玻璃化冷凍對家畜卵母細胞細胞生物學性狀影響的研究進展

王晶晶，郝海生，杜衛華，劉 巖，龐云渭，趙善江，閆長亮，趙學明*，朱化彬

（1.中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所，家畜胚胎工程與繁殖創新團隊，北京 100193；2.中國牧工商（集團）總公司，北京 100070）

1977 年Whittingham[1]第1 次通過慢速冷凍法冷凍小鼠卵母細胞并解凍后成功產下子代，引起世界關注。Rall 首次發明了玻璃化冷凍法，該方法是通過在冷凍過程中使胞質溶液的黏度隨溫度降低而增加，形成無規則的玻璃化固體，通過減少冰晶形成而降低細胞損傷[2]。相較于慢速冷凍法，玻璃化冷凍法操作簡便、成本低、傷害更低、效果更優[3]。卵母細胞玻璃化冷凍保存形成的卵子庫消除了時間空間的差異[4]，保存生育力尤其是可能失去生育能力的婦女，并且避免了冷凍胚胎產生的宗教、道德、法律問題[5]，對家畜胚胎生物技術和人類輔助生殖都具有十分重要的意義。在小鼠卵母細胞玻璃化冷凍取得成功后，隨后在猴子[6]、人[7]、兔[8]、牛[9]、馬[10]等各種哺乳動物的玻璃化冷凍卵母細胞也取得成功。

雖然玻璃化冷凍卵母細胞有很多優良特性和便利條件，但仍與新鮮卵母細胞的發育潛力有很大差距。玻璃化冷凍的卵母細胞發育潛力降低，仍存在受精率、卵裂率、囊胚率較低等問題[11]。本文通過闡述玻璃化冷凍對卵母細胞造成的傷害，進一步了解玻璃化冷凍卵母細胞的變化，從而為改善玻璃化冷凍卵母細胞的質量提供思路。

1 玻璃化冷凍對卵母細胞細胞結構的影響

1.1 細胞核

1.1.1 GV 期卵母細胞和MII 期卵母細胞 玻璃化冷凍會導致小鼠GV 期卵母細胞核無秩序、不成熟的染色體壓縮、核質的混合及卵母細胞核恢復之后細胞核碎片進入細胞質的具象化[12]，這可能不利于卵受精后的發育[12]（表1）。……