實時無標記細胞分析（RTCA）與CCK-8方法條件下LPS對奶牛乳腺上皮細胞增殖的比較分析

呂亞南，趙儉，姚競杰，安志興，郭利亞，張曉建

（河南科技學院動物科技學院，新鄉 453003）

乳腺炎是泌乳牛乳房容易發生的一種持續性炎癥性疾病。革蘭氏陰性菌的大腸桿菌是引起奶牛乳腺炎的主要致病菌之一。脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）來源于大腸桿菌的外膜，可刺激乳腺上皮細胞（MAC-T）分泌多種炎癥因子、趨化因子等，適合用于炎癥狀態下MAC-T功能的研究。革蘭氏陰性菌的脂多糖在許多其他疾病過程中也表現出相當多樣的致病或調節作用，一直是人們關注的焦點。

實時無標記細胞功能分析(real time cell analysis，RTCA)，是利用RTCA儀器，采用非侵入性、基于阻抗的實時細胞生物傳感器系統，通過鍍金傳感器電極的電子電阻讀數（該電極位于E-Plate16板的底部），對細胞進行不間斷、無標記和實時分析[1]。據文獻報道，1984年研究人員首次將電子阻抗傳感器用于細胞過程的實時檢測[2]。微電子芯片測得的電阻抗反映了細胞的生長、伸展、形態變化、死亡和貼壁等一系列生理狀態。在電極上細胞較多的情況下，CI值較高。而且阻抗的變化，還與細胞黏附在電極上的寬度、數量和質量有關。RTCA的CI測量可用于細胞群落變化的全面實時監測，具有高度的一致性和可重復性。通過使用這種方法，可以實時監測細胞，并使用CI值作為確定細胞增殖率、細胞毒性效應和遷移能力的指標，而不會中斷數據收集或造成外部誤差。

此外，在RTCA系統運行期間，可在任何時間間隔進行終點分析，相比顯微鏡和分子分析等方法具有一定優勢[3]。……