血清CHI3L1、CGRP、IL-23在慢性牙周炎患者中的表達及在病情、療效評價中的作用探討

高蕓 孫斌

慢性牙周炎為一種因菌斑微生物與其代謝產物造成的感染性疾病，屬牙周炎常見類型，臨床表現為牙槽骨進行性吸收破壞、牙周附著喪失，于此過程中，機體病原微生物同宿主之間免疫反應扮演著重要角色［1-3］。大量活化免疫細胞可造成宿主對病原菌感染免疫反應，并釋放一系列炎癥因子，致使牙周組織遭受破壞。于免疫細胞抵抗病原菌入侵及破壞過程中，巨噬細胞、中性粒細胞起重要作用［4-5］。幾丁質酶3樣蛋白1（CHI3L1）為一種類幾丁質酶，雖不存在幾丁質酶活性，但能與幾丁質及殼聚糖相結合，近年來，有研究報道，CHI3L1于多種急慢性炎癥性疾病中均呈高表達，可作為一種新型炎癥標志物［6］；降鈣素基因相關肽（CGRP）為一種血管活性肽，具有強烈縮血管作用，相關研究指出，CGRP在抗炎、加速骨代謝及再生、營養神經血管等方面均起著具有作用［7］；白細胞介素-23（IL-23）屬一種輔助性T細胞17（Th17）型細胞因子，與機體免疫調節中起著具有重要，且可反映炎癥反應程度［8］；但目前臨床對CHI3L1、CGRP、IL-23于慢性牙周炎患者中表達及在病情、療效評價中作用的研究報道尚少見，本研究選擇慢性牙周炎患者及同期健康體檢者各106例，對其進行探討，為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取石河子大學醫學院第一附屬醫院2017-04～2019-04慢性牙周炎患者106例為病例組，106例健康體檢者為健康對照組。2組一般資料（體質量、性別、年齡等）均衡可比，差異無統計學意義（P＞0.05）（表1）。本研究經醫院倫理委員會批準。

表1 2組一般資料對比Tab 1 Comparison of the general data between the 2 groups

1.2 選取標準

1.2.1 納入標準 ①病例組符合《口腔科學》［10］中慢性牙周炎有關診斷標準，口內余留牙超過20個，存在牙齦紅腫、出血、牙槽骨吸收、牙周附著喪失等癥狀，近6個月未采取牙周治療；②健康對照組均為健康體檢者，牙周狀況健康；③2組均知曉本研究方案，自愿簽訂知情同意書。

1.2.2 排除標準 ①存在頭頸部放療史、吸煙史者；②合并肝、腎、心、肺等臟器功能嚴重異常者；③合并免疫系統疾病、血液系統疾病、惡性腫瘤者；④近3個月應用免疫抑制劑、抗生素類藥物治療者；⑤其他部位嚴重感染者；⑥合并糖尿病、高血壓、腦血管疾病者；⑦妊娠、哺乳期女性。

1.3 方法

1.3.1 檢測方法 ①樣本采集：抽取受檢者5 ml清晨空腹肘靜脈血樣，裝至真空采血管內，混均，應用離心機進行離心處理15 min，轉速3 000 r／min，離心半徑8 cm，離心完成后取上層血清，置入無菌Ep管內于-80℃中儲存待檢，剔除溶血標本；②檢測方法：采用酶聯免疫吸附法測定血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平，試劑盒購于上海西唐生物科技有限公司，相關操作嚴格按儀器說明書由醫院專業檢測人員完成。

1.3.2 治療方法 對病例組患者均采取牙周基礎治療：施行口腔衛生宣教，使患者認識到控制牙菌斑重要性；協助患者掌握Bass刷牙法與水牙線、牙間隙刷、牙線等工具的具體操作及應用方法；而后以牙周綜合治療儀施行根面平整術、齦下刮治術、齦上潔治術；術中輔助應用Gracey刮治器，清除牙齒表面牙結石，拔除預后極差與無保留價值患牙；術后予以生理鹽水與雙氧水混合液30 ml沖洗牙周袋，在齦袋內予以碘甘油，并口服鹽酸克林霉素（廣州一品紅制藥有限公司，國藥準字H20030434，75 mg／片）2片／次，3次／d，持續服用4 d。囑咐患者在治療后1個月復診，評價療效。

1.4 觀察指標

①2組血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平；②病例組不同病情程度（中重度、輕度）血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平；③病例組不同療效（療效良好、療效較差）患者血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平。療效判定方法［11］：治療后1個月進行療效評價，顯效：患者臨床癥狀全部消失，牙周袋深度減少＞2 cm，牙齦指數下降＞50%；有效：臨床癥狀有所減輕，牙周袋深度減少＞1 mm，但≤2 cm，牙齦指數下降25%～50%；無效：臨床癥狀未見減輕，牙周袋深度減少≤1 mm，牙齦指數下降＜25%，將顯效、有效計入療效良好，無效計入療效較差；④應用Spearman相關分析探討血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平與慢性牙周炎患者病情、療效的相關性。

1.5 統計學分析

2 結 果

2.1 2組血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平

病例組血清CHI3L1、IL-23水平高于健康對照組，血清CGRP水平低于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表2）。

表2 2組血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平比較（）Tab 2 Comparison of serum CHI3L1，CGRP and IL-23 levels between the 2 groups （）

表2 2組血清CHI3L1、CGRP、IL-23水平比較（）Tab 2 Comparison of serum CHI3L1，CGRP and IL-23 levels between the 2 groups （）

組 別 n CHI3L1（ng／ml）CGRP（ng／L）IL-23（μg／L）病 例 組106 40.26±12.07 1.58±0.36 1.37±0.16健康對照組106 33.75±8.92 5.62±2.14 0.74±0.12 t值 4.466 19.167 32.431 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 不同病情程度患者血清指標水平

病例組病情程度為中重度患者血清CHI3L1、IL-23水平高于輕度患者，血清CGRP水平低于輕度患者，差異有統計學意義（P＜0.05）（表3）。

2.3 不同療效患者血清指標水平

病例組療效較差患者血清CHI3L1、IL-23水平高于療效良好患者，血清CGRP水平低于療效良好患者，差異有統計學意義（P＜0.05）（表4）。

表3 病例組不同病情程度患者血清指標水平比較 （）Tab 3 Comparison of serum indicators in patients with different degrees of disease （）

表3 病例組不同病情程度患者血清指標水平比較 （）Tab 3 Comparison of serum indicators in patients with different degrees of disease （）

組 別 n CHI3L1（ng／ml）CGRP（ng／L）IL-23（μg／L）中重度患者44 44.96±12.85 1.17±0.39 1.59±0.17輕 度 患 者62 36.92±9.74 2.16±0.31 1.21±0.14 t值 3.664 14.544 12.590 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

表4 病例組不同療效患者血清指標水平比較 （）Tab 4 Comparison of serum indicators in patients with different therapeutic effects （）

表4 病例組不同療效患者血清指標水平比較 （）Tab 4 Comparison of serum indicators in patients with different therapeutic effects （）

組 別 n CHI3L1（ng／ml）CGRP（ng／L）IL-23（μg／L）療效較差81 38.27±9.12 2.04±0.37 1.14±0.13療效良好 25 34.06±8.79 2.72±0.46 0.80±0.18 t值 2.034 7.570 10.385 P值0.045 ＜0.001 ＜0.001

2.4 血清各指標水平與慢性牙周炎患者病情、療效的相關性

血清CHI3L1、IL-23水平與慢性牙周炎患者病情程度呈正相關，與患者療效呈負相關，血清CGRP水平與慢性牙周炎患者病情程度呈負相關，與患者療效呈正相關（P＜0.05）（表5）。

表5 血清各指標水平與慢性牙周炎患者病情、療效的相關性（n＝106）Tab 5 The correlation between serum indexes and the severity and treatment effect of CP （n＝106）

3 討 論

慢性牙周炎為口腔科常見疾病之一，屬造成牙缺失的主要原因，發病涉及炎癥介質、炎癥細胞群、細菌產物之間相互作用［12-14］。CHI3L1為幾丁質酶家族中一員，于類風濕性關節炎、炎癥性腸病、慢阻肺、支氣管哮喘等炎癥性疾病中均具有高表達［15］。本研究顯示，病例組血清CHI3L1水平高于健康對照組。表明CHI3L1與慢性牙周炎發生、進展密切相關。CHI3L1主要由活化巨噬細胞、中性粒細胞產生，可一定程度提示巨噬細胞活化程度，具有調節細胞活化、增殖、黏附、遷移及細胞外基質等生物活性，能刺激基質金屬蛋白酶9、單核細胞趨化蛋白-1、基質細胞衍生因子等炎癥介質產生，且表達受腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ、IL-6等促炎細胞抑制的調節，可作為新型炎癥因子之一，可推測其可能通過活化巨噬細胞等體內免疫細胞促進慢性牙周炎發生、進展［16］。李鑫等［17］研究亦指出，慢性牙周炎患者唾液及血漿內CHI3L1顯著高于健康人群。本研究中，病例組病情程度為中重度患者血清CHI3L1水平高于輕度者，病例組療效較差者高于療效良好者，且相關性分析顯示，其表達與患者病情程度呈正相關，與療效呈負相關。表明血清CHI3L1表達與慢性牙周炎患者病情、療效具有密切關系。分析其原因可能為病情程度越嚴重患者巨噬細胞活化程度越高，致使CHI3L1分泌增多，而CHI3L1表達可側面反映機體炎癥反應、巨噬細胞活化、牙周組織破壞程度，也可作為療效評價輔助指標。

CGRP是一種37個氨基酸所組成的血管活性肽，除能促進血管收縮外，還能起到促進骨代謝和再生、抑制炎癥等作用［18］。晏鶯等［19］研究報道，侵襲性牙周炎患者血清CGRP表達較正常體檢者顯著偏高。本研究顯示，病例組血清CGRP水平低于健康對照組。亦表明CGRP與慢性牙周炎發生、發展具有密切關系。分析其原因可能為：①因患者機體中內皮素-1表達較高與CGRP相拮抗，致使血液中CGRP濃度過度消失，進而導致血液內CGRP表達降低；②因患者牙齦內存在許多厭氧菌，進而導致缺氧程度加重，神經遭受損害，從而使血液內CGRP表達降低等［20］。本研究中，病例組病情程度為中重度者血清CGRP水平低于輕度者，病例組療效較差者低于療效良好者，且相關性分析可知，其表達與患者病情程度呈負相關，與療效呈正相關。提示血清CGRP表達與慢性牙周炎患者病情、療效密切相關。推測其原因為病情越嚴重患者牙周組織破壞與缺氧程度越嚴重，進而致使血清CGRP表達降低；而CGRP可參與骨發育、修復、重建及神經源性炎癥等過程，能反映牙周組織破壞、重建及炎癥情況，可用于輔助療效評價。

IL-23為Th17型細胞因子之一，在機體免疫調節中具有重要作用，且有研究指出，其表達可調控牙槽骨破壞吸收過程［21］。本研究顯示，病例組血清IL-23水平高于健康對照組。表明IL-23與慢性牙周炎產生、進展密切相關。IL-23主要由活化樹突細胞、單核巨噬細胞分泌，可提高CD4+T細胞表達，促進T細胞與抗原提呈細胞分泌IL-12及干擾素-γ，調節樹突細胞共刺激功能，與自身免疫及炎癥反應具有密切關系。趙華兵［22］研究指出，Toll-Like受體和細菌產物相結合后能促進細胞產生IL-23。常煒等［23］研究亦報道，牙周炎患者齦溝液中IL-23表達顯著增高。此外，本研究中，病例組病情程度為中重度者血清IL-23水平高于輕度者，療效較差者高于療效良好者，且相關性分析顯示，其水平與患者病情程度呈正相關，與患者療效呈負相關。表明血清IL-23表達與慢性牙周炎患者病情、療效具有密切關系。IL-23可維持牙齦正常生理狀態，表達與牙周組織破壞及炎癥狀況密切相關，可作為病情、療效評價的重要指標。

綜上所述，血清CHI3L1、IL-23在慢性牙周炎患者中呈高表達，血清CGRP呈低表達，且其表達與患者病情、療效具有密切關系，通過檢測其表達可為疾病診治提供有力依據。