀，表明中性粒細胞也是產(chǎn)生LTB4 的主要細胞[16]。

在Blt1-KO 小鼠中，野生型小鼠的中性粒細胞過繼轉移可以導致趨化因子的產(chǎn)生，并使Blt1-KO小鼠的中性粒細胞聚集到關節(jié)中，該發(fā)現(xiàn)首次證明一旦關節(jié)炎發(fā)病，則BLT1 對于嗜中性粒細胞進入關節(jié)不再是必須的，趨化因子可以促進和趨化中性粒細胞進入關節(jié)[4]。此外，CC 類趨化因子受體1（Ccr1）和CXC 趨化因子受體2（Cxcr2）基因敲除也可以抑制小鼠關節(jié)炎早期和晚期的發(fā)展，如果同時敲除CCR1 基因和CXCR2 基因的小鼠完全不會產(chǎn)生關節(jié)炎的癥狀[17]。此外，我們發(fā)現(xiàn)C5a-C5aR途徑可以誘導中性粒細胞產(chǎn)生LTB4，而ICs 通過激活FcγR 誘導中性粒細胞產(chǎn)生IL-1β[18]。因此，在K / BxN STA 模型中，BLT1 在關節(jié)炎發(fā)展的早期促使第一個嗜中性粒細胞進入關節(jié)，一旦中性粒細胞進入關節(jié)，則會激活FcγR 的免疫復合物從而產(chǎn)生IL-1β，進而誘導關節(jié)內(nèi)的細胞（如成纖維樣滑膜細胞和巨噬細胞）產(chǎn)生趨化因子如CCR1 配體和CXCR2 配體，促進關節(jié)內(nèi)嗜中性粒細胞的產(chǎn)生和聚集。有研究[19]采用活體多光子成像技術，對K/BxN STA 模型小鼠關節(jié)進行觀察，從而發(fā)現(xiàn)C5aR，BLT1，CCR1 和CXCR2 這四種趨化因子受體協(xié)同調(diào)節(jié)中性粒細胞在IC 介導的關節(jié)炎中的產(chǎn)生。在關節(jié)炎的起始階段，由關節(jié)內(nèi)皮產(chǎn)生的C5a 啟動嗜中性粒細胞的粘附，隨后BLT1 介導的第一個嗜中性粒細胞滲入關節(jié)，CCR1 促進嗜中性粒細胞在關節(jié)內(nèi)皮上的附著，而CXCR2 保證了嗜中性粒細胞的存活和增殖活動。

3 LTB4-BLT1在RA發(fā)病機制中的作用

LTB4-BLT1 途徑在關節(jié)炎動物模型中參與類風濕關節(jié)炎的發(fā)病，并且抑制該途徑能夠顯著改善關節(jié)炎癥狀。因此，探索LTB4-BLT1 在RA 中的作用，可能為RA 的治療提供新的方向。Gursel 等[20-21]研究表明，RA 患者體內(nèi)LTB4 表達明顯升高，活動期RA 患者血清中LTB4 表達水平顯著高于非活動期RA 患者。此外，與骨性關節(jié)炎（OA）患者相比RA 患者的滑液中的LTB4 的表達水平顯著升高，但是RA 患者外周血液中性粒細胞釋放LTB4 的量卻與正常中性粒細胞一樣[22]。RA 患者滑膜組織中BLT1 和BLT2 mRNA 的表達高于OA 患者，并且BLT2 mRNA 在滑膜內(nèi)襯細胞（如滑膜巨噬細胞和FLS ）中高度表達[23]。此外，在成纖維樣滑膜細胞（FLS）中主要表達的LTB4 受體為BLT2，LTB4 通過BLT2 誘導RA FLS 產(chǎn)生TNF 和IL-1 從而發(fā)揮作用[24]。然而，BLT1 mRNA 的表達與關節(jié)炎動物模型相似，主要在關節(jié)滑液中[23]。

LO 是產(chǎn)生LTB4 所必須的酶，研究表明RA 患者滑膜組織中5-LO 的表達顯著高于OA 患者，且5-LO 主要表達于RA 滑膜內(nèi)襯的巨噬細胞，嗜中性粒細胞和肥大細胞中，經(jīng)過糖皮質激素治療可降低RA 關節(jié)組織內(nèi)5-LO 的表達[25]。這些數(shù)據(jù)表明，LTB4 是在關節(jié)內(nèi)被誘導產(chǎn)生的，并通過其受體BLT1 和BLT2 促進了RA 的發(fā)病。

4 結論

LTB4-BLT1 途徑對關節(jié)炎動物模型及RA 患者均有明顯的治療作用，表明對LTB4-BLT1 途徑的阻斷可能是RA 等關節(jié)炎患者的一種治療策略。但是，迄今為止的臨床試驗表明，與傳統(tǒng)的DMARDs相比，口服LTB4 受體和5-LO 抑制劑的臨床效果并不是太理想，因此有人認為LTB4-BLT1 途徑在RA 患者的治療作用是有限的。但是這并不意味著否定LTB4-BLT1 途徑在RA 治療中的效果，我們可以進行更適合的臨床試驗的設計，以探索其治療途徑。我們可以通過探索該途徑是否僅針對RA 患者的早期階段，或僅針對血清反應陽性的患者。因此，我們需要進一步的臨床研究來闡明LTB4 和BLT1在人類RA 發(fā)病機制中的作用。