異常凝血酶原和甲胎蛋白檢測在肝細胞癌中的診斷價值

彭 菁 焦方舟 李 汛 楊 凡 王魯文

武漢大學人民醫院感染科 (湖北 武漢， 430060)

近年來，針對可能發生肝細胞癌(HCC)的高危人群實施腫瘤監控和篩查，使HCC的早期診斷得以實現。血清甲胎蛋白(AFP)作為HCC的一種經典的腫瘤標志物已在臨床上廣泛應用。然而，它的敏感性和特異性仍不夠理想，多種非惡性肝病，如急性、慢性肝炎和肝硬化，也可導致AFP增高[1]。血清異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)是維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導的蛋白質。研究發現，PIVKA-Ⅱ血清水平升高與HCC密切相關，可作為另一種敏感的腫瘤標志物[2]。本研究通過檢測HCC患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平，探討其在HCC中的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017年11月至2018年5月在武漢大學人民醫院感染科收治的肝病患者90例，其中HCC患者30例(HCC組)，肝硬化患者30例(肝硬化組)，慢加急性肝衰竭患者30例(慢加急性肝衰竭組)。HCC患者均經病理組織學或CT或MRI確診，且未行肝動脈化療栓塞、射頻消融、肝臟外科切除等相關治療。肝硬化患者均排除HCC的存在。慢加急性肝衰竭的診斷符合中華醫學會感染病學分會肝衰竭與人工肝學組制定的《肝衰竭診治指南(2012年版)》標準[3]。排除標準：①排除所有近期服用華法林抗凝劑和維生素K等藥物的患者；②排除合并高血壓、冠心病以及嚴重腎功能不全的患者；③排除意識、溝通交流及智力障礙的患者。

1.2 方法 采集所有患者的清晨空腹血5 ml，3 h內送檢。PIVKA-Ⅱ的檢測采用日本富士G1200化學發光免疫分析儀及配套試劑，嚴格按照儀器和試劑說明書進行操作(參考值范圍為<40 mAU /ml)；AFP的檢測采用CentaurXP全自動免疫分析儀(參考值范圍為<8.1 ng /ml)。應用受試者工作特征曲線(ROC)評價PIVKA-Ⅱ和AFP在HCC診斷中的臨床價值。

2 結果

2.1 3組患者一般資料 HCC組患者30例，男21例，女9例；年齡(58.33±8.75)歲。慢加急性肝衰竭組患者30例，男22例，女8例；年齡(54.43±6.22)歲。肝硬化組患者30例，男18例，女12例；年齡(57.73±8.16)歲。3組患者在一般資料方面比較，差異無統計學意義，具有可比性。

2.2 3組患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP的檢測結果 各組患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP的水平均不符合正態分布，故各組結果采用中位數P50(P25，P75)表示。結果見表1。

表1 各組患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平比較

與HCC組比較，*P<0.01

2.3 PIVKA-Ⅱ和AFP對HCC的診斷價值評價 通過SPSS軟件做ROC曲線圖(見圖1)。曲線下面積(AUC)反映指標的診斷效能，AUC越接近于1表明診斷效果越好。PIVKA-Ⅱ和AFP診斷HCC的AUC分別為0.953和0.838。為了獲得最佳的敏感性和特異性，將約登指數值(敏感性+特異性-1)最大的點作為臨界點。計算得到PIVKA-Ⅱ和AFP的最大約登指數分別為0.833和0.617。ROC曲線中PIVKA-Ⅱ和AFP的最佳截點值分別為129.50mAU /ml和231.65ng/ml。此時，PIVKA-Ⅱ和AFP的敏感性分別為90.00%和70.00%。PIVKA-Ⅱ和AFP的特異性分別為93.30%和91.70%。

圖1 PIVKA-Ⅱ和AFP診斷HCC的ROC曲線圖

2.4 各組患者的PIVKA-Ⅱ和AFP的相關性分析 運用散點圖和Spearman相關分析，結果顯示在HCC組患者中，PIVKA-Ⅱ和AFP分別獨立升高，兩者無相關性(R=-0.090，P=0.636)(見圖2A)；慢加急性肝衰竭組患者的PIVKA-Ⅱ和AFP無相關性(R=-0.247，P=0.188)(見圖2B)；肝硬化組患者的PIVKA-Ⅱ和AFP無相關性(R=-0.199，P=0.530)(見圖2C)。

A:HCC組

B.慢加急性肝衰竭組

C.肝硬化組

3 討論

我國是病毒性肝炎高發區域，HCC的發生率及死亡率均較高。2010年，平均每100 000人就有29例發生HCC，每100 000人就有28.1死于HCC[4]。HCC是最常見的原發性肝癌。美國HCC的5年生存率不足12%[5]。HCC發病隱匿，疾病早期缺乏典型臨床癥狀，很多患者就診時已處于晚期階段，無法進行手術切除和肝移植治療。因此，早期診斷是提高HCC生存率的關鍵。正常生理情況下，AFP是目前診斷HCC的常用標志物。HCC中AFP 20 ng/ml的血漿濃度通常被用作人體病理閾值，AFP超過400ng /ml通常被認為是診斷HCC的可靠指標[6]。最近的研究分析表明，AFP作為HCC的腫瘤標志物缺乏足夠的敏感性和特異性。研究發現高達40%的HCC患者血清AFP水平是正常的，尤其是HCC早期階段，表明AFP診斷HCC的敏感性不足。除HCC患者有異常的AFP水平，慢性肝炎、肝硬化患者可見異常升高的AFP水平[7]。有研究報道，非精原細胞瘤型睪丸腫瘤患者可出現高血漿濃度AFP。表明AFP的診斷HCC的特異性未達到令人滿意的效果。

大量研究發現，PIVKA-Ⅱ的產生與HCC密切相關，但具體的發生機制尚未明了。研究發現，HCC患者腫瘤組織每個內源性微粒體凝血酶原前體的單位中γ-谷氨酰基羧化酶的活性較非HCC肝組織降低[8]。此外，研究還發現，在HCC患者的癌組織中維生素K水平明顯低于非癌組織中[9]。這些研究表明，HCC患者血清PIVKA-Ⅱ水平升高的機制可能與異常γ-谷氨?；然傅幕钚约熬植堪┙M織中的維生素K缺乏相關。

本研究檢測30例HCC患者和60例非HCC患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平，結果發現HCC患者PIVKA-Ⅱ和AFP水平顯著高于肝硬化和慢加急性肝衰竭患者。通過ROC曲線評價PIVKA-Ⅱ和AFP在診斷HCC中的臨床價值，結果顯示，PIVKA-Ⅱ診斷HCC的敏感性和特異性分別為90.00%、93.30%，而AFP敏感性和特異性分別為70.00%、91.70%，提示PIVKA-Ⅱ診斷HCC的敏感性、特異性均優于AFP。本研究還通過散點圖和Spearman相關分析，發現PIVKA-Ⅱ和AFP間無相關性。這表明，PIVKA-Ⅱ和AFP檢測可聯合檢查用于HCC的早期篩查。