抗HIV治療艾滋病合并丙型肝炎對患者T淋巴細胞亞群、NK細胞及HIV載量的影響

邱邦東，徐全敏

四川省宜賓市第二人民醫院感染一科(宜賓 644000)

丙肝病毒(Hepatitis C，HCV)和人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus，HIV)的傳播途徑類似，一般都通過血液、性接觸、母嬰垂直傳播等途徑而感染，因此，臨床發現一部分患者同時存在HIV和HCV感染[1]。HIV感染后，導致廣泛的免疫激活，產生T淋巴細胞，抑制細胞免疫、體液免疫過程，使各種疾病在體內傳播，最終導致艾滋病，直接威脅患者的生命[2]。 HIV和HCV感染傳播的主要途徑是血液傳播。據不完全統計[3]，在靜脈吸毒、有償獻血和受血感染的HIV人群中，合并HCV感染的比例高達80%。流行病學報道顯示[4]，為患者提供正確、合理的抗HIV治療，病毒變異情況能得到一定程度的控制。抗HIV治療能有效抑制病毒復制，降低病毒載量，提高免疫激活，使CD4+T細胞接近正常水平，充分發揮免疫重建的作用[5]。但學界對艾滋病合并丙肝 (HIV/HCV)患者的疾病進展及治療效果是否等同于單純HIV患者的觀點各異。本研究擬探討抗HIV治療對HIV/HCV患者CD4+T細胞數、NK細胞數，以及HIV載量的影響，以分析HIV/HCV患者的疾病進展機制。

資料與方法

1 一般資料 選擇 2016年3月至2018年5月間醫院共收治HIV/HCV患者80例作為觀察組。另選擇同期入住我院接受抗HIV治療的80例單純艾滋病患者作為對照組。觀察組中，男性48例，女性32例，年齡27～56歲，平均(40.24±7.58)歲；經性接觸感染者24例，經輸血感染者29例，經吸毒感染者15例，經其他不明途徑感染者12例。HIV感染時間(13.56±4.77)年，HCV感染時間(12.73±6.38)年。對照組中，男性46例，女性34例，年齡25～58歲，平均(41.35±8.12)歲；經性接觸感染者23例，經輸血感染者27例，經吸毒感染者17例，經其他不明途徑感染者13例。HIV感染時間(14.04±4.98)年，HCV感染時間(12.53±7.01)年。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，經醫院倫理委員批準后納入本研究。

病例納入標準：①艾滋病標準：經ELISA法、Western印跡法確診的HIV-1患者細胞學檢查可見：病毒載量基線平均(5.61±0.72)lg拷貝/ml，CD4+T細胞基線平均計數(112.60±45.32)/μl；符合抗HIV治療條件；無藥物過敏史；告知治療風險，自愿簽署知情同意書。②丙肝標準：參照中華醫學會肝病學分會、中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會發布的《丙型肝炎防治指南》[4]中的標準進行診斷。所有患者均根據其臨床癥狀、體征并結合HCV-Ab、HCV-RNA等輔助檢查結果，明確慢性丙型肝炎的診斷及其基因分型。

排除標準：①排除合并乙型肝炎等其它類型肝炎以及肝癌等其它肝臟器質性病變的患者；②排除近期已經接受慢性丙型肝炎治療的患者；③排除合并全身感染性疾病、心腎功能不全等其它嚴重疾病的患者；④排除依從性差不能完成本研究治療及配合隨訪患者。

2 治療方法 所有患者入院后完善相關檢查，簽署知情同意書，基礎治療包括戒酒、停用可能引起肝損傷的藥物、護肝以及對癥支持治療等。治療方法以抗HIV治療為主，使用藥物為國家提供的免費抗病毒藥物：兩種核苷類似物與一種非核苷類似物或蛋白酶抑制劑聯合使用。治療方案：替諾福韋+拉米夫定+依非韋倫/洛匹那韋/利托那韋(TOF+3TC+EFV/LPV/r)。

3 觀察指標

3.1 T淋巴細胞亞群及自然殺傷細胞(NK細胞)比例檢測：所有入選病例均在治療前及治療6個月后，在清晨空腹下采集外周靜脈血3 ml于添加有抗凝劑的試管內，離心后去上清，置-70 ℃冰箱待檢。對照組在入選時及與觀察組患者間隔相同時間后采用同樣方法采集血樣，分別給予抗CD3單抗-PC5、抗CD4單抗-異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyante，FITC)、抗CD8單抗-藻紅蛋白(P-phycoerythrin，PE)、抗CD16單抗及CD56單抗-PE(均購于美國貝克曼庫爾特公司)，對抗體進行標記，然后采用Beckman-Coulter XL流式細胞儀(Beckman-CoulterXL，MCL)進行T細胞亞群和NK細胞比例的檢測。

3.2 HIV載量：采用Melies核酸擴增熒光定量檢測，最低劑量40 IU/ml，設備選擇Easy Q熒光定量儀。

結 果

1 兩組患者治療前后T淋巴細胞亞群及NK細胞比例的比較 觀察組外周血的CD4+T細胞、CD8+T細胞、CD4+/CD8+以及CD16+CD56+NK細胞水平在治療前后的差值低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2 兩組治療前后HIV病毒載量比較 觀察組患者治療后HIV病毒載量為(2.57±0.76)IU/ml，與對照組治療后(2.52±0.68)IU/ml比較無統計學差異，見表2。

表1 兩組治療前后T淋巴細胞亞群及NK細胞比例的比較

表2 兩組患者治療前后HIV病毒載量比較(IU/ml)

討 論

HIV和HCV病毒都是臨床工作中常見的慢性病毒，二者分別屬于逆轉錄科病毒和黃病毒科病毒，潛伏期較長，具有類似的傳播途徑[6]。在有償獻血、靜脈吸毒及受血感染的HIV 人群中，合并感染HCV 的風險高達80%。HIV合并HCV重疊感染的發病機制尚不明確，而且尚無統一的抗HIV治療方案能明顯緩解病情。

艾滋病合并丙肝患者多數存在細胞免疫功能紊亂，而且病變越重，免疫功能下降也越明顯。T淋巴細胞和NK細胞是身體最重要的免疫細胞之一，T淋巴細胞亞群的數量和比例以及NK細胞的數量與艾滋病合并丙肝的發生與發展均密切相關[7]。T淋巴細胞可分為CD3+T細胞CD4+T細胞以及CD8+T細胞亞群。CD4+T細胞和CD8+T細胞相互影響相互制約，使機體處于一種相對平衡的狀態，其比值是反映免疫調節功能的一項指標，兩者比例的失調可導致免疫功能紊亂[8]。NK細胞可通過直接殺傷病毒感染細胞進行免疫調節，而對正常組織無殺傷作用，是抗病毒的第一道防線[9]。本文兩組患者治療前血液中的CD4+T細胞比例減少，CD8+T細胞比例升高，提示病毒感染細胞可能會產生一些抑制免疫功能的細胞因子，使CD4+T細胞數量減少，而CD8+T細胞的數量及活性反而升高。免疫功能的抑制程度能夠反應艾滋病合并丙肝的進展情況，因此，對艾滋病合并丙肝患者免疫抑制的改善，有可能對艾滋病合并丙肝患者的治療效果發揮一定的作用[10]。本文觀察組治療后的CD4+T細胞、CD4+/CD8+以及CD16+CD56+NK細胞水平高于治療前，而CD8+T細胞水平低于治療前，提示抗HIV治療能夠提高艾滋病合并丙肝患者外周血中的CD4+T細胞、CD4+/CD8+以及CD16+CD56+NK細胞水平，而降低CD8+T細胞水平，但其治療前后的差值低于單純艾滋病患者，提示抗HIV治療對于提高艾滋病合并丙肝患者患者的免疫功能有一定的作用。

另外，HIV感染的主要原因是機體CD4+淋巴細胞減少引起的機體免疫力降低，而CD4+的細胞數量與HIV感染者的病情進展情況有一定聯系[11]。本研究艾滋病合并丙肝患者經過抗HIV治療后，患者體內的CD4+淋巴細胞數有所上升，但低于接受抗HIV治療的單純HIV感染者，說明對HIV合并HCV感染者進行抗HIV治療有助于進一步提高其免疫功能，但不如單純HIV感染者明顯，提示合并HCV感染是HIV感染者免疫力進一步下降的關鍵因素，但不能證明合并HIV感染的HCV患者是否影響HIV病毒復制。本研究也發現，說明HCV可能不影響HIV的復制。

綜上所述，抗HIV治療有助于提高HIV/HCV患者的CD4+T細胞和NK細胞比例，并降低CD8+T細胞比例，改善患者的免疫功能。HIV病毒載量與合并HCV感染無明顯相關性。