加味白頭翁顆粒對雞大腸桿菌病的療效觀察

李連缺,高紅梅,趙 達,劉 明,于合宅

(1.河北工程大學生命科學與食品工程學院,河北 邯鄲056000;2.石家莊市獸藥監察所,河北 石家莊 050000;3.石家莊江山動物藥業有限公司,河北 石家莊 050000;4.河北省望都縣動物疫病預防控制中心,河北 保定 071000)

雞大腸桿菌病是家禽養殖業中常見疾病,普遍存在于我國各個養殖場,具有發病率高、死亡率高的特點,若不得到及時有效的治療,會帶來嚴重的經濟損失。目前主要應用抗生素來防治雞大腸桿菌病,但長時間大量使用抗生素導致耐藥菌株不斷出現,動物產品抗生素殘留嚴重[1-2]。近年來研究表明,中藥防治雞大腸桿菌病具有獨特的優勢。我們研制開發出加味白頭翁顆粒,通過對自然感染大腸桿菌病雞的治療效果,考察和評價加味白頭翁顆粒防治雞大腸桿菌病的有效性,為獸醫臨床應用提供依據。

1 材料

1.1 試驗藥品 加味白頭翁顆粒,由白頭翁、黃連、黃柏、秦皮、白芍、甘草、當歸、木香、木通組成,每1 g相當于原生藥1 g,石家莊江山動物藥業有限公司研制生產(批號20171023);磺胺間甲氧嘧啶鈉可溶性粉(10%,批號20170308),石家莊江山動物藥業有限公司生產;不含任何抗生素的全價飼料,石家莊江山飼料有限公司提供。

1.2 試驗動物 選擇石家莊平山中山種雞場自然發生大腸桿菌病的雞,經臨床及實驗室診斷為雞大腸桿菌病,共250 只。

2 方法

2.1 自然發病病例的確診

2.1.1 臨床癥狀 觀察并記錄雞大腸桿菌病病雞臨床癥狀,主要表現為精神沉郁、食欲下降、羽毛松亂、兩翅下垂、閉眼縮頸,拉黃白色稀糞,有的雞出現癱瘓和輕微神經癥狀。

2.1.2 病理剖檢 將疑似為大腸桿菌感染的病死雞隨機選10 只進行剖檢觀察,進一步確診雞是否為致病性大腸桿菌感染并做好記錄,同雞大腸桿菌病剖檢特征變化進行對比觀察。雞大腸桿菌病剖檢特征變化：氣囊增厚,表面有纖維素性滲出物;肝充血腫大易碎,漿膜增厚,有大量滲出物且見出血點或壞死灶;脾腫大,有小出血點;心臟呈心包炎,心包內有大量纖維素性滲出物,從肝、脾中均可分離出大腸桿菌。

2.1.3 實驗室診斷 剖檢病雞,無菌取心血進行涂片,并將其進行革蘭染色,顯微觀察鑒定。無菌取肝臟細菌接種到普通營養瓊脂表面,37 ℃培養12 h,如果有菌落長出,再劃線接種于麥康凱及伊紅美藍培養基上做細菌鑒定。將分離純化后的致病菌,接種至生化培養基中,37 ℃培養48 h 后觀察記錄結果。

2.1.4 動物試驗 將純培養物用無菌生理鹽水洗下,以0.2 mL/羽口服感染幼雛,觀察可否引起急性敗血癥死亡。

2.2 加味白頭翁顆粒防治雞大腸桿菌病試驗

2.2.1 試驗分組及處理 將250 只病雞隨機分成5 組,每組50 只,試驗分組及處理見表1。各組雞自由采食,連續給藥7 d,同時各組給予相同的飲水、光照、溫度等飼養環境。試驗期內每天對試驗雞進行療效觀察,記錄患病雞的精神狀態、食欲,糞便狀態,死亡率,死亡剖檢變化,明確病因,統計其治療情況并進行統計分析,直到給藥第7 天。

表1 試驗動物分組及處理

2.2.2 療效判定標準 治愈：精神狀態、采食飲水、糞便等恢復正常,且病理癥狀完全消失;經剖檢后肝臟滲出物經接種分離,不能檢查出大腸桿菌且肝臟及腸道無明顯大腸桿菌所致病理變化。有療效：精神狀態、飲食、排糞有好轉,癥狀明顯減輕;經剖檢后肝臟滲出物經接種分離,能或不能檢查出大腸桿菌且顯肝臟及腸道無或有輕微大腸桿菌所致病理變化。無療效：癥狀無好轉甚至死亡,剖檢有明顯的心包炎、肝周炎等典型大腸桿菌病癥狀;經剖檢后肝臟滲出物能分離出大腸桿菌且顯肝臟及腸道有明顯的大腸桿菌所致病理變化。

3 結果

3.1 臨床診斷 該雞場病雞精神沉郁,喜睡呆立,運動遲緩,羽毛雜亂,不時發出不正常叫聲,飼養房吵鬧,糞便黃白色,有時混有血液,有部分雞出現呼吸困難、臥地不起、跛行癥狀。

3.2 剖檢癥狀 打開胸腹腔可見氣囊壁混濁、增厚,有黃白色干酪樣滲出物附著,心包膜增厚,附著有大量滲出物,心包膜和胸腔粘連;肝腫大,表面有淡黃色纖維蛋白膜附著;胸腔內有許多纖維素性滲出物,腸系膜粘連。

3.3 實驗室診斷 鏡檢可見紅色、單個或并排存在、兩端呈鈍圓、短桿狀的細菌菌體。肝臟致病菌在普通營養瓊脂上長出灰白色、半透明、圓形的菌落;麥康凱培養基上長出桃紅色的圓形菌落;伊紅美藍培養基上長出帶金屬光澤的菌落;生化試驗顯示：葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘露醇產酸產氣,甲基紅試驗陽性。

3.4 動物試驗 觀察發現,被感染幼雛全部死亡,取病料涂片、染色、鏡檢及分離培養,所獲結果與前相同。根據臨床癥狀、剖檢變化和實驗室檢查結果,最后確診為雞大腸桿菌病。

3.5 加味白頭翁顆粒防治雞大腸桿菌病試驗 各藥物試驗組雞在24～48 h 間死亡較多,72 h 后精神開始好轉,采食飲水逐漸恢復正常。空白未治療組在整個試驗期間大部分精神不振、食欲減少,出現死亡。試驗結果見表2。

表2 加味白頭翁顆粒對雞大腸桿菌病治療效果

由表2 可知,加味白頭翁顆粒中、高劑量組和磺胺間甲氧嘧啶鈉可溶性粉組對雞大腸桿菌病均有較好的防治效果。加味白頭翁顆粒中、高劑量的治療效果略強于磺胺間甲氧嘧啶鈉可溶性粉,二者的無效率均低于磺胺間甲氧嘧啶鈉可溶性粉,差異顯著(P＜0.05)。加味白頭翁低、中、高劑量組中以中劑量組有效率最高,療效最好。

4 討論

根據雞大腸桿菌病的臨床表現、病理變化,按中獸醫辯證施治理論,雞大腸桿菌病是疫毒內侵、血淤氣滯、肺胃熱盛、濕熱下注膀胱引起[3-4]。對癥施治時應該考慮施以清熱解毒、涼血燥濕、利水通尿的中藥為主。試驗中加味白頭翁顆粒是在經典方劑“白頭翁散”的基礎上研制而成。復方中白頭翁、黃連、黃柏、秦皮能清熱燥濕、瀉火解毒。而現代藥理研究資料表明,該四味中藥對痢疾桿菌和大腸桿菌有較強的抗菌殺菌作用。另外白頭翁、秦皮二藥兼具對腸道有收斂止瀉的作用。白芍、甘草同用,有緩急止痛的功效。當歸、木香等既有行氣、活血、通經、止痛功效又有引諸藥入經的作用。木通具有清心火、利小便、通經下火等功效。故本方具有清熱燥濕,行氣止痛,利水通尿作用。因此,對雞大腸桿菌病具有明顯的療效。

本試驗以加味白頭翁顆粒對患大腸桿菌病雞的治愈率、有效率和無效率進行統計分析,是為了方便考察單個試驗雞,無效反映了病情沒有減輕反而加重甚至死亡;有效是相對于無效而言,病情有所減輕但各種健康指標還沒有完全恢復,這部分雞在延長用藥后可能逐漸治愈。該試驗中所用的加味白頭翁顆粒對自然感染大腸桿菌所致的雞大腸桿菌病的有效率均達到86%以上,療效顯著,且以中劑量組的治療效果最理想。該藥為純中藥制劑,殘留少,不易產生耐藥性,是治療雞大腸桿菌病較好的藥物之一。