固元酒增強免疫力功能的實驗研究

孫澤兵

河北省清河縣中心醫院藥劑科，河北 邢臺 054800

1 材料與方法

1.1 受試物 固元酒以人參10 g、枸杞子25 g、淫羊藿25 g、覆盆子20 g，加8倍量50%vol的白酒浸泡30天，每周攪拌2次，加白酒調配至36%vol，制成1,000 mL。每日服用100 mL。按100 mL濃縮至6 mL的比例濃縮，取分別取6 mL、2 mL、1 mL濃縮液加入6 mL 50%vol的白酒配置成20 mL的灌胃液，灌胃劑量為10 mL/kg，即高、中、低劑量組（3、1、0.5 mL/kg），為人體推薦劑量的30、10和5倍。同時用50%vol的白酒配置15%vol酒精液作為酒精對照。

1.2 儀器 電子秤、電子天平、酶標儀、紫外分光光度計

1.3 試劑 小牛血清、1640培養液；LDH基質液。

1.4 實驗動物 SPF級昆明種小鼠50只隨機分為5組，每組10只，即對照組、酒精對照組、高、中、低劑量組。灌胃1次/d，連續30 d。給藥結束后，頸椎脫臼處死小鼠，取脾臟稱重，后制成脾細胞混懸液。

1.5 方法[1]

1.5.1 脾淋巴細胞轉化試驗（MTT法） 將脾細胞混懸液調整為3×106個/mL，分兩孔加入24孔培養板中，一孔加ConA液，另一孔做對照。置5%CO2，37 ℃培養箱中培養72 h。培養結束前4 h，每孔吸去上清液0.7 mL，加入0.7 mL不含小牛血清的1640培養液，同時加入MTT 50 μl/孔，繼續培養4 h。結束后，每孔加入1 mL酸性異丙醇，使紫色結晶完全溶解。測定OD值。

1.5.2 NK細胞活性測定（LDH法） 將脾細胞混懸液調整為2×107個/mL（效應細胞），傳代后的YAC-1細胞調整為4×105個/mL（靶細胞），效靶比50:1，加入U型96孔培養板；最大釋放孔加靶細胞和1%NP40各100 μL，另設靶細胞，各設3個重復孔，于37 ℃、5%CO2條件下培養4 h，離心，每孔吸取上清液置平底96孔培養板中，加入LDH基質液，反應3 min，每孔加入1 mol/L的HC1終止反應。測定OD值。

1.5.3 數據統計 （1）MTT法：用加ConA孔的OD值減去不加ConA孔的OD值代表淋巴細胞的增殖能力。（2）LDH法：NK細胞活性%=（反應孔OD-自然釋放孔OD）/（最大釋放孔OD-自然釋放孔OD）。P＜0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 對小鼠體重的影響 酒精對照組及三個劑量給藥組小鼠的實驗前后體重與對照組比較均無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 小鼠實驗前后體重的變化（Mean±SD, g）

2.2 對小鼠淋巴細胞增殖能力和NK細胞的影響 中、高劑量組淋巴細胞增殖能力明顯高于空白對照組（P＜0.05）；中、高劑量組NK細胞活性率相較于對照組顯著增加（P＜0.05）。

表2 對小鼠淋巴細胞增殖能力和NK細胞的影響（Mean±SD）

3 討論

中醫自古有元氣論，養本固元，為養生之根本。本品采用人參、枸杞子、淫羊藿、覆盆子制成固元酒，取之大補元氣、滋陰添精，補腎固本之效。研究結果表明，固元酒通過Con A誘導脾淋巴細胞的增殖來刺激免疫活性細胞的增殖，并能提高NK細胞的轉化率，從而提高機體的細胞免疫能力。