王文佳,李存法,王瑞寧,連瑞麗,安玉甫
(1.河南牧業經濟學院 制藥工程學院,河南 鄭州450046;2.杭州惠通生物技術有限公司,浙江 杭州 310006)
豬繁殖與呼吸綜合征 (porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的,以妊娠母豬晚期流產、早產、死產和產弱仔數量增加,及新生仔豬與肥育豬嚴重呼吸障礙為主要特征,發病豬多呼吸困難,或腹式呼吸[1]。PRRSV侵入豬體內后,首先侵襲肺泡巨噬細胞和肺內皮巨噬細胞[2],在細胞內大量繁殖,最終導致巨噬細胞的崩解,產生炎癥,造成肺部組織肉樣化病變。目前對PRRS的診斷主要有臨床癥狀檢查、血清學診斷、分子生物學診斷及病理學診斷等多種方法[3]。對PRRSV的研究也主要集中在病毒基因組、流行病學調查及病毒遺傳變異演化方面[4]。而PRRSV的病毒含量對肺臟組織的損害程度是否呈現一定的相關性,研究較少。本實驗采集4頭疑似感染PRRSV豬的肺臟組織,利用臨床剖檢、熒光定量RT-PCR、病理切片等方法,探究肺臟病變、顯微病變與PRRSV病毒含量的相關性。
通過豬場巡欄、豬只解剖,采集4只豬的肺臟病料送至杭州惠通豬醫院進行檢測,豬只信息及肺臟組織臨床病變見表1、圖1。
利用熒光定量RT-PCR方法檢測豬PRRSV的ORF5(M)基因,同時制作肺臟組織病理切片進行顯微觀察。

表1 樣本基本信息

圖1 豬肺部組織剖檢情況
剖檢豬肺臟,案例一豬只肺臟組織大體無病變,案例二肺臟輕微病變,案例三肺臟中度病變,案例四肺臟嚴重間質性病變。
案例一、二、三、四熒光定量RT-PCR結果見表2,圖2。……