血友病基因治療的研究進展

劉嘉榆，鄭夢琪，陳 菡，李斌斌，湯 維，章國衛

(杭州師范大學 醫學院，浙江 杭州 311121)

血友病是X性聯隱性遺傳病，是由于凝血因子缺失而導致的凝血障礙。血友病A患者缺失凝血因子VIII(FVIII)，FVIII基因較大(180 kb)且其蛋白結構復雜，血友病B患者缺失凝血因子IX(FIX)，FIX基因相對較小(34 kb)且其蛋白結構較為簡單。基因及蛋白結構的不同導致血友病A和血友病B在疾病的發生、特點以及產生的抑制物的危險程度上都有區別。血友病A患者占血友病患者總數的85%，血友病A重度患者的比例(45%)高于血友病B(35%)，血友病A患者產生中和抗體的比例高于血友病B患者[1]。

隨著基因與載體研究的突破，血友病的基因治療獲得了較大的發展。維持長期高濃度的凝血因子表達是血友病基因治療的主要問題，通過改造凝血因子編碼基因以增加基因表達效率或增強凝血因子活性成為提高基因治療效果的一個重要途徑。應用于基因治療的病毒載體主要包括腺病毒載體、腺相關病毒載體(AAV)、逆轉錄病毒載體和慢病毒載體(LV)，血友病基因治療主要集中于使用腺相關病毒載體和慢病毒載體。同時，基因組編輯工具(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins, CRISPR/Cas9)的發展也為基因治療提供了新的手段。本文圍繞治療基因、載體和靶細胞，總結血友病基因治療的研究進展，對血友病基因治療的優勢和風險做綜合性分析。

1 治療基因

1.1 FIX基因 高凝血活性FIX突變體FIX-R338L的發現為血友病B的基因治療提供了新途徑。FIX-R338L發現于一名易栓癥病人，是自然發生的單氨基酸替換的FIX突變體，FIX的338位的精氨酸被亮氨酸替代，導致FIX的催化結構域發生改變，使其在維持相同蛋白表達水平的情況下活性增加到野生型FIX的5～10倍[2]。……