芽孢桿菌蛋白酶復合制劑對蛋雞生產性能和蛋品質的影響

丁 鵬 單紅艷 賀 喜* 趙麗芳 郭寶林 王 璐 宋澤和

（1.湖南農業大學動物科學技術學院飼料安全與高效利用教育部工程研究中心 湖南畜禽安全生產協同創新中心，湖南長沙410128；2.北京昕大洋科技發展有限公司，北京100081）

隨著生活水平的提高，人類對于畜禽產品比以前更加關注品質。雞蛋是日常生活中最常見的畜禽產品之一，也是人類補充蛋白質主要來源之一，如何改善雞蛋蛋品質是畜禽生產中重要的問題。研究表明提高雞蛋蛋品質最主要的方式是從蛋雞日糧入手，改善蛋雞日糧飼料的營養成分，提高蛋雞對飼料養分的消化吸收利用效率，進而改善雞蛋的蛋品質[1-2]。通過將芽孢桿菌添加至畜禽日糧中的大量研究發現，芽孢桿菌可以通過改善動物腸道中的微生態環境，維護動物機體健康，從而促進畜禽生產性能。蛋白酶在畜禽日糧中的應用研究也十分廣泛，在畜禽日糧中添加蛋白酶可以有效的提高動物機體對飼料中蛋白質的消化吸收，改善動物機體生產性能的同時還能產生可觀的經濟效益[3-4]。綜合兩種飼料添加劑應用于畜禽日糧中的研究較為少見，根據前期本課題組在芽孢桿菌制劑對蛋雞的影響研究確定了芽孢桿菌制劑在蛋雞飼養上的最佳添加量，以及結合蛋白酶在家禽飼養上的應用效果，本試驗研究旨在通過在產蛋后期羅曼蛋雞日糧中添加芽孢桿菌蛋白酶復合生物制劑，探討芽孢桿菌蛋白酶復合生物制劑對羅曼蛋雞產蛋后期生產性能及各項蛋品質綜合指標的影響，為芽孢桿菌蛋白酶復合生物制劑在蛋雞生產中的應用提供理論依據，以及為科學高效的改善蛋雞養殖效益提供幫助。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

芽孢桿菌蛋白酶復合制劑中益生菌部分主要由枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌及凝結芽孢桿菌（平均2×1010CFU/g）組成，蛋白酶活性為93 000 U/g。來源于某科技發展公司。

1.2 試驗設計

選取360 羽60 周齡左右體況基本一致的產蛋后期羅曼蛋雞，隨機分為2 個處理，每個處理6 個重復，每個重復30 羽。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組在基礎日糧中添加芽孢桿菌蛋白酶制劑。試驗分為兩個階段，1～14 d 為前階段，試驗組在基礎飼糧中添加500 mg/kg 的芽孢桿菌蛋白酶制劑；15～28 d 為后階段，試驗組在基礎飼糧中添加300 mg/kg 的芽孢桿菌蛋白酶制劑。試驗飼糧及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧配方及營養水平（風干基礎）

1.3 飼養管理與采樣

試驗于2018 年11 月至2018 年12 月在湖南省常德市安鄉縣興鑫蛋雞場進行，根據蛋雞場常規程序進行飼養管理。預試期3 d 后開始正式試驗，試驗期間蛋雞自由飲水，根據蛋雞體重每天人工飼喂2 次，避免蛋雞過肥。在試驗期的最后1 d每個重復隨機拾取10枚雞蛋用于蛋品質相關指標的測定。

1.4 測定指標及測定方法

1.4.1 蛋雞生產性能

在整個試驗期間，每天以重復為單位記錄產蛋數、蛋重和死淘數，稱取剩余飼料重量，記錄蛋雞采食量，并計算產蛋率（%）、平均蛋重（g）、平均日采食量（g）、料蛋比（g/g）和日產蛋量（g），計算所用公式如下：

產蛋率(%)=總產蛋數/（雞只數×試驗天數）×100；

平均蛋重（g）=總蛋重量/蛋個數；

料蛋比（g/g）=總采食量/總蛋重量；

平均日采食量(g)=總采食量/(雞只數×試驗天數)；

日產蛋量（g）=總蛋重量/雞只數。

1.4.2 雞蛋蛋品質測定

蛋形指數：用蛋形指數測定儀(以色列NFN385)進行測定；

蛋殼厚度：采用數顯型游標卡尺量取鈍端、銳端、中腰部位進行測定，取平均值；

蛋殼強度：采用蛋殼強度分析儀進行測定；

蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色采用多功能蛋品質檢測儀測定；

蛋殼重、蛋黃重：將蛋打開, 采用蛋黃分離器分離蛋黃，使用精確到0.01 g 的電子天平分別測定蛋殼重、蛋黃重。

1.5 數據處理與統計分析

采用Excel 2007 和SPSS 20.0 軟件對數據進行整理，數據以“平均數±標準差”表示，兩個處理組間進行t檢驗，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產性能的影響

表2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產性能的影響

由表2 可知，在前期階段（1～14 d）蛋雞生產性能中，芽孢桿菌酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞產蛋率和平均日產蛋量均有所提高，其中產蛋率提高了4.82%，但差異均不顯著（P＞0.05）；料蛋比有所下降（P＞0.05），其余蛋雞生產性能指標均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產性能的影響

由表3 可知，在后期階段（15～28 d）蛋雞生產性能中，芽孢桿菌酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞產蛋率和平均日產蛋量有些許的提高，但未達到顯著水平（P＞0.05）；試驗組料蛋比均有所下降（P＞0.05），其余蛋雞生產性能指標均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產性能的影響

由表4 可知，在各處理組全階段蛋雞生產性能中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組相比對照組羅曼蛋雞平均日采食量有升高的趨勢（P=0.09）；產蛋率和平均日產蛋量均有所提高（P＞0.05）；試驗組料蛋比相比對照組均有所下降（P＞0.05）；各處理組之間雞蛋平均蛋重沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質的影響

表5 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質的影響

由表5可知，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組雞蛋蛋殼強度相比對照組提高了11.37%，有一定的趨勢（P=0.07）；雞蛋蛋黃顏色和蛋黃重量相比對照組就有所提高，但未達到差異顯著（P＞0.05）；雞蛋哈氏單位相比對照組提高了4.39%，但差異不顯著（P＞0.05）；雞蛋蛋殼厚度、蛋殼比重、蛋形指數和蛋白高度均無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞生產性能的影響

益生菌在畜禽飼糧中的應用研究已經十分廣泛，芽孢桿菌作為最常見的益生菌之一，絕大部分將芽孢桿菌應用于畜禽飼糧中的研究表明芽孢桿菌可以通過維護畜禽腸道內環境的穩態，改善畜禽機體的健康狀況，從而有效促進畜禽的生產性能；同樣畜禽飼糧中添加酶制劑在生產應用中已經非常普遍，研究表明將蛋白酶添加到畜禽飼糧中可以有效的改善動物機體對于飼料中蛋白質的消化吸收，提高飼料中蛋白質利用的同時還可以促進畜禽生產性能，帶來良好的經濟效益[5-6]。根據蛋雞生產養殖的特點，在蛋雞產蛋高峰期過后產蛋率及日產蛋量開始逐漸降低，從而進入蛋雞的產蛋后期，如何有效提高蛋雞產蛋后期產蛋率和日產蛋量或者延緩蛋雞產蛋后期來臨時間是提高蛋雞養殖生產收益的關鍵所在[7]。朱復躍[8]將復合枯草芽孢桿菌制劑添加至蛋雞飼糧中研究發現，復合枯草芽孢桿菌制劑試驗組蛋雞產蛋率相比對照組均有所提高，試驗組平均蛋重相比對照組最多提高了13.52%，差異顯著，同時試驗組蛋雞料蛋比相比對照組均有所降低。張旭等[9]同樣在蛋雞日糧中添加一定濃度的枯草芽孢桿菌制劑研究發現，試驗組蛋雞產蛋率及日產蛋量相比對照組均有所提高。裴躍明等[10]研究表明，在產蛋后期蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑后，試驗組蛋雞產蛋率相比對照組最高提升了3.08%，雞蛋平均蛋重最高提升了2.17%，破殼率相比對照組降低了41.94%，料蛋比降低了4.98%，同時枯草芽孢桿菌試驗組蛋雞腹瀉率相比對照組降低了47.6%，有效的改善了蛋雞健康狀況，提高了蛋雞生產性能。說明芽孢桿菌在蛋雞日糧中應用均取得了良好的效果。

本試驗研究中，各處理組之間在每個試驗階段芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞的產蛋率和日產蛋量均高于對照組，且試驗組蛋雞料蛋比低于對照組，從全階段來看，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞平均日采食量相比對照組有提高的趨勢，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑對于產蛋后期羅曼蛋雞的生產性能有一定的促進作用，可以延后蛋雞產蛋后期產蛋量下降的時間，與李俊波等[11]利用芽孢桿菌飼喂蛋雞的試驗結果相類似，有效的提高了蛋雞養殖的經濟效益。

3.2 芽孢桿菌蛋白酶制劑對蛋雞蛋品質的影響

雞蛋蛋品質的評定指標主要分為雞蛋外部指標和內部指標，其中外部指標主要包括蛋形指數及蛋殼相關指標等，蛋品質內部指標主要包括蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃重量及哈氏單位等[12]。蛋雞養殖過程中，雞蛋蛋殼品質是影響雞蛋商業價值的重要因素之一，良好的蛋殼品質可以有效的保證雞蛋運輸等過程的完整，也可以避免軟殼蛋、破殼蛋和畸形蛋的形成。雞蛋蛋殼的主要成分是無機鹽，無機鹽中碳酸鈣的含量達到93%左右，其余多為碳酸鎂及碳酸鎂和碳酸鈣的混合物，約占整個無機鹽含量的3.8%左右，另外，蛋殼中還包含多種礦物元素，如銅、鐵、鋅、錳、硒等。大量研究表明，提高蛋雞雞蛋蛋殼品質的關鍵在于改善蛋雞對飼料中鈣、磷等礦物質元素的消化代謝，陳連民等[13]研究發現，在海蘭褐商品蛋雞日糧中添加芽孢桿菌制劑后，試驗組雞蛋破殼率相比對照組顯著降低，蛋殼重量和蛋殼強度相比對照組顯著提高；雞蛋蛋殼中鈣的沉積水平達到一定程度后，蛋殼中鈣元素含量的高低不再是決定雞蛋蛋殼強度的標準，若蛋殼中鈣元素含量過高而引起蛋殼中鈣元素不均勻將導致沙殼蛋的形成[14]，該試驗研究表明，芽孢桿菌試驗組雞蛋蛋殼中碳元素和氮元素的相對比重顯著高于對照組，而鈣、磷、鎂和氧元素的相對比重顯著低于對照組；通過掃描電鏡對蛋殼斷面的超微結構進行觀察發現，芽孢桿菌試驗組相比對照組蛋殼斷面結構更加整齊致密，乳突層延展厚度和蛋殼乳突間隙較對照組更為優良，說明芽孢桿菌可以通過調節蛋雞機體對飼料中礦物質元素的消化代謝來提高雞蛋蛋殼的機械性能，從而有效的改善蛋殼品質。王文娟等[15]研究發現，枯草芽孢桿菌可以通過抑制蛋雞腸道中大腸桿菌和沙門氏菌的生長繁殖，促進有益菌的增殖，調節腸道菌群平衡的同時改善蛋雞腸道健康，從而改善蛋雞腸道對飼料中營養物質的消化吸收，進而提升雞蛋蛋殼品質。本試驗研究中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組蛋雞蛋殼厚度和蛋殼比重和對照組沒有明顯差異，但是試驗組雞蛋蛋殼強度相比對照組有提高的趨勢，此結果與王翔宇等[16]在蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后的結果相類似，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑可以通過促進蛋雞對于飼料中養分的消化吸收，一定程度上調節鈣磷等礦物質元素的代謝，進而改善蛋殼品質。同樣本試驗中復合生物制劑中的蛋白酶成分也改善了蛋雞對于飼料中營養物質的消化吸收，提高飼料利用率的同時也改善了蛋雞的機體健康狀況，可能一定程度上有益于雞蛋蛋殼品質的提高，芽孢桿菌與蛋白酶之間對于雞蛋蛋殼品質的改善是否存在一定的相關關系還有待進一步研究。

蛋白高度和哈氏單位是評價雞蛋蛋清品質的重要指標之一，主要受雞蛋蛋清中濃蛋白含量的影響，當蛋白高度和哈氏單位的數值越大時，蛋清的粘稠度越高，表示雞蛋蛋清的品質越好，其中哈氏單位的降低表明雞蛋蛋清的凝膠性下降，蛋清品質下降[17]；蛋黃顏色是評價雞蛋品質中比較直觀的指標，在一定范圍內蛋黃顏色的加深，蛋黃顏色評分的提高表示蛋黃品質的上升，研究表明蛋黃顏色的變化取決于蛋雞對飼糧中葉黃素及胡蘿卜素等物質的吸收和蛋雞機體對這些物質的沉積有關[18]。蔣一秀等[19]研究發現，在如皋黃雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后，試驗組雞蛋蛋黃重量相比對照組有提高的趨勢，顯著的提高了試驗組雞蛋蛋白高度和哈氏單位，同時表明0.75%枯草芽孢桿菌添加量的試驗組雞蛋平均蛋重、蛋黃重量、蛋白高度以及哈氏單位相比其他組取得了最優效果。葉密等[20]研究發現，在初產蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌對蛋雞蛋品質有一定的改善作用，其中0.5%枯草芽孢桿菌添加量組相比其余各處理組雞蛋蛋白高度和哈氏單位均顯著提高，同時發現各枯草芽孢桿菌添加試驗組雞蛋蛋清彈性及蛋清黏聚性均顯著高于對照組，雞蛋熟化后蛋黃和蛋清的硬度、黏聚性以及咀嚼度相比對照組均有一定程度的改善，不同濃度的枯草芽孢桿菌制劑均能改善雞蛋蛋品質，且0.5%枯草芽孢桿菌添加量在各項蛋品質指標中表現最佳。綜上說明芽孢桿菌應用于蛋雞日糧中可以有效的改善蛋白高度、哈氏單位及蛋黃顏色等蛋品質指標，而酶制劑如蛋白酶等在蛋雞生產中的應用主要集中在提高蛋雞對飼糧中營養物質的消化吸收，研究其對于蛋雞生產性能的較多，對于蛋品質的研究較為少見。本試驗研究中，芽孢桿菌蛋白酶制劑試驗組雞蛋蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃相對重量以及哈氏單位相比對照組均有所提高，說明芽孢桿菌蛋白酶制劑可以一定程度上改善產蛋后期羅曼蛋雞蛋品質。

4 結論

將芽孢桿菌制劑及蛋白酶制劑復合使用可以有效發揮益生菌作用的同時還可以協同蛋白酶的作用。本研究表明芽孢桿菌蛋白酶復合生物制劑可以提高產蛋后期羅曼蛋雞產蛋率和平均日產蛋量，改善料蛋比；同時可以提高產蛋后期羅曼蛋雞蛋殼強度、蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃重量以及哈氏單位，改善了雞蛋蛋品質，為蛋雞的科學高效養殖提供了新的思路。