餓螞蝗對動物消炎止痛的作用研究

袁冬磊 謝瑩 王穎

摘 要：為了研究喂食不同濃度餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠的痛覺調節作用，通過在大鼠足底注射鹿角菜致炎，對炎癥大鼠喂食濃度分別為5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的餓螞蝗水煮液，采用行為測痛的方法記錄與觀察在5 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min和60 min時間點上的大鼠后爪縮爪反應潛伏期（Hindpaw Withdrawal Latency，HWL），與喂食生理鹽水作為比較，觀察餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠痛覺調節活動的影響。結論：在將餓螞蝗水煮液喂食給炎癥大鼠之后，與注射同等劑量的生理鹽水相比，HWL明顯延長。餓螞蝗水煮液明顯延長了炎癥模型大鼠的HWL，表明餓螞蝗水煮液對炎癥大鼠具有一定的消炎止痛作用，即餓螞蝗水煮液參與了炎癥模型大鼠的痛覺調節。

關鍵詞：餓螞蝗水煮液;致炎大鼠;消炎止痛

文章編號：1004-7026（2019）19-0106-05? ? ? ? 中國圖書分類號：R285 ? ? ? ? 文獻標志碼：A

餓螞蝗又名山螞蝗、胃痛草，為豆科薔薇目雙子葉被子植物，主要生長于海拔600～2 300 m的山坡草或林緣。餓螞蝗植物資源豐富，分布于廣西、貴州、云南等地，其性涼、味苦，據《中華本草》記載有活血止痛、解毒消腫等功效。現代研究表明，餓螞蝗的成分主要有有機酸、黃酮類、酚類以及三萜類，至今尚未發現有餓螞蝗對動物發揮消炎止痛作用的相關研究[1-2]。

為了對餓螞蝗所發揮的消炎止痛效果進行深入研究，試驗選用鹿角菜來使大鼠致炎，通過喂食餓螞蝗水煮液的方法，利用壓板及熱板測痛儀對大鼠開展痛覺測驗，以此來研究餓螞蝗所發揮的消炎止痛作用，以期為其鎮痛作用機制的研究提供初步方向。

1? 試驗材料

1.1? 試驗動物

試驗使用雄性Wistar大鼠8只，體重控制在200～210 g之間。在試驗的過程中，大鼠必須分籠喂養，自由進水進食，維持充足的光照，其溫度應當維持在（22±2）℃，確保穩定的生活條件。試驗過程中必須盡可能降低大鼠的使用頻率，盡量避免大鼠受到其他因素的影響。

1.2? 試驗試劑

餓螞蝗：購買于義善堂大藥房。

生理鹽水：長春豪邦藥業有限公司制造。

鹿角菜：SIGMA公司制品。

1.3? 試驗儀器

灌胃針：深圳瑞沃德公司。

智能熱板儀（YLS-6B）和電子壓痛儀（YLS-3E）：安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司。

2? 研究方法

2.1? 炎癥大鼠模型建立

通過將鹿角菜注射在大鼠的右側足底（鹿角菜必須現用現配，避免變質），創建起致炎大鼠模型。注射時間應當保持在行為測試之前的3 h，在注射之后的3～4 h，大鼠的后爪將會紅腫發炎，皮溫將會顯著提升，這時可以開始進行判斷炎癥輕重的痛覺測試。在進行相關試驗之前，需要對大鼠開展壓板及熱板的測試訓練，其核心目的在于促使大鼠充分熟悉測試環境，從而盡可能減少因不熟悉環境而產生的誤差。訓練維持一周，4輪/d，3次/輪。

2.2? 餓螞蝗水煮液母液及不同濃度水煮液的制備

將餓螞蝗進行稱量，并置于瓷缸中，加水煮沸取水煮液的母液，之后利用該母液來配制5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的餓螞蝗水煮液。

2.3? 行為痛覺測試

熱板測試：利用智能熱板儀來開展測試，該儀器的溫度應當維持在（52±0.3）℃。用左手抓住大鼠，右手抓出大鼠待測腿的髖關節處，確保大鼠的腿完全伸直，使其測試爪可以與熱板面接觸。同時觸動踏板開關，并計時，后爪將會自主縮回并離開熱板表面，再次觸動開關以停止，將這個時期作為后爪縮回反應潛伏期的HWL。在試驗過程中應盡量確保運用熱板的相同位置，以避免誤差的產生。

壓力測試：采用電子壓痛儀來開展測試。用左手抓住大鼠，右手抓出大鼠待測腿的髖關節處，避免大鼠的腿出現彎曲，將其爪子與試驗板面進行接觸，同時觸動相應的踏板開關，將相應的玻璃落到大鼠的后爪之上，其壓力將會以30 g/s的速度增加，采用相同的方法檢測大鼠機械刺激的HWL。

經過訓練之后，大鼠對熱刺激所產生的HWL將不會超出5 s，對于機械性刺激所形成的HWL不能超出6 s。在喂食藥物之前先需要檢測3組HWL，并將此作為基礎值。在藥物注射之后各個時間點的HWL都應當與基礎值進行對比反映。

2.4? 數據統計分析方法

試驗數據以均值±標準誤（x±s）的形式表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗統計數據并處理，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001均表示統計結果具有顯著性。

3? 結果與分析

試驗給致炎大鼠喂食濃度分別為5.5 mg/mL、11 mg/mL和22 mg/mL的餓螞蝗水煮液3 mL，采用壓板及熱板測試，并對餓螞蝗水煮液對熱刺激和機械刺激所造成的HWL進行記錄。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（5.5 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進行對比，大鼠對機械及熱刺激所產生的HWL變化詳見表1。與生理鹽水組對比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪因受到機械刺激所產生的HWL的差異具備顯著性（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激不存在顯著性（p>0.05），右抓有顯著差異（p<0.05）。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（11 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進行對比，大鼠對機械及熱刺激所產生的HWL的變化詳見表2。與生理鹽水組相比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪機械刺激所產生的HWL存在較顯著的差異性（p<0.01;p<0.01），左、右爪熱刺激均存在顯著的差異性（p<0.05;p<0.01）。

分別將生理鹽水和餓螞蝗水煮液（22 mg/mL）喂食給炎癥模型大鼠，并將兩者進行對比，大鼠對機械及熱刺激所產生的HWL的變化詳見表3。與生理鹽水組相對比，餓螞蝗水煮液喂食組大鼠左、右爪機械刺激所產生的HWL的差異具有顯著性（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激為顯著（p<0.01），右爪熱刺激為極顯著（p<0.001），這表明大鼠的HWL得到了極大的延長。

結果表明，餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠具有一定的消炎鎮痛效果，并且5～10 min之內的效果為最佳，詳見圖1，同時對藥物劑量存在一定的依賴性。

4? 結論與討論

通過試驗觀察，炎癥模型大鼠灌5.5 mg/mL餓螞蝗水煮液后的左、右爪熱刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.05;p<0.05），炎癥模型大鼠的右爪熱刺激存在顯著性差異（p<0.05）。喂食生理鹽水和喂食餓螞蝗水煮液（11 mg/mL）的炎癥模型大鼠進行對比，炎癥模型大鼠灌11 mg/mL餓螞蝗水煮液之后，其左右爪機械刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.01;p<0.01），左、右爪熱刺激存在顯著性差異（p<0.05;p<0.01）。給炎癥模型大鼠喂食22 mg/mL餓螞蝗水煮液與灌生理鹽水作對照，炎癥模型大鼠灌22 mg/mL餓螞蝗水煮液之后的左、右爪機械刺激的HWL都存在顯著性差異（p<0.01;p<0.01），左爪熱刺激為顯著（p<0.01），右爪熱刺激為極顯著（p<0.001），這就表明大鼠的HWL得到了極大延長。

試驗結果表明，餓螞蝗水煮液對炎癥模型大鼠具有一定的消炎鎮痛效果，并且5 min之內的效果為最佳，同時對藥物劑量存在一定的依賴性。此外，已有相關學者研究對動物消炎止痛的相關藥物應用于畜牧生產中。

餓螞蝗成分包括黃酮類、生物堿類、萜類、多酚類及揮發油類等[3-6]。其中黃酮可以抑制炎性生物酶的滲出，可以增進傷口愈合和止痛，已有研究證實，黃酮類化合物對炎癥性疼痛具有緩解作用其作用機制為抑制環氧化酶和脂氧化酶的活性而起到抗炎鎮痛作用[7]。所以，餓螞蝗鎮痛作用的機制有可能是餓螞蝗所含有的黃酮類化合物的消炎鎮痛作用，或者還有可能存在其他因素起鎮痛作用尚待研究[8-14]。

炎癥是一種較為常見的病癥，會導致一系列的動物健康問題，進而影響養殖業的產量。因此，積極研發全新對于動物的抗炎鎮痛藥物具有較大的意義。試驗通過采用向致炎大鼠喂食餓螞蝗的方法，利用壓板及熱板測痛儀來對大鼠開展痛覺測驗，以此來研究餓螞蝗所發揮的抗炎鎮痛作用[15]。試驗為餓螞蝗抗炎鎮痛作用機制的研究提供初步方向，并為畜牧業餓螞蝗治療炎癥動物而提供理論依據[16-18]。