液質聯用檢測消腫止痛中成藥的氨基比林及雙氯芬酸鈉

于琦　劉欣　李翰麟

摘要：目的 對液質聯用檢測消腫止痛中成藥的氨基比林及雙氯芬酸鈉進行研究。方法 采取C18柱分離，以乙腈-水作為流動相梯度洗脫，流速為0.5ml·min-1，所采取的檢測波長為280nm，所采取離子源為ESI源，正負離子交替方式實施定性檢測，HPLC測量含量。結果 在四批受試制劑當中有兩批受試劑當中檢測到存在違法添加雙氯芬酸鈉，一批檢測到違規添加氨基比林。結論 液質聯用檢測方式具有較強選擇性以及高靈敏度，能夠成為消腫止痛中成藥的氨基比林及雙氯芬酸鈉的檢測方式之一。

關鍵詞：液質聯用檢測;消腫止痛中成藥;氨基比林;雙氯芬酸鈉

【中圖分類號】R285.6? 【文獻標識碼】A?? 【文章編號】1673-9026（2020）10-106-01

眾所周知，風濕性關節炎在中醫當中被稱為痹癥，中醫藥物作為國粹，在治療痹癥中有著較大的優勢，治療以及調理效果兼備，然而大多數的中藥雖然不良反應出現率較低，但是效果起效時間慢^[1]。很多不法商家利用人們信賴中藥效果但急于求成的心態，在中藥制劑當中非法添加一些化學藥物，進而達到提升藥物效果的作用。患者如果長期服用這類藥物極有可能會發生極為嚴重的不良反應。在檢定中藥制劑時，如果單純采取液相色譜測定將存在分離困難情況，大大增加假陽性情況^[2]。因此，選擇更加靈敏以及快速的檢測方式極為重要。本文正是基于此，對液質聯用檢測消腫止痛中成藥的氨基比林及雙氯芬酸鈉進行研究，具體研究情況如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

本研究所使用的儀器為Agilentl200-6310離子脫液質聯用儀，配備有1200系統、電噴霧源、紫外檢測器，Agilent色譜化學工作站，電子天平。所有的儀器均經過校正以及檢定。

1.2試藥

研究隨機采取的試藥為雙氯芬酸鈉對照品以及氨基比林對照品，色譜純為乙睛，水則為重蒸餾水，所使用的其他試劑為分析純。

2線性關系考察

2.1 HPLC法

分別選擇1、5、10、25以及50毫升的雙氯芬酸鈉以及氨基比林對照品儲備液放置在同一個100毫升量瓶當中，增加流動相稀釋到相關刻度的刻度濃度溶液，將其搖勻，依據色譜條件依次使用10ul，對峰面積進行測定，分別采取雙氯芬酸對照品和氨基比林對照品進樣濃度作為橫坐標，峰面積作為縱坐標進行回歸，結果發現，雙氯芬酸鈉以氨基比林進樣濃度為5至250ug·ml-1以及1至50ug·ml-1范圍內線性良好。

2.2MS法

采取多反應監測模式，采取上述HPLC法當中的含氨基比林以及雙氯芬酸鈉濃度溶液對離子氨基比林進行檢測，結果發現，雙氯芬酸鈉以及氨基比林質譜響應情況較好。

2.3精密度試驗

選取25ug·ml-1氯基比林以及5ug·ml-1的雙氯芬酸鈉對照品混合溶液依據色譜條件進行六次重復進樣后發現，氨基比林以及雙氯芬酸鈉峰面積分別為0.46%和0.39%。

2.4重復性實驗

選取樣品溶液依據色譜條件進行六次重復測定，結果發現氨基比林平均含量為每粒63.57mg，雙氯芬酸鈉為每粒25.63mg。

2.5耐用性試驗

選擇供試品溶液依據色譜條件，選擇三根不同品牌的十八烷基硅烷健合硅膠作為填充劑的色譜柱實施實驗，結果發現該方式具備良好的耐用性。

2.6最低檢出限定以及定量限

選擇對照品溶液對其進行不同比例稀釋之后測定發現，雙氯芬酸鈉以及氨基比林最低檢測限分別是0.3ng以及0.1ng，定量限分別是1.0ng以及0.3ng。

2.7穩定性試驗

選擇樣品溶液在室溫當中進行0、2、4、6、8以及12小時之后依據色譜條件進行測定后發現，雙氯芬酸鈉以及氨基比林面積值為0.61%以及0.58%，說明該樣品溶液在12之內較為穩定。

2.8加樣回收實驗

樣品加樣溶液制備選擇已知含量樣品九份分別加入高、中以及低三個濃度氨基比林以及雙氯芬酸鈉對照品混合溶液，將其均分為三份，對其含量進行測定，計算起加樣回收率后發現，氨基比林平均回收率為99.33%，RSD為0.4%，雙氯芬酸鈉平均回收率為99.50%，RSD為0.52%，說明該檢測方式具備良好準確性。

2.9HPLC-UV樣品測定

分別選擇四批消腫止痛中藥制劑進行樣品溶液制備，精密吸取10ul的經過0.22um微孔濾膜過濾之后的樣品溶液以及對照品溶液，依據色譜條件發現樣品一當中的色譜圖中存在和雙氯芬酸鈉以及氨基比林一致的色譜峰，樣品二色譜圖當中發現和雙氯芬酸鈉有著保留時間一致的色譜峰，剩余的樣品當中并沒有檢出和雙氯芬酸鈉以及氨基比林保留時間一致的色譜峰。采取外標法對樣品含量進行計算后結果如下表1。

結論

在本文研究當中，采取液相色譜-離子阱質譜聯用法能夠使用質荷比篩選方式得出復雜基質當中的單一組分色譜圖，不需要進行和干擾組分間完全色譜分離，該方式操作簡單，具備較強的抗干擾能力，可以有效避免出現假陽性結果情況^[3]。此外，這一方式所耗費的分析時間較短，樣品處理方式簡單，還具備能夠定性以及定量添加物等等優勢^[4]。

參考文獻

[1]張甦，胡青，孫健等.液質聯用檢測中成藥和保健食品中非法添加的48種抗生素類成分[J].中成藥，2015，37（3）：542-548.

[2]楊麗蓉，趙紅磊，趙海鵬等.HPLC-DAD/MS法測定抗風濕中成藥中非法添加10種抗風濕化學成分[J].中國藥品標準，2018，19（3）：235-240.

[3]馮向東，張玉潔，王戈等.HLB固相萃取-HPLC-MS/MS法測定烏雞白鳳（小蜜丸）中氯霉素殘留[J].中國藥事，2016，30（10）：1009-1014.

[4]陳立群，曹云飛.UPLC-MS法測定降壓類中成藥和保健食品中非法添加硝苯地平的含量[J].黑龍江醫藥，2016，29（1）：3-5，6.